内皮祖细胞(EPCs)在心脏移植物血管病变(CAV)中的研究进展

内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是一类能分化为成熟内皮细胞(endothelial cells,ECs)的内皮前体细胞,具有促进损伤血管修复和新生血管形成的特点。研究发现EPCs在心脏移植物血管病变(cardiac allograft vasculopathy,CAV)的发生和发展中起着重要作用,移植后供心血管内皮损伤可以触发EPCs的修复过程。本文综述了移植物血管病变的发生发展过程中EPCs的归巢和分化,探讨了EPCs对CAV的预测、诊断和治疗价值。

健脾补肾活血方含药血清调控PI3K/Akt信号通路影响大鼠内皮祖细胞功能的机制

目的探讨健脾补肾活血方含药血清影响大鼠骨髓源内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、成管功能的机制,以期为该方治疗缺血性脑血管病提供理论依据。方法SD大鼠12只,随机分为两组:中药组和对照组,每组6只。分别给予每毫升含生药为3.25 g健脾补肾活血方颗粒药液和CMC-Na溶液灌胃,采集血清,组内混合,保存备用。SD大鼠2只,取骨髓EPCs,并培养、鉴定。将EPCs随机分为8组:空白组(KB),低、中、高浓度含药血清组(Lx、Mx、Hx),PI3K抑制剂组(PI),低、中、高浓度含药血清+PI3K抑制剂组(Lp、Mp、Hp)。分别给予同等体积的对照组混合血清,10%、20%、40%浓度中药组混合含药血清,30μmol·L^(-1)浓度LY294002,10%、20%、40%浓度中药组混合含药血清+30μmol·L^(-1)浓度LY294002。Western blot、CCK8、Tranwell、体外成血管试剂盒分别检测各组EPCs p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K的相对蛋白表达量、增殖、迁移、成管能力。结果与空白组(KB)比较,健脾补肾活血方低、中、高浓度含药血清组(Lx、Mx、Hx)EPCs p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K的相对蛋白表达量、增殖、迁移、成管能力明显提高(P<0.05)。PI3K抑制剂组(PI)和空白组(KB),低、中、高浓度含药血清+PI3K抑制剂组(Lp、Mp、Hp)和与之分别对应的Lx、Mx、Hx组相比较,EPCs p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K的相对蛋白表达量、增殖、迁移、成管能力明显下降(P<0.05)。结论健脾补肾活血方可调控PI3K/Akt信号通路提高大鼠骨髓源EPCs增殖、迁移及成管能力。

受体骨髓源性内皮祖细胞(EPC)对小鼠移植性动脉硬化的影响

目的探讨输入受体骨髓源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)对移植性动脉硬化的影响。方法密度梯度离心法联合贴壁诱导法分离培养小鼠骨髓源性EPC,并对其进行鉴定。利用小鼠同种异体腹主动脉移植(以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体)建立移植性动脉硬化模型,术后通过尾静脉将体外培养的EPC输入模型体内,2周后观察移植动脉内膜损伤修复情况及病理改变;术后4周用计算机图像分析系统测量移植动脉新生内膜增生情况。结果骨髓源性单个核细胞(mononuclear cell,MNC)体外可诱导培养出EPC,其细胞表面既表达干细胞标记,又表达内皮细胞特异性标记,并具有内皮细胞的生物学功能。小鼠腹主动脉移植术后2周,EPC输入组移植动脉内膜损伤较对照组明显加重。术后4周,EPC输入组移植动脉新生内膜厚度及管腔狭窄程度较对照组显著增加。结论受体骨髓源性EPC参与移植动脉新生内膜形成。输入外源性EPC加重移植动脉内膜损伤,对移植性动脉硬化起促进作用。

Id-1介导E2-2对PI3K/Akt信号通路及内皮祖细胞增长的影响

目的探讨分化抑制因子1(Id-1)和转录因子E2-2(E2-2)对PI3K/Akt通路的影响情况,并明确其在内皮祖细胞(EPCs)增长中的作用。方法采用免疫共沉淀检测Id-1及E2-2是否存在相互作用。在EPCs细胞模型中,过表达及干扰Id-1及E2-2,采用CCK-8法检测细胞增长情况,RT-PCR和Western blot技术检测PI3K及Akt表达水平。结果免疫共沉淀检测发现,Id-1及E2-2之间存在蛋白-蛋白相互作用。过表达Id-1可显著下调E2-2表达水平,上调PI3K/Akt表达水平,细胞增长能力增强;过表达E2-2后PI3K/Akt表达降低,细胞增长减弱;共转染Id-1及E2-2则发现,二者可协同影响PI3K/Akt表达水平。结论 Id-1和E2-2之间存在相互作用,Id-1对PI3K/Akt起促进作用,而E2-2则发挥抑制效应,二者协同调控PI3K/Akt信号通路,进而影响EPCs的增长。

出血性脑卒中患者急性期外周血内皮祖细胞数量变化的初步研究

目的探讨循环内皮祖细胞(EPC)在出血性脑卒中患者急性期外周血中的变化及临床意义。方法用流式细胞术检测3例出血性脑卒中患者急性期外周血中EPC的数量,并观察出血性脑卒中急性期外周血循环内皮祖细胞(PBEPC)变化趋势。结果出血性脑卒中患者外周血中EPC在超急性期含量明显增多,并随时间延长其含量逐渐降低,在急性期第7天再次达到高峰;EPC的动员能力可能随年龄增长减弱,外周血中EPC含量水平与患者预后有一定的相关性。结论 EPC变化可能与脑卒中的预后有密切关系,有望作为出血性脑卒中预后观察的指标,同时为出血性脑卒中的治疗提供了一条新思路,为今后治疗出血性脑卒中的自体干细胞移植提供了一定的理论基础。

MAPK信号通路介导血管紧张素Ⅱ对人外周血早期内皮祖细胞的功能调节

目的探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对内皮祖细胞（EPCs）增殖、迁移、黏附功能的影响及MAPK信号通路在其中的作用。方法取健康成人外周血分离、培养出EPCs并鉴定。以不同浓度AngⅡ（0．1、1、10、100μmol／L）干预，得出最佳浓度用于后续干预实验。分组：对照组、AngⅡ组、JNK抑制剂SP600125＋AngⅡ组、ERKI／2抑制剂A6355＋AngII组和p38抑制剂PDl69318＋AngⅡ组。检测各组EPCs的增殖、迁移、黏附能力。结果AngII对EPCs增值能力无显著影响；AngⅡ可促进EPCs的迁移、黏附功能，在1μmol／L时达到最大效果。AngII对EPCs迁移功能的促进作用能被JNK抑制剂SP600125（P〈0．01）、ERK1／2抑制剂A6355（P〈0．01）和p38抑制剂PD169318（P〈0．05）抑制。其中，ERK1／2抑制剂A6355的抑制作用最显著。AnsⅡ对EPCs黏附功能的促进作用可被JNK抑制剂SP600125（P〈0．05）、ERK1／2抑制剂A6355（P〈0．01）和p38抑制剂PD169318（P〈0．05）抑制。结论AngⅡ可能通过激活MAPK信号通路促进EPCs的迁移、黏附功能。

缺血性脑血管病患者颈动脉粥样硬化程度与循环内皮祖细胞的相关性分析

目的探讨缺血性脑血管病患者颈动脉粥样硬化程度与循环内皮祖细胞(EPCs)的相关性。方法根据CD133和KDR标记,采用流式细胞仪检测缺血性脑血管病患者(包括TIA、急性脑梗死、颈动脉粥样硬化)和健康体检者外周血内皮祖细胞(EPCs)数量变化。结果缺血性脑血管病患者EPCs数量较对照组明显减少(P<0.01);随着颈动脉粥样硬化程度加重,EPCs数量呈降低趋势,颈动脉重度狭窄与轻度和中度狭窄相比有差异(P<0.05);急性脑梗死和TIA患者较单纯颈动脉粥样硬化患者EPCs数量明显增加(P<0.01)。结论缺血性脑血管病患者EPCs与颈动脉粥样硬化程度呈负相关,可反映颈动脉粥样硬化的程度;急性缺血可能会增加EPCs的动员。

瓜蒌皮注射液对缺血缺氧的内皮祖细胞保护作用

目的探讨瓜蒌皮注射液对缺血缺氧的内皮祖细胞(EPC)的保护作用及机制。方法提取大鼠骨髓单个核细胞,M199培养基添加血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)诱导培养成EPC。将能吸收凝集素和乙酰化低密度脂蛋白的EPC进行低氧无血清培养以成缺血缺氧损伤模型,同时在培养液中添加系列质量浓度的瓜蒌皮注射液培养上述细胞,MTT法检测其存活率,ELISA法检测细胞VEGF分泌量。结果和对照组相比,缺血缺氧组EPC存活率、VEGF分泌水平均显著低下;瓜蒌皮注射液处理可明显升高细胞存活率、VEGF表达量,作用效果与剂量密切相关。结论瓜蒌皮注射液可能通过促进VEGF的表达,从而提高EPC缺血缺氧条件下的生存能力。

内皮祖细胞移植对百草枯中毒所致急性肺损伤MAPK通路蛋白表达的影响

目的观察百草枯(PQ)中毒导致的急性肺损伤后内皮祖细胞(EPCs)移植治疗对大鼠肺组织丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路蛋白表达的影响。方法36只SD雄性大鼠按随机数字表法平均分成三组:正常对照组、PQ损伤组和EPCs治疗组,每组12只。EPCs移植后24 h处死大鼠并收集大鼠肺组织和血清。分别采用比色法测定肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中细胞炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,血气分析仪检测大鼠动脉血氧分压(PaO_(2)),肺组织切片后通过HE染色对肺损伤程度进行评估,Western blot方法测定肺组织中MAPK信号通路蛋白表达。结果与对照组比较,PQ损伤组大鼠血清IL-1β(μg/L:25.16±1.71 vs.34.94±1.68)和TNF-α(μg/L:51.17±2.33 vs.78.46±5.16)含量明显增加(P<0.05),PQ损伤组大鼠肺组织中MDA(nmol/m L:3.08±0.19 vs.6.89±0.44)含量明显增加(P<0.05),但是SOD(U/m L:249.11±4.71 vs.191.15±3.21)活性降低,且PaO_(2)(mm Hg:92.19±3.31 vs.40.18±5.54)下降(P<0.05);与PQ损伤组比较,EPCs治疗组大鼠SOD(U/m L:191.15±3.21 vs.216.64±2.39)活性升高(P<0.05),MDA(nmol/m L:6.89±0.44 vs.5.13±0.40)、IL-1β(μg/L:34.94±1.68 vs.26.11±1.43)和TNF-α(μg/L:78.46±5.16 vs.60.18±4.31)含量降低(P<0.05),PaO_(2)(mm Hg:40.18±5.54 vs.56.81±5.16)升高(P<0.05)。MAPK通路蛋白的磷酸化水平在对照组中仅有少量表达,而给予百草枯后表达量显著升高(P<0.05),使用EPCs治疗后各蛋白表达量又显著降低(P<0.05)。结论百草枯中毒可激活包含p38MAPK、C-JUN氨基末端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)在内的MAPK通路。EPCs可以改善PQ中毒大鼠症状,减少肺部损伤,改善供氧,其机制可能与抑制MAPK通路各蛋白磷酸化有关。

内皮祖细胞移植对百草枯中毒致急性肺损伤小鼠酸敏感离子通道-1a的影响

目的探讨内皮祖细胞(EPCs)移植对百草枯(PQ)中毒所致的急性肺损伤(ALI)小鼠的作用机制。方法采用密度梯度离心联合贴壁培养法分离培养小鼠外周血EPC,为后期移植提供供体细胞。应用腹腔注射法建立百草枯所致的急性肺损伤(PQ-ALI)小鼠模型,建模成功后小鼠分为四组:正常对照组、模型组、PQ损伤组、EPCs治疗组(每组9只),移植后48 h处死小鼠并取肺组织,检测肺组织湿干质量(W/D)比值、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)含量及肺组织中酸敏感离子通道-l a(ASICla)的表达。结果①正常对照组与模型组比较小鼠肺W/D无明显变化(两者W/D比值分别为3.72、3.67),差异无统计学意义(P>0.05);PQ损伤组小鼠肺组织W/D比值为9.80,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);尾静脉E PC移植后(EPCs组)可以明显降低小鼠肺组织W/D比值,其值为4.91,与P Q损伤组比较差异有统计学意义(P<0.05)。②正常对照组及模型组中TNF-a分别为226 n g/L和204 n g/L,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);PQ损伤组小鼠肺组织中TNF-a为382 ng/L明显增高,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);EPCs治疗组小鼠肺组织TNF-a为276 n g/L呈下降趋势,与P Q损伤组比较差异有统计学意义(P<0.05)。③PQ损伤组和EPCs治疗组小鼠肺组织中ASICU的表达量分别为1.73和1.12,均较正常对照组ASICla的表达量(0.56)明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);EPCs治疗组小鼠肺组织中ASICla的表达量低于PQ损伤组(P<0.05);模型组小鼠ASICla的表达量为0.54和治疗对照组小鼠肺组织中ASICla的表达量最少,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论PQ-ALI小鼠模型机制可能和ASICla激活有关,EPC移植可改善PQ中毒所致ALI小鼠状态,可能和下调ASIC1a的表达相关,但具体机制尚未清楚。

内皮祖细胞对脂多糖刺激活化后中性粒细胞分泌功能的影响

目的观察内皮祖细胞（EPC）对脂多糖刺激大鼠中性粒细胞（PMN）生成肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、中性粒细胞蛋白酶（NE）及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的影响。方法分别分离培养EPC及PMN，随机分为3组（PBS组、LPS组和EPC组），EPC组以1×l矿／孔密度将EPC接种于24孔板，贴壁后再加入同等密度的PMN，用终浓度1μg／mL的脂多糖刺激活化6h；PBS组及LPS组中仅加入同等密度的PMN，分别给予等浓度的PBS及LPS刺激6h；分别收集培养的上清及细胞检测各组TNF—α、IL-1β、NE及MMP-9的表达。结果LPS组中TNF—α、IL-1β、NE及MMP-9表达较PBS组显著增加，而它们在EPC组的表达较LPS组显著降低（P〈0．05）。结论EPC能抑制PMN的分泌功能。

缓释的碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位(EPCs)增殖、分化、成熟,以及血管化的影响。方法制备分别含有b FGF/VEGF和不含b FGF/VEGF的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)水凝胶,分为A、B 2组。同时包埋EPCs,流式细胞仪检测培养7 d后的细胞存活率,倒置显微镜观察EPCs的生长及长入水凝胶的情况并计数,分析b FGF、VEGF对EPCs存活率的影响。培养7 d后用定量实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测总RNA量,并检测PECAM1、CD34、KDR、Angiopoietin-2、pcdh12基因的表达。然后用酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测2组去水凝胶的培养上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,并用荧光法检测水凝胶的降解速度,b FGF、VEGF对EPCs释放MMP的影响。最后以鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)技术检测含有b FGF、VEGF的水凝胶体外诱导血管新生的作用。结果 A组水凝胶,消化7 d后,流式细胞仪检测发现39.43%的EPCs尚存,B组4.14%;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。水凝胶表面种植EPCs可观察到的细胞数A组为378.333 3,B组为302.333 3;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法检测2组中MMP-2、MMP-9的表达,发现水凝胶中MMP-2和MMP-9随时间推移在72 h内持续释放,A组较B组释放浓度显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光法检测水凝胶的降解发现,从第1天开始,A组水凝胶降解百分比急速升高,之后增长速度减缓,而B组呈继续增长之势,差异有统计学意义。定量RT-PCR检测发现A组较B组基因Ct值高,且差异有统计学意义(P<0.05)。CAM技术检测发现A组(空白组)、B组(不含b FGF、VEGF组)、C组(含b FGF、VEGF组)的新生血管总数分别为9、25、36;两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外研究证实,缓释的b FGF、VEGF不仅能促进水凝胶中EPCs增殖、分化、成熟,以及血管化,还能刺激血管新生。

结肠癌患者外周血内皮祖细胞数量及其功能的变化

目的观察结肠癌患者外周血内皮祖细胞(EPC)数量及其功能的变化。方法选择结肠癌患者32例和对照组34例,密度梯度法分离人外周血中单个核细胞,分化培养14 d后,采用RT-PCR法检测内皮细胞特异性成分内皮源型一氧化氮合酶(ecNOS),胎肝激酶-1(Flk-1/KDR)的表达,采用D il标记的乙酰化低密度脂蛋白(acLDL-D il)和FITC-UEA-1对细胞染色分别鉴定贴壁细胞为EPC。采用集落形成试验、改良的Boyden小室及黏附能力测定EPCs的迁移和黏附能力。结果结肠癌患者外周血EPC数量明显增多,黏附能力,迁移能力异常增高。结论结肠癌患者EPC数量及活力均异常增高。

姜黄素对肺纤维化大鼠骨髓及外周血内皮祖细胞的影响

目的探讨姜黄素对肺纤维化大鼠骨髓及外周血中内皮祖细胞(EPCs)数量、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)表达的影响及其机制。方法采用经气管灌注博莱霉素(BLM)的方法制作肺纤维化模型。60只大鼠完全随机分为对照组、模型组、姜黄素组。每组于第14天、28天各处死10只大鼠。肺组织行HE染色观察并进行肺纤维化Ashcroft评级,采用流式细胞术检测骨髓及外周血中EPCs的数量,Western blot法检测骨髓中e NOS蛋白的表达。结果姜黄素组肺泡炎和肺纤维化程度明显低于模型组。与对照组比较,模型组各时间点骨髓及外周血EPCs数量及e NOS蛋白的表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,姜黄素组各时间点骨髓及外周血EPCs数量及e NOS蛋白的表达亦明显增多(P<0.05)。结论姜黄素可上调肺纤维化大鼠骨髓及外周血EPCs数量,促进EPCs动员入血,其作用可能与姜黄素激活e NOS通路相关。

不同miRNA介导的内皮祖细胞在相关疾病中作用及分子机制

目前心血管疾病(CVD)是发达国家与发展中国家最常见和最重要的死亡因素之一[1]。许多CVD如动脉粥样硬化[2]、慢性心力衰竭[3]和高血压[4]等的病理过程,均与内皮功能障碍密切相关,而内皮组织在糖尿病血管疾病的病发、肺损伤中的血管内皮修复也起着重要作用,因此对内皮组织及血管的研究就显得尤为重要。研究表明内皮祖细胞(EPCs)在血管修复及维持血管稳态起着重要作用[5]。

microRNA-222通过Akt信号通路调控人外周血内皮祖细胞迁移

目的 探讨microRNA-222（miR-222）通过调控Akt信号通路对内皮祖细胞（EPCs）迁移功能的影响及对靶向调控转录因子ETS-1（ETS proto-oncogene 1, transcription factor）的影响。方法 从正常成人外周静脉血分离、体外培养后鉴定EPCs。分别向人内皮祖细胞（hEPCs）转染人工合成的miR-222的模拟物（mimic）、抑制物（inhibitor）和相应的阴性对照（NC）。用荧光定量PCR法测miR-222及ETS-1 mRNA的表达。应用Western blot测量每组的ETS-1、p-Akt和Akt的蛋白表达。各组EPCs用Transwell检测其迁移。结果 miR-222可以靶向影响ETS-1的mRNA和蛋白表达。与对照组比较，上调miR-222表达可致ETS-1的mRNA和蛋白表达降低，同时抑制EPCs的迁移能力（均P＜0.05）。相反，下调miR-222表达可致ETS-1的mRNA和蛋白表达升高，同时增强EPCs的迁移能力（均P＜0.05）。Western blot检测显示，上调miR-222表达抑制p-Akt的蛋白水平；下调miR-222表达增强p-Akt的蛋白水平（均P＜0.05）。结论 miR-222可通过调控Akt信号通路和靶向转录因子ETS-1影响EPCs的迁移功能。

鹿茸动员大鼠骨髓内皮祖细胞促进缺血肢体血管新生的实验研究

目的通过观察鹿茸对大鼠下肢缺血模型外周血骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)数量及其增殖力、一氧化氮(NO)含量以及血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨鹿茸促进缺血肢体血管新生的作用机制。方法采用结扎法建立大鼠下肢缺血模型,将90只雄性SD大鼠随机分为模型组,鹿茸高、中、低剂量组和复方丹参片组,空白组为同批次正常大鼠仅作皮肤切开缝合,每组各15只。各组大鼠每天灌胃1次,空白组和模型组给予等剂量蒸馏水,于术后第2天开始给药,连续给药2周,给药1周后分离、培养EPCs,然后收集贴壁细胞利用流式细胞仪来鉴定CD34/CD133表型,采用ELISA法检测VEGF的表达,使用CCK-8法检测细胞数量变化及其增殖力,并用硝酸还原酶法检测NO含量。结果鹿茸能够显著促进EPCs增殖,提高EPC的数量,增加外周血NO的含量,且提升VEGF的表达水平。结论鹿茸通过动员骨髓源EPCs进入外周血,促进局部的血管新生达到修复损伤的目的。

黄芪多糖对2型糖尿病外周血内皮祖细胞归巢干预作用

目的:探讨黄芪多糖对2型糖尿病(T2DM)患者内皮祖细胞(EPCs)归巢能力的影响方法:培养、鉴定EPCs;建立裸鼠颈动脉损伤模型;PKH26标记的EPCs;分四组:健康人组、黄芪多糖干预组、糖尿病组(即未干预组)、PBS组,前三组经尾静脉移植相应的PKH26已标记的EPCs,PBS组尾静脉注射PBS液;于3和7d后取四组裸鼠损伤动脉,冰冻切片荧光显微镜下观察移植的细胞在内膜处的表达;纵行剖开后荧光显微镜下观察移植的EPCs定向归巢到血管损伤部位的情况并计数分析。结果:同一时间内,2型糖尿病患者EPCs归巢能力较健康人明显降低(P<0.01);2型糖尿病患者EPCs经黄芪多糖干预后,其归巢能力较未干预的糖尿病人增强(P<0.05)。结论:糖尿病患者EPCs在体内归巢的能力下降;糖尿病患者EPCs给予黄芪多糖干预后能增强其定向归巢到血管损伤部位的能力。

外周血内皮祖细胞移植对大鼠重型颅脑损伤后影响

目的:探讨外周血内皮祖细胞(EPCs)移植对大鼠重型颅脑损伤的影响。方法:体外复苏及培养大鼠外周血EPCs,采用液压冲击法对SD大鼠建立重型颅脑损伤模型。移植后3w取材行免疫组化法观测细胞存活情况。采用Western Blotting检测各组大鼠Nogo-A及OMGP蛋白的表达变化。结果:移植后3w检测结果显示:与假手术组比较,重型颅脑损伤组阳性细胞数明显增加,而EPCs移植组阳性细胞数与重型颅脑损伤组相比,明显减少。Western Blotting检测显示,与假手术组比较,重型颅脑损伤组大鼠大脑组织中的Nogo-A及OMGP出现过表达,EPCs移植组大鼠大脑组织中的Nogo-A及OMGP的表达较重型颅脑损伤组明显减少,(P<0.05)。结论:大鼠重型颅脑损伤后,大鼠大脑组织中的Nogo-A及OMGP出现表达增高,EPCs移植可能通过降低Nogo-A及OMGP的表达。

内皮祖细胞对骨髓间充质干细胞-种植体复合物成骨能力的影响

目的:研究内皮祖细胞(EPCs)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)膜片-种植体复合体成骨能力的影响。方法:分离培养大鼠BMSCs并采用细胞膜片技术培养细胞膜片;分离培养大鼠骨髓来源EPCs;将EPCs加载于BMSCs细胞膜片上并检测相关基因;制作细胞膜片-种植体复合体并植入裸鼠皮下,8周取材,行Micro-CT检查及组织学检测。结果:体外实验显示EPCs加载于BMSCs细胞膜片后成骨相关Runx-2、ALP、BMP2和成血管相关VEGF的基因表达提高;裸鼠体内实验取材Micro-CT检查显示加载EPCs组成骨量较高,HE切片显示加载EPCs组成骨面积较多,免疫组化检测显示加载EPCs组Runx2、BMP2表达较高。结论:加载EPCs能提高BMSCs-种植体复合物的成骨能力。