脓毒症和脓毒性休克大鼠一些脏器内皮素-1和内皮素A受体基因表达的变化

目的 :探讨实验动物脓毒症和脓毒性休克时内皮素 - 1(endothelin- 1,ET- 1)和内皮素 A受体 (ETAR)基因在肺、肾和小肠粘膜中的表达情况以及各脏器功能受损情况。方法 :2 4只雄性大鼠随机分为正常组、对照组、脓毒症组和脓毒性休克组 ;通过持续静脉泵注大肠杆菌内毒素 (L PS)复制大鼠脓毒症和脓毒性休克模型 ;运用反转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)以葡萄糖- 6 -磷酸脱氢酶 (G- 6 - PD)基因为内参照基因 ,分别检测脓毒症和脓毒性休克组肺、肾脏和小肠粘膜组织 ET- 1和 ETAR基因表达情况 ,同时检测其血清丙氨酸转氨酶 (AL T)、白蛋白 (A )、尿素氮 (BU N)、肌酐 (Cr)和动脉血气的变化。结果 :脓毒症和脓毒性休克组大鼠脏器组织 ET- 1和 ETAR基因表达产物较正常组和对照组均明显增加 (P <0 .0 1) ;脓毒性休克组大鼠血清AL T、BUN和 Cr较正常组、对照组和脓毒症组均显著上升 (P<0 .0 1) ,脓毒症组上述指标也较正常组明显上升 (P<0 .0 1) ;脓毒症组和脓毒性休克组早期动脉血气分析为低氧和呼吸性碱中毒 ,脓毒性休克组后期出现明显的低氧血症和 CO2 潴留。 结论 :ET- 1和 ETAR参与了脓毒症和脓毒性休克的病理生理过程 ,且很可能是参与脓毒症和脓毒性休克并发多脏器功能障碍综合征 (MODS)启动的因子之一。

内皮素A受体拮抗剂BQ123对肉仔鸡股动脉压和肺动脉压的影响

为探讨内源性内皮素-1（ET-1）是否参与肉鸡血压的维持等生理调节活动，采用急慢性给予内皮素ETA受体的特异性拮抗剂BQ123，研究内源性ET-1对正常肉鸡股动脉压和肺动脉压的影响。结果表明：1）放免法检测2～6周龄正常肉仔鸡血浆（从（40．82±1.90）升高到（93．70±11．19）pg／mL）和肺匀浆内皮素（从（503．84±27．40）升高到（701．04±16．18）pg／g）的含量随日龄的增加有升高的趋势；2）急性翼静脉注射BQ123（0．4和2．0μg/kg）能够极显著降低肉鸡的股动脉收缩压、舒张压和肺动脉收缩压、舒张压（P〈0．01），注射2．0μg/kgBQ123压力下降程度比注射0．4μg／kg大，肺动脉压达到最低点的时间比股动脉早；3）慢性给予BQ123能够使肉鸡肺动脉收缩压极显著下降（对照组（3．37±0．47）kPa，BQ123组（2．46±0．50）kPa，P〈0．01），股动脉收缩压显著下降（对照组（20．95±1．17）kPa，BQ123组（18．85±2．05）kPa，P〈0．05）。试验结果显示：急性和慢性注射ETA受体的特异性拮抗剂BQ123都能降低肉鸡股动脉压和肺动脉压，推测内源性ET-1参与了肉鸡血压的维持等生理调节活动。

内皮素A受体在oxLDL促血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的:研究氧化低密度脂蛋白(oxLDL)对培养血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中内皮素受体A亚型(ETRA)mRNA表达水平的影响。方法:Cu2+氧化法制备oxLDL,观察oxLDL对大鼠主动脉VSMC增殖和ETRAmRNA表达的影响。将VSMC用非肽类ETRA拮抗剂BMS-182874预处理后,加入10μg/mloxLDL温育24h。采用非核素MTS吸光度法测定细胞增殖,RNA印迹法检测ETRAmRNA水平。结果:低浓度oxLDL促进VSMC增殖,高浓度引起细胞毒作用;oxLDL升高ETRAmRNA水平;ETRA拮抗剂BMS-182874明显抑制oxLDL引起的增殖作用。结论:动脉粥样硬化形成中有ETRA参与,ETRA拮抗剂可能具有临床应用价值。

动脉粥样硬化兔主动脉内皮素A受体原位杂交研究

对动脉粥样硬化(AS)的发生机制研究是一个重要的前沿课题,尤其在内皮细胞损伤和内皮功能紊乱、脂质的异常代谢以及生长因子、细胞因子和血管活性因子的作用等方面目前又成为倍受关注的热点[1～3]。本实验通过建立兔AS模型,观察主动脉的内皮素受体A亚型(ETRA)表达改变,并初...

不同剂量内皮素A受体阻滞剂对急性肺损伤氧合及换气功能的影响

目的观察内皮素A(ET-A)受体阻滞剂(LU-135252)对急性肺损伤(ALI)肺换气功能及炎性变化的影响。方法建立24只ALI模型犬,随机均分为3mg/kgLU-135252吸入1组(L1组)、0.5mg/kgLU-135252吸入2组(L2组)和对照组(C组)。于肺灌洗前(T0)、灌洗后即刻(T1)、灌洗后1h合并雾化治疗30min(T2)、灌洗后2h(T3)、3h(T4)、4h(T5)分别监测三组循环功能、血气和血浆内皮素-1(ET-1)水平;取肺组织观察肺炎性变化。结果三组T2～T5时心输出量(CO)比T0时明显降低(P<0.05);L2组平均肺动脉压(MPAP)T3～T5时明显低于L1组和C组(P<0.01);与L1组和C组比较,L2组动脉氧分压(PaO2)、动脉氧饱和度(SaO2)、混合静脉血氧饱和度(SvO2)于T2～T5时显著升高(P<0.01),于T4、T5时动脉二氧化碳分压(PaCO2)和肺内分流值(Qs/Qt)明显降低(P<0.01);与T0时比较,三组ET-1水平在ALI后均升高(P<0.05或P<0.01),但L2组ET-1水平在T2～T5时低于L1组和C组(P<0.05)。三组均有肺损伤改变,L2组肺间质炎和肺间质出血度低于L1组和C组(P<0.05)。结论吸入0.5mg/kgLU-135252可减轻炎性改变,改善ALI的氧合和换气功能。

大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中内皮素A受体mRNA的表达

目的:观察Wistar大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中内皮素A受体(ETA)mRNA在肝脏中的表达,探讨内皮素(ET)及其受体对肝硬化门静脉高压大鼠肝脏的调节机制。方法:CCL4法制备模型。实验共分4组:正常对照组(13只)、肝细胞变性坏死期组(20只)、肝细胞结节状增生期组(20只)、假小叶形成期组(18只)。应用mRNA原位杂交技术确定ETA的部位,从而发现ET在肝脏的作用位点,并对ETAmRNA进行定量分析。结果:Wistar大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中,肝脏发生特征性病理改变:肝细胞变性坏死、结节状增生、假小叶形成;门静脉压力呈梯度性升高;外周及门静脉血浆ET水平随门静脉压力升高而降低;肝脏ETAmRNA表达增多,表达主要位于汇管区门静脉小静脉、肝小动脉血管壁,小静脉表达明显高于小动脉,表达水平随ET浓度的降低、门静脉压力的升高而增加。结论:大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中外周及门静脉血浆ET水平进行性降低;肝脏微循环ETAmRNA表达量增加,呈现上调趋势;表达部位随肝硬化进展发生特征性变化。

缺血性肾损害时肾小球系膜细胞内皮素A受体mRNA表达的检测

目的 采用夹闭双肾动脉方法建立缺血性肾损害动物模型 ,探讨缺血性肾损害时肾小球系膜细胞内皮素A受体mRNA表达的情况。方法 应用地高辛标记的ETARcDNA探针进行的原位杂交检测肾脏系膜细胞的内皮素A受体mRNA的表达 ,结果 显示缺血性肾损害组动物的肾脏系膜细胞内此素A受体mRNA表达明显高于假手术对照组 ,P <0 0 5。提示

内皮素A受体拮抗剂WS009A对大鼠低氧性肺动脉高压形成的影响

目的 研究非肽内皮素 A受体拮抗剂—— WS0 0 9A对大鼠慢性低氧性肺动脉高压形成的影响。方法 对大鼠在慢性缺氧过程中经左颈外静脉每日灌注 WS0 0 9A(10 mg/kg)。结果 对照组、单纯缺氧组和缺氧加 WS0 0 9A组平均肺动脉压分别为 2 .7± 0 .33、3.97± 0 .47和 2 .39± 0 .2 7k Pa,肺血管管壁面积占血管面积的百分比分别为 0 .2 6± 0 .0 3,0 .5 2± 0 .0 4,0 .32± 0 .0 7,管壁厚度占管径的百分比分别为 0 .14± 0 .0 2、0 .31± 0 .0 3和0 .18± 0 .0 5 ,右心室与左心室加室间隔重量的比率分别为 0 .2 4± 0 .0 2 ,0 .35± 0 .0 3,0 .2 6± 0 .0 3。方差分析表明 ,缺氧加 WS0 0 9A组的 m PAP和 RV/(L V+ S)比单纯缺氧组显著降低 (P<0 .0 1) ,与正常对照组相比无显著差异(P>0 .0 5 )。肺血管管壁面积占血管面积的百分比和管壁厚度占管径的百分比在缺氧加 WS0 0 9A组较正常对照组为高 (P<0 .0 5 ) ,但比单纯缺氧组显著降低 (P<0 .0 1)。结论 慢性低氧可使大鼠肺血管壁增厚 ,从而引起肺动脉高压 ,进而右心室肥厚。但缺氧同时加用 ETA受体拮抗剂可明显对抗低氧引起的肺血管重建 ,肺动脉压无显著升高。

家兔颅脑创伤后内皮素及其A受体在脑血流量变化中的作用

目的 了解家兔颅脑创伤后内皮素及其Ａ受体在脑血流量变化中的作用及意义。方法 家兔致以左额顶叶为着力部位的加速性撞击伤，动态观察脑组织内皮素含量变化、内皮素Ａ受体ｍＲＮＡ表达和定位变化，内皮素Ａ受体拮抗剂ＢＱ１２３的作用，及上述变化对脑血流量变化的影响。结果 脑创伤后局部脑组织内皮素含量显著升高；内皮素Ａ受体ｍＲＮＡ主要分布于脑血管内皮细胞，表达显著增强；创伤后局部脑血流量显著降低，应用ＢＱ１２３治疗的动物，脑血流量下降被明显抑制。结论 内皮素通过其Ａ受体的调节在颅脑创伤后脑缺血的形成中具有重要作用；应用内皮素Ａ受体拮抗剂可防治颅脑创伤后脑缺血。

内皮素A受体拮抗剂在人喉癌种植瘤的实验研究

目的:探讨选择性内皮素A受体拮抗剂BQ-123对人喉癌Hep-2细胞裸鼠种植瘤的生长及血管形成的影响。方法:将实验动物裸鼠随机分为3组:BQ-123[n=8,2mg/(kg.day)]、氟尿嘧啶组[n=8,2mg/(kg.day)]、生理盐水组(n=8),比较各组裸鼠成瘤体积、微血管密度(MVD)。结果:BQ-123组肿瘤体积为(1.62±0.53)cm3,明显小于生理盐水组及氟尿嘧啶组,差异具有统计学意义;BQ-123组的肿瘤组织中MVD高倍镜下为23.2,明显低于生理盐水组(58.6)及氟尿嘧啶组(39.5),差异具有统计学意义。结论:BQ-123对人喉癌Hep-2细胞在裸鼠体内有明显抑瘤作用,肿瘤的体积、肿瘤组织MVD显著低于对照组,表明BQ-123可通过抑制肿瘤血管生成而显著抑制肿瘤生长。

内皮素A受体拮抗剂BQ610对猫急性心肌缺血保护作用的超微结构观察

目的 观察内皮素Ａ受体拮抗剂ＢＱ６１０ 对急性缺血心肌超微结构的影响，以探讨内源性内皮素是否参与急性心肌缺血的病理过程。方法 结扎１２ 只猫左冠状动脉前降支（ＬＡＤ） 造成急性心肌缺血，立即向已结扎的ＬＡＤ 内直接注射ＢＱ６１０ 或注射生理盐水作对照，观察ＬＡＤ 结扎后３０ 分钟缺血区及非缺血区心肌超微结构。结果 急性缺血区心肌出现肌细胞肿胀、肌原纤维排列紊乱及灶性溶解、线粒体肿胀及内皮细胞肿胀等超微结构损伤，ＢＱ６１０ 可减轻缺血心肌超微结构损伤，与生理盐水对照组差异明显。非缺血区心肌超微结构基本正常。

内皮素及其A受体在兔颅脑创伤后脑血流量变化中的作用及意义

目的：了解内皮素（ＥＴ）及其Ａ受体在颅脑创伤后脑血流量变化中的作用及意义。方法：１３０只家兔致以左额顶叶为着力部位的加速性撞击伤，动态观察脑组织内皮素含量变化、内皮素Ａ受体ｍＲＮＡ表达和定位变化，内皮素Ａ受体拮抗剂ＢＱ１２３的作用及上述变化对脑血流量变化的影响。结果：脑创伤后血浆、脑脊液和局部脑组织内皮素含量显著升高；内皮素Ａ受体ｍＲＮＡ主要分布于脑血管内皮细胞，表达显著增强；创伤后局部脑血流量显著降低，应用ＢＱ１２３治疗的动物，血流量下降被明显抑制。结论：内皮素通过其Ａ受体的调节在颅脑创伤后脑缺血的形成中有重要作用；应用内皮素Ａ受体拮抗剂可以防治颅脑创伤后脑缺血。

内皮素A受体在颅脑创伤后脑微血管内皮细胞上的表达及意义

目的了解内皮素Ａ受体在颅脑创伤后脑微血管内皮细胞中的作用。方法对家兔致左额顶为着力部位的撞击伤，动态研究脑组织内皮素含量及内皮素Ａ受体ｍＲＮＡ表达和定位变化，内皮素Ａ受体拮抗剂ＢＱ１２３治疗效应，观察对脑创伤后局部脑血流量和脑含水量的影响。结果脑创伤后局部脑组织内皮素含量显著升高，内皮素Ａ受体ｍＲＮＡ表达显著增强，主要分布于脑血管内皮细胞；创伤后局部脑血流量下降、脑含水量显著升高，应用ＢＱ１２３治疗的动物，脑血流量下降和脑含水量升高被明显抑制。结论内皮素在颅脑创伤后脑水肿的形成中起重要作用，其作用是通过内皮素Ａ受体调节。

内皮素A受体拮抗剂阿曲生坦降低2型糖尿病肾病患者的残余白蛋白尿

目前已有包括肾素-血管紧张素系统（renin—angiotensin system，RAS）抑制剂在内的治疗糖尿病肾病的最佳方案。RAS抑制剂除能降低血压外，还具有保护肾脏和心血管功能，这部分地归因于其降低白蛋白尿效应。然而，残余白蛋白尿仍然与糖尿病肾病患者的残余高风险相关联，包括2型糖尿病肾病患者的高心肾事件发病率和死亡率。因此需要新的药物来降低残余风险因素而不致增加副反应。

新化合物Ⅲ21对大鼠心肌内皮素受体(ET_A R,ET_B R)亚型的亲和力和选择性

目的:研究新化合物Ⅲ21与大鼠心肌内皮素受体(Endothelin receptor,ETR)的亲和力及结合特点。方法:采用放射配体受体结合分析方法,通过^(125)Ⅰ-ET_1与大鼠左心室膜受体结合,观察新化合物Ⅲ21对ETR的亲和力及对ET_AR,ET_BR两种亚型的选择性,分别求IC_(50)值。结果:Ⅲ21对^(125)Ⅰ-ET_1与ETR的结合有较强的抑制作用,在10^(-7)mol·L^(-1)浓度时,使其结合率降为原来的(43．1±13．7)%。Ⅲ21抑制^(125)Ⅰ-ET_1与ET_AR和ET_BR结合的IC_(50)值分别为10．21nmol·L^(-1)和1．65μmol·L^(-1),两者比值(ET_AR的选择性)为161．76。结论:新化合物Ⅲ21与ETR有较强的亲和力,并且对ET_AR具有较高的选择性,可能是一种选择性ET_A受体拮抗剂。

大鼠肝硬化形成过程中胃黏膜微循环内皮素A受体mRNA的表达及其意义

目的观察大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中内皮素A受体mRNA在胃黏膜微循环血管上的表达 ,探讨内皮素及其受体对肝硬化门静脉高压大鼠胃黏膜微循环的调节机制。方法应用mRNA原位杂交确定内皮素A受体的部位 ,并进行半定量分析。结果大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中门静脉及外周血浆内皮素水平随门静脉压力升高而降低。胃黏膜内皮素A受体mR NA主要在黏膜基底部的微循环前微动脉和后微静脉血管壁表达 ,其中动脉表达明显强于静脉。其表达与门静脉压力呈正相关 (r =0 86 9,P <0 0 5 ) ,与门静脉及外周血内皮素水平呈负相关 (r =-0 797、- 0 74 1,P <0 0 5 )。结论大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中外周及门静脉血浆内皮素水平进行性降低 ;胃黏膜微循环内皮素A受体mRNA表达量增加 ,呈现上调趋势 ;内皮素及其受体mR NA表达变化可能与胃黏膜微循环功能障碍有关。

内皮素-1对肺组织成纤维细胞上内皮素受体基因表达的影响

目的 探讨肺组织成纤维细胞中内皮素 - 1对内皮素受体A -mRNA的表达的影响。方法 用内皮素 - 1刺激培养的肺组织成纤维细胞 ,利用反转录PCR的方法测定其受体A -mRNA的表达。结果 发现ET - 1刺激后出现受体表达下调现象。

内皮素A受体拮抗剂预处理对犬体外循环后肾功能的影响

目的观察内皮素A受体拮抗剂预处理对犬体外循环(CPB)后肾功能影响。方法选择18只雄性比格犬,采用随机数字表法分为3组(n=6):假手术组(Sham组)、CPB组、内皮素A受体拮抗剂组(ETA组)。ETA组中,CPB前1h持续泵入内皮素A受体拮抗剂西他生坦0.7mg/kg,30min输注完毕。采集各组体温、平均动脉压及动脉血气,检测血肌酐、尿素氮浓度,评估肾小管坏死评分,并测定磷酸化蛋白激酶(pAkt),磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS)蛋白表达浓度。结果 CPB后2h,CPB组和ETA组血肌酐和尿素氮明显高于术前(P<0.05),ETA组明显低于CPB组(P<0.05);ETA组肾小管坏死评分明显低于CPB组(P<0.05);ETA组p-Akt,p-eNOS表达明显高于CPB组(P<0.05)。结论 CPB可能导致急性肾损伤,内皮素A受体拮抗剂预处理可减轻CPB后急性肾损伤。

健胃愈疡颗粒对复发胃溃疡大鼠胃黏膜组织中内皮素-1A受体mRNA表达的影响

目的观察健胃愈疡颗粒对胃溃疡大鼠胃黏膜组织中内皮素—1A受体(endothelin—1Areceptor,ETAR)mRNA表达的影响及其抗溃疡复发作用的机制。方法拟Okabe改良法制作SD大鼠胃溃疡模型,腹腔注射白介素—1 β(IL—1 β)制作胃溃疡复发模型。采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术,检测大鼠胃黏膜组织中ETARmRNA的表达。结果①在灌胃第1 0天后,健胃愈疡组(JG)ETARmRNA的相对表达量显著低于模型组(MG) (P <0 .0 5 ) ,与正常组(NG)、假手术组(POG)、雷尼替丁组(RG)、中西药结合组(CTWG)无明显差异;②在灌胃第92天后,JGETARmRNA相对表达量显著低于RG、模型复发组(MRG) ,具有显著性差异(P<0 .0 1～0 .0 5 ) ;JG在灌胃第1 0天、第92天后诱发胃溃疡复发,胃黏膜组织中ETARmRNA的表达无明显增加。结论健胃愈疡颗粒可显著抑制胃溃疡和胃溃疡复发大鼠胃黏膜组织中ETARmRNA的表达,是其修复溃疡和抗溃疡复发机制之一。