丹参多酚酸盐对电离辐射损伤血管内皮细胞影响的初步研究

目的:观察不同浓度的丹参多酚酸盐对电离辐射后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)系ECV-304增殖抑制的影响,初步了解丹参多酚酸盐对血管内皮细胞的抗辐射保护作用。方法:ECV-304未干预组和不同浓度的丹参多酚酸盐干预组用4Gy的6MV-X射线进行照射,照前和照后24h分别用MTT法,观察药物对细胞增殖抑制的影响。结果:与照前对比,照后24h未干预组细胞增殖抑制率达到84%,而干预组随着药物浓度的增加,细胞的受抑制率逐渐降低。结论:丹参多酚酸盐对电离辐射损伤血管内皮细胞具有明显的保护作用,且具有药物浓度依赖性。

角膜内皮检查在高度近视并发白内障术前检查中的应用

目的探讨角膜内皮检查在高度近视合并白内障病人手术中的应用价值。方法采用前瞻性病例对照研究。采用随机数字表法选取2019年1-11月在安徽医科大学附属巢湖医院接受超声乳化白内障摘除联合人工晶状体植入术的病人63例(77例次),眼轴>26.0 mm为高度近视组,23.0-25.0 mm作为对照组,其中高度近视组31例(39例次),对照组例32例(38例次)。应用角膜内皮镜分别于术前及术后1周、1月及3月对病人中央角膜厚度(CCT)和内皮细胞密度(CD)以及六角形细胞百分比(6A%)进行观察,汇总后对数据进行统计学分析。结果高度近视组与对照组间术前中央角膜厚度、内皮细胞密度以及六角形细胞百分比间差异无统计学意义(P>0.05);与术前相比较,高度近视组与对照组的内皮细胞密度及六角形细胞百分比均呈下降趋势;术后1周时,高度近视组与对照组的内皮细胞密度分别为(1 965.32±306.39)个/mm^2和(2 135.60±285.31)个/mm^2,与术前相较均差异有统计学意义(P<0.05);术后1周和1月高度近视组中央角膜厚度分别为(642.54±31.10)百和(572.53±25.84)百μm,均高于对照组(P<0.05),3个月时基本恢复至术前水平。结论高度近视合并白内障病人白内障超声乳化术后角膜的损伤更严重,且恢复所需的时间更长;术前角膜内皮检查应作为常规检查项目,以制定个性化治疗方案。

Tumstatin肽对视网膜微血管内皮细胞增生的影响

在视网膜新生血管性疾病血管新生过程中，内皮细胞的增生和迁移直接影响眼内血管的消长，抑制内皮细胞增生和迁移是抑制视网膜新生血管形成的关键。Tumstatin是人类Ⅳ型胶原的a3链的非胶原结构域1（NC1）功能区，是最新发现的来源于人基底膜胶原的肿瘤血管形成抑制因子，具有有效的抗新生血管活性，而T8肽是指Tumstatin接近N端的69～95位氨基酸大约25个氨基酸的一个活性片段。

腺病毒介导Tum5重组基因对高糖刺激下恒河猴视网膜血管内皮细胞增生、迁移及管腔形成的影响

目的观察腺病毒介导Turn5重组基因对高糖刺激下恒河猴视网膜血管内皮细胞（RF／6A细胞）增生、迁移及管腔形成的影响。方法构建空载体病毒rAd-绿色荧光蛋白（GFP）和携带Tum5基因的重组腺病毒表达载体（rAd—Tum5）。分别感染RF／6A细胞，流式细胞仪检测感染效率。细胞感染48h后，采用蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测Tum5重组基因体外表达。将RF／6A细胞分为正常对照组、高糖刺激对照组（HG组），空载体对照组（HG＋rAd—GFP组），Tum5基因组（HG＋rAd—Tum5组）。采用细胞计数试剂盒（CCK-8）、侵袭小室（Transwell）实验及基质胶（Matrigel）实验分析Tum5重组基因对高糖刺激下RF／6A细胞增生、迁移及管腔形成的影响。结果流式细胞仪检测结果显示，tAd—GFP、rA＆Tum5感染细胞的效率分别为55．13％、50．31％。Westernblot检测结果显示，HG＋rA＆Tum5组在相对分子质量14×10^3左右处可见Tum5蛋白表达条带；正常对照组、HG组、HG＋rAd—GFP组均未见Tum5蛋白表达条带。CCK-8、Transwell实验及Matrigel实验结果显示，正常组、HG组、HG＋rAd-GFP组、HG＋rAd-Tum5组4组间细胞增生数量、迁移数量及成形管腔数量比较，差异均有统计学意义（F-44．484、772．666、137．696，P（0．05）。组间细胞增生数量、迁移数量及成形管腔数量两两比较结果显示，HG组较正常对照组增加，差异有统计学意义（P〈0．05）；HG组与HG＋rAd—Tum5组之间无明显差异（P〉0．05）；HG＋rAd—Tum5组较HG组、HG＋rAd—GFP组明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论腺病毒介导Tum5重组基因可抑制高糖刺激下RF／6A细胞的增生、迁移及管腔形成。

氯化高铁血红素对体外培养人脐静脉血内皮祖细胞数量和凋亡的影响

目的 体外观察不同浓度氯化高铁血红素（hemin）对人脐血来源的晚期内皮祖细胞（late EPCs）数量和凋亡的影响.方法 用密度梯度离心法分离提取人脐静脉血来源的单核细胞,在体外诱导分化为late EPCs.生长状态良好的第2～3代late EPCs随机接受不同浓度hemin（0、5、10、15、20 μmol/L）干预24 h后继续培养,台盼蓝染色法检测细胞活性,活细胞计数试剂盒检测细胞增殖情况,粘附试验测定观察细胞粘附能力,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 与对照组相比,较低浓度hemin（5μmol/L或10 μmol/L）可显著促进late EPCs的活性;当hemin浓度为5、10或15 μmol/L时,late EPCs增殖及粘附作用明显,而凋亡受到抑制.其中hemin浓度为10 μmol/L时这种作用最强,而高浓度hemin（20μmol/L）则表现为相反的作用效果.此外,hemin促增殖、粘附及抑制凋亡的作用具有时间依赖性,在24 h作用最强.结论 hemin在低浓度时显著增加了late EPCs的数量、促进粘附、抑制凋亡,在高浓度时则起相反作用.

葡萄糖对人外周血内皮祖细胞凋亡的影响

目的 研究不同浓度的葡萄糖对体外培养条件下的健康人外周血内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）凋亡的影响.方法 经密度梯度离心法分离出健康成年人外周血中的单个核细胞（mononuclear cells,MNCs）,在体外诱导分化后,用FITC标记的荆豆凝集素Ⅰ（Dil-acLDL）和Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白（FITC-UEA-1）双染色鉴定为内皮祖细胞.观察不同浓度的葡萄糖对所获取的内皮祖细胞凋亡的影响.结果 11.1 mmol/L葡萄糖干预组较5.6 mmol/L葡萄糖干预组的凋亡率差异无统计学意义（P＞0.05）;25.5 mmol/L葡萄糖干预组的凋亡率较5.6 mmol/L葡萄糖干预组的差异有统计学意义（P＜0.05）,且随干预时间的延长凋亡率增加（P＜0.05）.结论 高浓度葡萄糖能增加体外培养条件下人外周血内皮祖细胞的凋亡,且这种作用呈时间依赖性.