两组内皮细胞培养液对离体大鼠心功能及部分生化指标的影响

采用两组猪肺动脉内皮细胞培养液（甲组：内皮细胞缺氧再给氧前tritonX－100处理；乙组：内皮细胞缺氧再给氧的模拟缺血再灌注）灌注离体大鼠Langendorff心脏，分别观测冠脉灌注压（CPP）、心率（HR）、心律、左室内收缩压（LVSP）［并计算其微分（±dp／dtmax）］以及冠脉流出液中乳酸脱氨酶（LDH）、磷酸肌酸激酶（CPK）和心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和ATPase的变化。结果显示：经缺氧再给氧处理的内皮细胞培养液可使大鼠心功能发生异常并加重心肌损伤，进一步证实冠脉内皮细胞在心脏病理生理中起重要作用。

晚期内皮祖细胞条件培养液对阿霉素诱导的心肌细胞凋亡的影响

目的观察晚期内皮祖细胞条件培养液对阿霉素诱导心肌细胞凋亡的影响。方法分离培养并鉴定内皮祖细胞和心肌细胞,制作晚期内皮祖细胞条件培养液以及阿霉素诱导的心肌细胞凋亡模型,实验分3组:对照组、模型组及实验组。Hoechest33342/PI及Annexin-FIFC/PI双染法检测各组心肌细胞凋亡率。MTT法检测心肌细胞存活率。qRT-PCR以及Western Blot法检测心肌细胞中脑钠肽(BNP)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA及蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组的心肌细胞凋亡率升高,与模型组相比,实验组的心肌细胞凋亡率下降,差异均有统计学意义(P <0.05)。与对照组相比,模型组的BNP的mRNA及蛋白的表达均下调,TGF-β1的mRNA及蛋白的表达上调,与模型组相比,实验组的BNP的mRNA及蛋白的表达均上调,TGF-β1的mRNA及蛋白的表达均下调,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论晚期内皮祖细胞条件培养液抑制了阿霉素诱导的心肌细胞凋亡,其可能是通过抑制TGF-β1及上调BNP的表达所实现的。

脐血来源的两种内皮祖细胞的分离、培养和鉴定

为了建立从人脐血分离培养两种内皮祖细胞的方法和培养体系,从脐血分离单个核细胞,在含有内皮细胞条件培养液的体系中培养得到两种细胞,利用摄取乙酰化低密度脂蛋白(acetylated low-density lipoprotein,DiI-Ac-LDL)和结合欧洲荆豆凝集素(Ulex European Agglutinin1,UEA-1)进行鉴定,并进一步用免疫细胞化学、RT-PCR、流式细胞术对它们进行内皮细胞相关的表型检测。结果表明,这两种细胞均能摄取DiI-Ac-LDL和结合UEA-1,表达内皮细胞的标志如CD31、CD144和血管假性血友病因子(von Willebrand Factor,vWF),有CD31、酪氨酸激酶受体(kinase tyrosine insert domain receptor,KDR)、CD144和内皮一氧化氮合成酶(endothelial NO synthase,ENOS)的基因转录。但是,它们的增殖能力明显不同,分别称为循环成血管细胞和高增殖潜能内皮祖细胞。流式细胞计数结果显示,这两种细胞在一些表面标志表达方面也存在明显的差异。结论:利用含内皮细胞条件培养液的培养体系,成功地从脐血分离的单个核细胞中培养得到了两种内皮祖细胞。

小鼠骨髓高增殖潜能内皮祖细胞的培养与纯化(简报)

1997年Asahara等在人外周血中发现内皮祖细胞（endothelial progenitorcell．EPC），随后有文献报道，从骨髓中分离出EPC．异体骨髓移植研究显示成体外周血EPC来源于骨髓。许多作者报告EPC参与生理性和病理性血管新生．具有潜在的临床应用前景。目前关于EPC的不少基本生物学问题尚不完全清楚，其生理和病理意义也有争议。

脑微血管内皮细胞条件培养液对星形胶质细胞的影响及通络中药的干预特征

目的:揭示脑微血管内皮细胞生理、病理及通络中药处理后不同状态的培养液对正常星形胶质细胞影响的特征,从细胞间相互作用角度探讨脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞的生物学关系,为阐释脑微环境稳定的血脑屏障维护机制以及通络中药通过内皮细胞调节脑内微环境理论假说提供新的证据。方法:制备正常、拟缺血和拟缺血合并通络救脑注射液处理的大鼠脑微血管内皮细胞条件培养液,观察其对星形胶质细胞活性和凋亡率的影响。结果:与正常星形胶质细胞相比,正常内皮细胞条件培养液能够降低正常星形胶质细胞的活性,并促进星形胶质细胞的凋亡;而拟缺血处理的内皮细胞条件培养液能够提高正常星形胶质细胞的活性和凋亡率;拟缺血合并通络药物处理的内皮细胞条件培养液对正常星形胶质细胞的活性有提高作用,并显著降低其凋亡率。结论:三种不同处理方式的内皮细胞条件培养液对正常星形胶质细胞活性和凋亡产生不同的影响,提示不同状态的微血管内皮细胞对脑内微环境产生影响,通络救脑注射液可能通过调节微血管内皮细胞的分泌而对星形胶质细胞发挥作用。