角膜内皮细胞移植

角膜内皮细胞移植是治疗角膜内皮疾病很有潜力的一种方法,目前仍停留于动物实验阶段,主要难点是供体角膜内皮细胞的培养和维持、细胞载体和手术技巧等问题,本文围绕这些问题进行综述。

回顾性分析26例飞秒激光辅助角膜内皮细胞移植术围术期专科护理

回顾性分析我院眼科施行的26例飞秒激光辅助角膜内皮细胞移植术的围术期护理,专科护理:术前护理包括心理护理、防止受伤、术前准备,术后护理包括体位配合、药物护理、舒适护理、预防并发症、随访。

角膜内皮细胞移植

角膜内皮细胞在体外培养的条件下可以在同种异体或异种角膜后弹力层上成功生长,培养的上皮细胞的生长情况及特性与供体年龄、内皮细胞来源部位、载体材料、培养条件、以及是否应用生长因子有密切关系。人角膜内皮细胞培养的成功,以及在非人类的灵长目动物眼上的成功移植,为内皮移植技术的治疗作用提供了实验基础。培养传代的角膜内皮细胞移植到活体上后具有正常内皮细胞的功能,可以作为穿透性角膜移植的替代方法之一加以选择。

角膜内皮细胞移植术的新进展

随着组织工程和细胞工程技术的发展 ,体外培养角膜内皮细胞取得成功 ,由此而探索出一种新手术———角膜内皮细胞移植术。这种手术是将体外培养的角膜内皮细胞或直接获取供眼健康的角膜内皮细胞 ,移植到受体眼已去除自身内皮细胞的角膜上 ,保证了受体角膜有足够健康的内皮细胞并减少了排斥反应。最新研究结果为通过一 5mm宽的巩膜隧道切口 ,以后弹力膜作载体 ,把健康活性角膜内皮细胞移植到受体眼。该方法手术切口小 ,无缝线 ,移植后的内皮细胞完整无损 ,贴附良好 ,术后并发症少 ,已有临床成功病例的报道。角膜内皮细胞移植术将为角膜病患者带来新的治疗方法。

磁标记内皮祖细胞移植对糖尿病大鼠肾功能改善的作用:MRI成像验证

背景:近几年的诸多研究发现,内皮祖细胞在损伤性疾病等方面有重要作用。目的:探讨磁标记内皮祖细胞移植对糖尿病大鼠肾功能的改善作用及MRI成像。方法:将60只Wistar大鼠随机分为3组,正常对照组不作任何处理;模型组、实验组腹腔注射40 mg/kg链脲佐菌素,建立1型糖尿病模型,造模后4周,实验组尾静脉注射磁标记内皮祖细胞悬液0.15 m L(细胞浓度1×109 L-1)。细胞移植8周后,检测3组大鼠空腹血糖、血清胰岛素、血肌酐和尿素氮及24 h尿蛋白水平;采用MRI对移植细胞进行活体示踪,并与肾脏组织切片进行对照;测量大鼠体质量及肾质量变化,计算肾质量指数。结果与结论:(1)与正常对照组比较,模型组空腹血糖、血肌酐和尿素氮、24 h尿蛋白及肾质量指数升高(P<0.05),胰岛素水平降低(P<0.05);(2)与模型组比较,实验组空腹血糖、血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白及肾质量指数降低(P<0.05),胰岛素水平升高(P<0.05);(3)实验组可见稍长T1短T2信号,病灶边缘部位明显,梯度回波FLASH序列较T2加权RARE序列明显,其余组均未见明显低信号改变;实验组可见磁标记的阳性细胞且与组织切片结果相吻合,模型组和正常对照组未见磁标记的阳性细胞;(4)结果表明,磁标记内皮祖细胞移植可在一定程度上改善糖尿病大鼠的肾功能紊乱。

内皮祖细胞移植治疗糖尿病足的协同作用因素

背景:糖尿病足治疗已经走到瓶颈,自体骨髓/外周血内皮祖细胞移植是近年来治疗糖尿病足的新方式。目的:针对血管内皮细胞生长因子受体2和整联蛋白在内皮祖细胞移植治疗糖尿病足过程中发挥作用的研究进展进行综述。方法:第一作者应用计算机检索1998年1月至2012年12月PubMed数据库、中国期刊全文数据库有关内皮祖细胞治疗糖尿病足、整合素与血管内皮细胞生长因子受体2的相互作用以及整合素与血管内皮细胞生长因子受体2在内皮祖细胞增殖与血管新生作用方面的文章,英文检索词"diabetic foot,endothelial progenitor cells,VEGFR-2,integrin,synergistic effect";中文检索词"糖尿病足,内皮祖细胞,血管内皮细胞生长因子受体2,整合素,协同作用"。共检索到98篇相关文献,排除重复研究,60篇文献符合纳入标准。结果与结论:在糖尿病足治疗中,自体骨髓/外周血内皮祖细胞越来越受到重视,并逐渐成为最令人瞩目、最鼓舞人心的焦点,内皮祖细胞移植已经逐渐发展成为糖尿病足治疗的新模式。血管内皮细胞生长因子受体2和整合素在糖尿病足治疗的血管生成中可能发挥了协同作用,但仍有许多机制还不清楚,要彻底明确整合素和血管内皮细胞生长因子的作用机制尚需进一步研究。

血管内皮细胞生长因子在异体皮质骨移植修复骨缺损中的作用

目的探讨血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialcellgrowthfactor,VEGF)在异体皮质骨移植修复骨缺损中的作用。方法新西兰大白兔45只,雌雄不限,体重2.5～3.0kg。制成双侧桡骨中段1.5cm骨缺损模型,随机均分为3组:对照组单用异体皮质骨移植;实验组用异体皮质骨移植+重组人VEGF局部注射;拮抗组用异体皮质骨移植+VEGF多克隆抗体腹腔注射。于术后1、3、5、8和16周行X线片、病理切片、血管密度免疫组织化学染色和四环素荧光成骨检测,评估骨缺损的修复情况。结果血管密度免疫组织化学染色显示实验组有大量血管生成,且随着时间延长血管数量逐渐增加,于第8周达高峰;四环素荧光标记显示结果与血管密度免疫组织化学染色相吻合。周围软组织血管密度计数及骨形成速率,除第8、16周实验组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各时间点实验组均优于对照组和拮抗组,且差异有统计学意义(P<0.05);对照组各指标优于拮抗组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论VEGF能加速移植的异体骨血管化和爬行替代,促进骨缺损修复。

内皮祖细胞移植对肺损伤炎症状态的影响研究

将30例同遗传背景SD大鼠随机分为正常对照组、肺损伤组以及细胞移植组,每组10只;对肺损伤组和细胞移植组中的大鼠采用尾静脉注射脂多糖的方式建立急性肺损伤模型,正常对照组则给予等量的磷酸盐缓冲溶液,对各组大鼠的肺损伤炎症状态进行对比分析。结果与肺损伤组对比,细胞移植组中肿瘤坏死因子α明显较低,但两组对比无统计学意义(P>0.05);与对照组(15.22±3.34)ng/L相比较而言,肺损伤组和细胞移植组中的肿瘤坏死因子α明显较高,差异有统计学意义(P<0.05);且细胞移植组当中的抗炎递质白细胞介素10为(62.83±5.31)ng/L,也要明显高于肺损伤组,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞移植对白细胞介素10的表达具有促进作用,下调肿瘤坏死因子α的表达,有利于改善损伤肺组织的炎症状态,在临床实践中值得实现进一步的推广。

内皮祖细胞移植治疗急性肝功能衰竭及肝硬化的研究进展

我国是肝病大国,每年死于肝功能衰竭等终末期肝病者约100万人。肝炎病毒、药物、肝毒性物质（如乙醇,各种化学制剂等）、遗传代谢性疾病均可以引起肝功能衰竭[1]。而肝硬化患者的并发症严重影响其生存质量,尤其门静脉高压症是引起肝硬化患者死亡或需要进行肝移植的一个重要原因。通过传统的内科综合支持疗法治疗,死亡率高。血浆置换等人工肝支持治疗虽能暂时改善患者肝功能,但能否提高患者存活率尚存争议,且需消耗大量的血液资源。

内皮祖细胞移植对急性肺损伤大鼠的抗炎效应

目的:研究内皮祖细胞(EPC)移植对急性肺损伤(ALI)大鼠的抗炎效应。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为对照组、ALI组、EPC组,每组各20只。ALI组和EPC组采用LPS(5 mg/kg)静脉注射制备ALI模型,EPC组在造模成功半小时后予EPC悬液移植,观察3组干预过程中血清TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10水平的变化,以及肺湿/干重比值(W/D)、TLR9表达和NF-κB活性的变化。结果:造模后ALI组和EPC组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、和IL-10水平均显著升高(P<0.05)。造模7 d后,EPC组大鼠TLR9表达和NF-κB活性显著低于ALI组(P<0.05),血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平也低于ALI组(P<0.05)。结论:EPC移植可以减轻ALI大鼠的炎症反应,具有一定的抗炎效应。

角膜内皮细胞治疗研究进展

人角膜内皮细胞(HCECs)是一种有丝分裂后的单层内皮细胞,因此,其在体内和体外的增殖能力十分有限。HCECs在严重受损的情况下会发生内皮失代偿,极易引起失明。目前,唯一有效的治疗方法是使用含健康角膜内皮的供体植片进行角膜移植。因此,世界范围内供体材料的严重短缺推动了对角膜内皮替代来源的研究。随着HCECs的细胞培养研究的不断开展,细胞治疗为角膜内皮失代偿提供了希望。本文对角膜内皮细胞治疗方面的最新研究进展进行综述。

雌激素干预的EPCs移植对糖尿病缺血性脑卒中大鼠的治疗作用

目的探讨雌激素干预的EPCs移植对糖尿病缺血性脑卒中的治疗作用。方法制备大鼠糖尿病缺血性脑卒中模型,24 h后通过尾静脉移植经PKH26标记的糖尿病EPCs和雌激素干预的糖尿病EPCs。移植3 d后测定各组大鼠脑缺血体积、大鼠行为学变化、缺血部位血管新生及EPCs的归巢情况。结果与糖尿病脑缺血大鼠相比,雌激素干预的糖尿病EPCs移植能降低脑缺血体积、改善行为学评分和缺血部位的血管新生及促进EPCs归巢到损伤部位(P<0.05)。结论雌激素干预的糖尿病EPCs移植,通过促进EPCs归巢和血管新生对糖尿病缺血性脑卒中有较好的治疗作用。

角膜移植的研究进展

角膜移植是用透明、健康的供体角膜组织替换混浊病变的角膜组织,使患者复明或控制角膜病变,达到增进视力或治疗某些角膜疾病的眼科治疗方法。传统角膜移植分为穿透性角膜移植和板层角膜移植。近10a,深板层角膜移植和内皮细胞移植手术逐渐崛起。而目前,人工角膜移植手术的发展为不适合传统穿透性角膜移植手术的患者提供一种新的选择。本文综述了目前角膜移植领域手术技术的适应证、术后并发症等。

利用后弹力层撕除术建立兔眼角膜内皮失代偿模型的评估

目的利用后弹力层撕除术建立一种新的角膜内皮失代偿模型以便更好地了解该手术的组织反应。方法根据手术方法的不同将40只新西兰成年兔平均分为4组:角膜内皮刮除组、后弹力层撕除组、后弹力层撕除角膜内皮移植术(DSEK)组及DSEK供体组;右眼为手术眼。每组定期通过角膜内皮活体染色,眼前节照相和UBM至少观察2个月。结果后弹力层撕除组角膜始终保持混浊,角膜内皮刮除组和DSEK组角膜逐渐透明,角膜厚度逐渐降低。活体染色显示角膜后弹力层撕除组术后2个月仍无角膜内皮生长。结论后弹力层撕除术建立的角膜内皮失代偿模型显示了后弹力层撕除后角膜内皮愈合过程,可用于角膜内皮移植的研究。

飞秒激光在角膜移植中的应用进展

飞秒激光有高精度的切削特点,使其在角膜移植方面有着巨大的应用潜力,它可以替代机械角膜刀,根据临床需要制作不同形状的角膜植片和植床,适用于穿透性角膜移植、板层角膜移植和角膜内皮细胞移植等手术。飞秒激光的出现为改进和优化各种角膜移植手术方式提供了新的途径,本文将就飞秒激光在角膜移植方面的应用进展做一综述。

体外扩增恒河猴自体内皮细胞人工血管移植研究

目的为自体内皮细胞移植的临床应用奠定理论基础。方法将恒河猴表浅静脉内皮细胞在体外培养１３．９±１．４天；扩增培养的自体细胞衬里于用纤维蛋白胶预衬的膨体聚四氟乙烯（ｅＰＴＦＥ）人工血管，继续培养９天。１５只恒河猴随机分为两组。实验组（１０只）用衬有自体静脉内皮细胞的人工血管置换骼总动脉；对照组（５只）用未衬里内皮细胞的人工血管置换。结果细胞数增加１４８±８９倍。所培养的细胞为二倍体细胞，纯度９９％。原代及传代细胞培养上清液中６－酮－前列腺素Ｆ１ａ（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ）和ＶｏｎＷｉｌｅｂｒａｎｄ因子（ｖＷＦ）含量差异无显著意义。细胞种植后２小时和９天，人工血管腔面见一层均匀的基质，基质表面有一层连续的内皮细胞单层。内皮细胞紧密排列。呈梭状，形态饱满。实验组除１只于术后１２小时因近端吻合口破裂腹腔内出血死亡，１只人工血管于术后４周阻塞外，其余８只恒河猴人工血管术后４周均保持通畅，内膜下组织厚度为８０±１２μｍ；对照组５条人工血管全部阻塞。结论自体内皮细胞移植可有效地提高人工血管的通畅率。

脐血内皮祖细胞移植改善肢体缺血的研究

目的 研究脐血来源血管内皮祖细胞 (endothelialprogenitorcells,EPC)的移植对局部缺血的恢复作用。方法 脐血CD133+ 细胞在体外诱导扩增 10～ 14d后 ,收集贴壁梭形细胞 ,检测其内皮细胞特异标志的表达。将荧光标记的贴壁细胞从尾静脉移植到后肢单侧缺血的裸鼠体内。结果从脐血CD133+ 细胞中可诱导出EPC ,表现为表达内皮细胞标志的贴壁细胞。移植后 ,可整合到缺血部位新生血管内。移植EPC后裸鼠缺血后肢的毛细血管密度、血流灌注及坏死程度均较对照组明显改善 :缺血手术后 2周EPC组的缺血肢 /正常肢的血流比由 19 1%± 3 1%恢复为 77 3%± 5 6 % ,而对照组仅恢复为 4 0 6 %± 3 4 % (P <0 0 0 1) ;缺血后肢的完全恢复率由对照组的 1/10上升至 7/12 (P <0 0 5 )。缺血局部VEGFmRNA上调 ,体外VEGF对EPC具有趋化作用。 4h内趋化到下腔的细胞数为817个± 33个 ,而对照组为 4 74个± 6 2个 (P <0 0 5 )。结论 脐血CD133+ 细胞能诱导EPC ,体内移植后能促进肢体缺血的恢复 ,而缺血局部上调的VEGF表达可能是EPC定向整合到缺血局部的关键因素。