胶质瘤对血脑屏障内皮细胞间连接的影响

目的:探索胶质瘤细胞对血脑屏障细胞间连接的作用及其分子机制。方法:利用内皮细胞与胶质细胞共培养建立体外血脑屏障模型,采用银染的方法探索胶质瘤细胞对其中内皮细胞间连接的作用并运用半定量RT-PCR的方法分析胶质瘤细胞作用后内皮细胞紧密连接蛋白1(ZO-1)的表达变化。结果:在胶质瘤细胞的直接作用过程中,血脑屏障细胞间连接的完整性受到明显破坏,内皮细胞ZO-1表达水平降低;在其间接作用过程中,两者变化不明显。结论:胶质瘤细胞的直接浸润可以破坏血脑屏障内皮细胞间连接,而其间接作用则不能完全破坏。胶质瘤细胞对内皮细胞ZO-1表达的影响是胶质瘤发生、发展过程中血脑屏障内皮细胞间连接变化的重要分子基础。

内皮细胞间连接的研究进展

内皮细胞形成了大分子物质和循环细胞从血液到组织的最主要屏障，内皮细胞的通透性主要是通过内皮细胞间连接进行调控的，本文从内皮细胞间连接的几种方式，信号的转导，连接变化的调控，血管中液体的流动及中性粒细胞渗出对内皮细胞间连接的影响进行阐述，讨论了目前内皮细胞间连接的研究进展，提出内皮细胞间连接和骨架结构对血管通透性的调控，中性粒细胞的渗出和血管内皮细胞间连接的重建都具有非常重要的作用，其中内皮细胞间粘附连接是最重要的一种连接方式。

家兔子宫毛细淋巴管内皮细胞间连接的超微结构研究

家兔子宫毛细淋巴管内皮细胞间连接主要方式有３种，即端端连接、重叠连接和嵌插连接，此外，还观察到其它连接形式。其开放率为４．０％。本文对家兔子宫毛细淋巴管内皮细胞间连接在淋巴液形成中的作用进行了讨论。

过劳诱导小鼠血管内皮屏障功能障碍

目的研究过劳对小鼠血管内皮屏障功能的影响。方法将30只KM小鼠随机分为3组(n=10):对照(CON)组、过劳2周(W2)组、过劳4周(W4)组。W2组和W4组采用水中站立+束缚实验分别连续造模2周和4周,观察小鼠一般情况。造模结束后,每组选取4只小鼠腹腔注射Evans蓝染料,检测血管通透性。另6只小鼠采取ELISA法检测血清IL-1β含量,获取动脉组织行切片观察,RT-qPCR法检测内皮细胞间紧密连接中occludin、claudin-5、ZO-1、JAM-A和黏附连接中VE-cadherin的mRNA表达水平;免疫荧光法检测内皮细胞间连接复合物中claudin-5、ZO-1、VE-cadherin和血管内皮糖萼中Syndecan-1的蛋白表达情况。结果与CON组相比,W2和W4组小鼠体质量增长缓慢,毛发脱落,活动减少。与CON组相比,W4组血管通透性明显增加。与CON组相比,W2和W4组血清IL-1β含量增加(P<0.05)。与CON组相比,W2组内皮细胞肿胀、脱落,内膜粗糙不规则,W4组出现内膜断裂现象。与CON组相比,W2组动脉组织中occludin、claudin-5、ZO-1、JAM-A的mRNA表达量增加,W4表达均降低(P<0.05);W2和W4组VE-cadherin的mRNA表达量下降(P<0.05)。与CON组相比,W4组claudin-5、ZO-1、VEcadherin和Syndecan-1蛋白表达减少(P<0.05)。结论过劳随时间的延长可对动脉内皮细胞间连接复合物以及内皮糖萼造成损伤,破坏其屏障功能,导致血管通透性增加。

大鼠烫伤后脏器血管内皮细胞损伤及蜕皮甾酮对其保护作用的研究

目的 研究大鼠烫伤后脏器血管内皮细胞通透性变化及机制 ,蜕皮甾酮 (EDS)对脏器损伤的保护作用。方法 将健康Wistar大鼠随机分成 4组 :正常对照组 (NOM) ;烫伤组 (S) ;药物对照组 (EDS) ;药物治疗组 (S +EDS)。测定指标 :心肺肾血管通透性 ;组织VE 钙粘附分子表达 ;组织血管内皮细胞间连接超微结构变化。结果 鼠烫伤后烫伤组脏器血管内皮细胞通透性增加 ,VE 钙粘附分子表达减少 ,组织血管内皮细胞间连接损伤 ;EDS治疗后上述各指标损伤减轻。结论 鼠烫伤后血管内皮细胞通透性增加 ,内皮细胞连接损伤可能是通透性增加的原因之一 ,EDS对烫伤鼠血管内皮细胞损伤可能有一定的保护作用。

血管内皮钙粘蛋白相关信号及其调控的研究进展

血管内皮钙粘蛋白作为血管内皮细胞间的主要连接蛋白，介导内皮细胞连接的稳定并进行相关信号传递，参与调控血管重塑及维持血管完整性。内皮细胞间的相互连接主要有两种方式：黏附连接和紧密连接。这种连接结构由同种抗原的跨膜黏附蛋白构成，以此再与细胞内的特异性分子相结合，调节细胞肌动蛋白骨架，形成稳定的内皮细胞连接结构［1］；且在不同的血管内环境下，内皮细胞的连接功能表现也不一样。本文对血管内皮细胞钙粘连蛋白（ VE－cadher-in）相关信号及其调控进行综述，同时探讨该信号通路与脑血管疾病、特别是颅内动脉瘤形成的相关性。

茶多酚对胃缺血再灌注致黏膜毛细血管内皮超微结构损伤的保护作用

目的观察茶多酚(polyphenols of tea,PPT)对胃缺血再灌注致胃黏膜毛细血管内皮超微结构损伤的保护作用。方法将30只雄性SD大鼠随机分成6组(n=5):空白对照组、手术组、20mg/kg PPT组、40mg/kg PPT组、80mg/kg PPT组、160mg/kgPPT组。在成功制作胃缺血动物模型的基础上,观察大鼠胃缺血30min后再灌注12h胃黏膜组织毛细血管内皮细胞超微结构的变化。结果茶多酚可显著减轻胃黏膜组织毛细血管内皮细胞超微结构的损伤。结论茶多酚对胃缺血再灌注致胃黏膜毛细血管内皮损伤具有保护作用,且存在剂量关系。

STZ糖尿病大鼠视网膜病变模型的再评价

目的本研究旨在对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠视网膜病变糖尿病进行系统性的再评价。方法雄性SD大鼠75只,随机分为空白组(30只)和糖尿病组(45只)。采用一次性大剂量腹腔注射STZ60mg/kg的方法制备糖尿病模型,监测6个月,动态考察大鼠的体重、血糖变化,同时测定大鼠的血液流变学参数。视网膜铺片法观察视网膜形态学变化,免疫组化法考察血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)表达的变化,Western blotting法观察内皮细胞紧密连接蛋白(occludin)、细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,缩写ICAM-1)表达量的变化,分光光度法测定醛糖还原酶(aldose reductase,AR)活性的改变。结果与空白组相比,STZ大鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数均增加。视网膜血管基底膜增厚,毛细血管退化,有闭锁现象,静脉扩张明显,周细胞数量明显减少。其视网膜中的VEGF表达增加(IOD/area 0.66±0.28,空白组0.25±0.03),PEDF表达减少(IOD/area0.07±0.06空白0.19±0.04),与血-视网膜屏障相关的occludin蛋白表达下降70%,炎症因子ICAM-1增加2.58倍,AR活性升高3倍。结论 STZ糖尿病大鼠视网膜病变发生在多个位点,借助该模型对糖尿病视网膜病变的研究可以从多层次、多角度进行。

丙泊酚对血管内皮通透性的作用及机制

目的探讨不同浓度丙泊酚对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)活力、内皮损伤相关蛋白[可溶性血栓调节蛋白(soluble thrombomodulin,sTM)、内皮细胞特异性分子‑1(endothelial cell specific molecule‑1,ESM‑1)、E‑选择素(E‑selectin,CD62E)]、内皮细胞紧密连接蛋白[咬合蛋白(occludin)、闭锁连接蛋白‑1(zonula occludens 1,ZO1)、闭合蛋白(claudin 5)]和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法以体外培养的HUVEC 3~5代作为实验对象。细胞分入:A组,细胞正常培养组;B组,100μmol/L丙泊酚组;C组,1000μmol/L丙泊酚组;D组,和1000μmol/L丙泊酚同等剂量的中/长链脂肪乳剂组;各组处理细胞24 h。3‑(4,5‑二甲基噻唑‑2)‑2,5‑二苯基四氮唑溴盐(噻唑蓝)[3‑(4,5‑dimethyl‑2‑thiazolyl)‑2,5‑diphenyl‑2‑H‑tetrazolium bromide,MTT]比色法检测细胞活力,Western blot检测sTM、ESM‑1、CD62E、occludin、ZO1、claudin 5和VEGF在内皮细胞模型中的表达情况。结果与A组比较,C组细胞活力明显降低(P<0.05),B组、D组差异无统计学意义(P>0.05)。与A组比较,C组sTM的表达明显升高(P<0.05),B组、D组sTM表达差异无统计学意义(P>0.05)。与A组比较,B组、C组、D组ESM‑1和CD62E表达差异无统计学意义(P>0.05)。与A组比较,C组occlu‑din的表达明显降低(P<0.05),B组、D组occludin的表达差异无统计学意义(P>0.05)。与A组比较,B组、C组、D组claudin‑5和ZO1表达差异无统计学意义(P>0.05)。与A组比较,B组、C组VEGF的表达明显升高(P<0.05),D组VEGF表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论高浓度丙泊酚通过调节sTM和occludin的表达导致血管内皮细胞通透性升高,并且VEGF信号通路参与了药物诱导内皮细胞通透性增高。

COP9信号小体基因缺失对新型隐球酵母菌嗜中枢性的影响与机制研究

目的探讨COP9信号小体（CSN）基因缺失对新生隐球酵母菌嗜中枢性的影响及可能机制,为研究抗真菌药物作用靶点提供实验数据。方法 2014年7月以环磷酰胺免疫抑制C57BL/6小鼠,尾静脉注射H99株、COP9信号小体CSN1201基因缺失株及生理盐水,构建小鼠静脉注射感染模型H99组、CSN1201△及对照组各10只;所有数据采用SPSS 15.0进行分析。结果 H99组小鼠脑组织真菌培养在12h即出现菌落生长,生长速度迅速,PAS染色可见隐球酵母菌菌体;CSN1201△组及对照组脑组织培养结果为阴性,PAS染色未见隐球酵母菌菌体;H99组小鼠脑组织RhoA蛋白表达水平值随时间增加而增加,与对照组相比,24~72h该蛋白表达显著增加（P〈0.05）;Rac1及Cdc42蛋白表达未随时间变化,但与对照组相比蛋白表达也明显增加（P〈0.05）。结论COP9信号小体CSN1201基因缺失能够降低新生隐球酵母菌穿越血脑屏障的能力,其影响途径可能与脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白细胞骨架重排的调控有关。