内皮脂肪酶和脂蛋白酶在冠状动脉粥样硬化发生及发展中的作用研究进展

冠心病是主要由冠状动脉粥样硬化导致的心肌缺血性病变。动脉壁僵硬、脂质代谢异常导致动脉内膜脂质类物质聚集、纤维组织增生和钙质沉积,斑块形成,从而影响血液运输。内皮脂肪酶(EL)是一种磷脂酶,可水解血浆高密度脂蛋白胆固醇,具有促进脂肪分解代谢的作用。脂蛋白酶(LPL)是溶解脂蛋白的关键酶,其特定的酶分子结构可水解甘油三酯,参与人体内脂蛋白代谢。因此,了解EL、LPL在冠状动脉粥样硬化发生及发展中的作用对早期防治冠心病至关重要。现对EL和LPL的结构、生物学特点以及在冠状动脉粥样硬化形成中的作用进行综述。

内皮脂肪酶作为冠心病治疗靶点的研究进展

内皮脂肪酶(EL)主要由血管内皮细胞生成,负责调控肝脏脂质代谢及肠道脂质吸收。在炎性状态下EL可促进巨噬细胞及血小板在受损血管内皮黏附、聚集;EL还可促进受损血管内皮细胞增殖,抑制EL的过表达可减轻动脉粥样硬化病变程度。但在急性冠脉病变及氧化应激反应时EL却能增强高密度脂蛋白胆固醇抗氧化能力减轻炎性反应对血管内皮损伤,增强受损心肌细胞能量代谢能力抑制受损心肌细胞凋亡。EL抑制剂作为血脂代谢紊乱、动脉粥样硬化疾病新型治疗用药还需更广泛药物临床试验明确其真实临床疗效、安全性及具体临床适用场景。

内皮脂肪酶在高密度脂蛋白介导的动脉粥样硬化中的作用机制研究进展

综述内皮脂肪酶在高密度脂蛋白(HDL)介导的动脉粥样硬化中的作用。HDL是一种具有一定的抗动脉粥样硬化作用的脂蛋白颗粒的异质混合物,负责在循环中携带脂质,对内皮发挥了几种潜在的血管保护功能。而内皮脂肪酶是具有磷脂酶活性的三酰甘油脂肪酶家族的新成员,能有效地水解HDL,从而产生溶血卵磷脂和游离脂肪酸,严重损害血清的胆固醇流出能力,进而影响了动脉粥样硬化的进展。故深入研究内皮脂肪酶、HDL和动脉粥样硬化三者的相互关系,可为动脉粥样硬化相关病变的预防与防治开辟一条新的研究方向。

胰岛素泵强化治疗对2型糖尿病合并冠心病患者血糖波动、内皮脂肪酶及超敏C反应蛋白的影响

目的：观察胰岛素泵强化治疗对2型糖尿病（ T2DM）合并冠心病患者血糖波动及血清内皮脂肪酶（ EL）、超敏C反应蛋白（ hs-CRP）的影响。方法选择2013年6月-2014年3月在北京军区总医院内分泌科住院的T2DM合并冠心病患者60例。入院当天行72 h动态血糖监测（CGM）,并予胰岛素泵皮下持续输注强化治疗10~14 d,血糖控制平稳后再次行CGM,比较治疗前后日内平均血糖波动幅度（ MAGE）、全天血糖标准差（ SDBG）、最大血糖波动幅度（ LAGE）；治疗前后测量患者身高、体重计算体重指数（ BMI）,空腹采集患者静脉血检测空腹血糖（ FPG）、餐后2 h血糖（2 h PG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、hs-CRP及EL,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）；分析治疗前EL水平与其他指标的相关性。结果与治疗前比较,本组治疗后HOMA-IR、EL、hs-CRP、MAGE、SDBG、LAGE均显著降低（P〈0.05,P〈0.01）；Pearson相关分析显示,治疗前EL水平与hs-CRP、MAGE水平呈显著正相关（r=0.517、0.428, P〈0.01）。结论对T2DM合并冠心病患者予胰岛素泵强化治疗不仅可降糖、控制血糖波动,还能抗炎、抗动脉粥样硬化,对糖尿病大血管并发症的防治起到重要作用。

循环内皮细胞中内皮脂肪酶的表达与冠心病患者临床表现的关系

目的通过检测冠心病患者循环内皮细胞(CEC)中内皮脂肪酶(EL)的表达,探讨内皮细胞中EL表达与冠心病患者临床表现的关系。方法根据冠心病患者临床表现和冠状动脉造影结果将81例患者分为对照组(有冠心病危险因素但冠状动脉造影正常者21例)、稳定性心绞痛组(SAP组,24例)、不稳定性心绞痛组(UAP组,22例)、急性心肌梗死组(AMI组,14例),分别进行CECs计数、用免疫组织化学法检测患者CECs中EL表达情况、检测高敏C反应蛋白(hsCRP),并计算EL阳性CECs比例(EL^+/CECs)、低密度脂蛋白/高密度脂蛋白(LDL/HDL)。结果在冠心病患者CECs中存在EL表达,且随病变危险性增加而增强;UAP组和AMI组的CECs计数、hsCRP、LDL/HDL与对照组比较,均有显著性差异(P＜0．05);EL^+/CECs在各组间均有显著性差异(P＜0．05),EL^+/CECs与CECs计数、hsCRP、LDL/HDL呈显著正相关(P＜0．05)。结论冠心病患者CECs中存在EL表达,EL^+/CECs可作为冠心病危险性增加和冠心病患者临床病情的预测指标。

内皮脂肪酶对人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达的影响及量效关系

目的研究内皮脂肪酶（endothelial lipase，EL）对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）黏附分子ICAM-1表达的影响及量效关系。方法以TNF-α（10ng／ml）刺激HUVEC，用RT—PCR检测黏附分子ICAM-1 mRNA表达的变化；以50ng／ml EL抗体进行预处理，再检测黏附分子mRNA表达的变化；再用0～50ng／ml不同浓度EL抗体对HUVEC进行预处理，检测不同浓度EL抗体作用后ICAM-1 mRNA表达的变化。结果HUVEC受TNF-α作用后，ICAM-1表达显著增加（P〈0．01），该作用可为EL抗体所拮抗，这种拮抗作用呈现剂量依赖性增强（P〈0．01，P〈0．05）。结论EL可呈剂量依赖性的促进内皮细胞表达ICAM-1，提示TNF-α作用于HUVEC产生的EL可促进黏附分子ICAM-1的表达。

冠心病患者循环内皮细胞内皮脂肪酶表达与冠脉危险积分的关系及意义

目的检测冠心病患者循环内皮细胞(CEC)内皮脂肪酶(EL)的表达,探讨循环内皮细胞EL与冠脉病变的关系及临床意义。方法107例急性冠脉综合征(ACS)患者和69例稳定型心绞痛(SAP)患者经冠脉造影证实有明显冠脉狭窄;经临床检查和选择性冠脉造影选择82例为对照组。采集肘静脉血液标本,分离并测定CECs计数,以免疫组化和Westernblot法检测循环内皮细胞中EL的表达,并计算EL阳性CECs比例(EL+/CECs),按改进的冠脉危险积分(jeopardyscore)法评价冠脉病变情况。结果ACS患者改进冠脉危险积分、hsCRP、CECs计数、EL+/CECs显著高于对照组(P<0.05),SAP组hsCRP、CECs计数、EL+/CECs与ACS组比较差异也有统计学意义(P<0.05),改进冠脉危险积分与EL+/CECs、hsCRP、CECs计数有相关性(P<0.001,P<0.01)。结论冠心病患者内皮细胞表达的EL可能参与冠心病的发病,EL+/CECs高者提示患者可能存在冠脉狭窄。

内皮脂肪酶与原发性高血压的相关性研究

目的检测内皮脂肪酶(EL)在原发性高血压病人血浆中的水平,探讨EL与高血压病的相关性。方法77例原发性高血压病人(高血压组)及34名健康对照者,分别进行病史采集,测量身高、体重、血压,并计算体重指数(BMI),监测血糖(FBG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)等指标。收集血标本,用酶联免疫吸附法检测血浆EL的水平,分析EL与高血压的相关性。结果对照组血浆EL浓度(338.7±51.0)ng/mL,高血压组EL浓度为(395.0±65.2)ng/mL,两组比较有统计学意义(P<0.05);高血压病人EL的表达与收缩压、舒张压呈正相关(r分别为0.17、0.08,P<0.05)。结论高血压病病人血浆EL增高,EL在高血压病中有重要意义。

阿托伐他汀对肿瘤坏死因子α诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞内皮脂肪酶表达的影响

目的观察阿托伐他汀对肿瘤坏死因子α诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞内皮脂肪酶表达的影响。方法原代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞中先加入50μg/L的肿瘤坏死因子α,1h后加入不同浓度(1×10-7mmol/L、1×10-6mmol/L和1×10-5mmol/L)的阿托伐他汀,继续孵育24h后,收集细胞,采用逆转录聚合酶链反应检测培养的平滑肌细胞中内皮脂肪酶mRNA的表达情况。另外,取阿托伐他汀1×10-5mmol/L浓度,分别在6、12和24h用同样的方法检测培养细胞中内皮脂肪酶mRNA表达情况。结果随阿托伐他汀浓度的增加,肿瘤坏死因子α诱导的平滑肌细胞内皮脂肪酶mRNA表达水平呈下降趋势,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),不同浓度组之间比较亦有统计学意义(P<0.05);在1×10-5mmol/L阿托伐他汀作用下,随着作用时间的延长平滑肌细胞内皮脂肪酶mRNA表达水平亦呈下降趋势,与对照组比较有统计学意义(P<0.05),不同时间组之间比较亦有统计学意义(P<0.05)。结论随着阿托伐他汀浓度的增加与作用时间的延长,肿瘤坏死因子α诱导的平滑肌细胞内皮脂肪酶mRNA的表达均呈下降趋势。

白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α对大鼠主动脉平滑肌细胞内皮脂肪酶表达的影响

目的观察白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α对大鼠主动脉平滑肌细胞内皮脂肪酶表达的影响。方法采用贴块法原代培养大鼠主动脉平滑肌细胞,选用第3～5代细胞随机分组实验:对照组、不同浓度白细胞介素1β干预组和不同浓度肿瘤坏死因子α干预组。用酶联免疫吸附法、逆转录聚合酶链反应分别检测诱导后细胞内皮脂肪酶蛋白及mRNA表达水平。结果平滑肌细胞经不同浓度白细胞介素1β或肿瘤坏死因子α诱导24h后,内皮脂肪酶表达水平上升,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),各浓度组间比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α分别为30μg/L、50μg/L时内皮脂肪酶表达水平最高。结论白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α均能诱导大鼠主动脉平滑肌细胞内皮脂肪酶表达。

H型高血压患者内皮脂肪酶和脂联素水平变化

目的 观察H型高血压患者血清内皮脂肪酶（EL）和脂联素（APN）水平变化,并探讨同型半胱氨酸（Hcy）与EL、APN及血脂的相关性。方法 选择2014年1月~2015年2月在湖南医药学院第一附属医院确诊为原发性高血压的患者120例,男性77例,女性43例,年龄30~70（52.7±4.3）岁,其中H型高血压组患者90例。按血清Hcy浓度分为三组：Hcy〈10μmol/L为单纯高血压组（30例）,Hcy10~30μmol/L为轻度升高组（59例）,Hcy 30~100μmol/L为中度升高组（31例）。另选择30例健康体检者作为对照组。所有入选者均检测Hcy、EL、APN、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、空腹血糖（FPG）水平。结果 H型高血压组和单纯高血压组的TC、LDL-C、SBP、DBP与对照组比较均升高,差异具有统计学意义（P均〈0.01）。与对照组比较,H型高血压组和单纯高血压组血清EL水平升高,APN降低,差异有统计学意义（P均〈0.01）。H型高血压组较单纯高血压组的血清EL和Hcy升高,差异有统计学意义（P均〈0.01）。单纯高血压组、轻度升高组、中度升高组随着Hcy水平的升高,三组血清EL水平也升高,差异有统计学意义（P均〈0.05）。相关分析结果显示,血清Hcy水平与EL、LDL-C呈正相关（r=0.397,P〈0.01;r=0.409,P〈0.01）。结论 H型高血压患者血清EL水平升高,APN水平降低,且EL随着Hcy升高而升高。

内皮脂肪酶与2型糖尿病大血管病变的相关性

目的探讨2型糖尿病患者血清内皮脂肪酶与糖尿病大血管病变的关系。方法 66例2型糖尿病患者根据有无大血管并发症分为大血管病变组(32例)及无大血管病变组(34例),30例健康者为对照组。采用酶联免疫吸附法测定各组血清内皮脂肪酶水平,并进行组间比较。结果大血管病变组血清内皮脂肪酶水平(3.31±1.30 ng/L)显著高于无大血管病变组(2.54±1.11 ng/L)和对照组(2.36±0.91 ng/L,P<0.05),无大血管病变组与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。相关分析表明2型糖尿病血清内皮脂肪酶与糖化血红蛋白及高敏C反应蛋白呈明显正相关(r分别为0.54和0.59,P<0.01),与高密度脂蛋白呈负相关(r=-0.36,P<0.05)。结论血浆内皮脂肪酶增高可能参与2型糖尿病患者大血管病变的发生、发展。

内皮脂肪酶与冠心病的相关性研究

目的检测冠心病患者血浆内皮脂肪酶(EL)水平,探讨EL与冠心病的相关性。方法选取81例冠心病患者,并根据临床表现分为稳定性心绞痛(SAP)(n=18)、不稳定性心绞痛(UAP)(n=23)、急性心肌梗死(AMI)(n=21)及对照组(n=19)。所有患者分别进行病史采集,并检测空腹血糖(FBG)、血脂、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、EL水平,分析EL与年龄、性别、吸烟比例、HDL-C、LDL-C、FBG、hs-CRP及冠状动脉病变程度的相关性。结果对照组血浆EL水平为(346.4±54.3)μg/L,而SAP组、UAP组、AMI组分别为:(693.2±89.7)μg/L、(780.3±99.2)μg/L(、962.5±123.3)μg/L,各组间EL水平比较差异有统计学意义(P<0.05);EL与HDL-C、LDL-C、FBG及hs-CRP明显相关(P<0.05);Gensini评分SAP组分别与UAP组、AMI组比较,差异有统计学意义(P<0.01),冠心病组EL平均水平与冠状动脉狭窄程度Gensini平均评分呈正相关(r=0.483,P<0.01)。结论冠心病患者体内EL表达明显增高,EL在冠心病的发生中可能起一定的作用。

内皮脂肪酶584C/T多态性与急性冠脉综合征相关性研究

目的:探讨内皮脂肪酶(endothelial lipase,EL)基因584C/T多态性与急性冠脉综合征(acute coronary syn-drome,ACS)及血脂的相关性。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测324例ACS患者和299例健康体检者内皮脂肪酶基因584C/T基因型。结果:ACS组血清HDL、ApoA-I水平及ApoA-I/ApoB明显低于对照组,而LP(α)却明显高于对照组。中国常州地区汉族人群存在EL 584C/T基因多态性,基因型及等位基因频率分布符合Hard-Weinberg平衡。ACS组CC、CT、TT基因型频率分别为60.2%、35.8%、4.0%;对照组CC、CT、TT基因型频率分别为56.2%、40.8%、3.0%;两组间基因型频率分布无统计学意义(P=0.389)。ACS组C等位基因频率为78.1%;对照组C等位基因频率为76.6%,两组间等位基因频率差异也无统计学意义(P=0.528)。经校正性别、年龄、糖尿病、高血压、吸烟、高脂血症等冠心病危险因素后,结果仍然表明该多态性与ACS无明显相关性。T等位基因携带者(CT+TT)血脂水平及其比值与CC基因型者比较差异无统计学意义。结论:中国常州地区汉族人群EL 584C/T基因多态性与ACS无明显相关性,与血脂及其比值也无明显相关性,EL 584C/T多态性可能不是中国常州地区汉族人群ACS发病的易感因素。

内皮脂肪酶基因Thr111Ile多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的相关性研究

目的探讨内皮脂肪酶(EL)基因Thr111Ile多态性与动脉粥样硬化性脑梗死(ACI)的相关性,及其对血脂、颈动脉粥样硬化(AS)形成的影响。方法采用聚合酶链反应(PCR)和限制性片段长度多态性(RFLP)方法检测266例ACI患者和91例正常对照者EL基因Thr111Ile多态性。通过全自动分析仪酶法测定甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,并通过颈部血管彩超观察AS形成的情况。结果 ACI组EL基因Thr111Ile基因型频率和等位基因频率与对照组相比无显著性差异(P>0.05);ACI组与对照组Thr111Ile TT型的HDL-C水平均显著高于同组CC型(P<0.05);Thr111Ile TT型患AS的几率为CC型的0.343倍(95%CI:0.129,0.913;P=0.032)。结论 EL基因Thr111Ile多态性可能与中国湖南地区汉族人群动脉粥样硬化性脑梗死无关;EL基因Thr111Ile T等位基因可能与HDL-C代谢有关;EL基因Thr111Ile多态性可能与AS有关,TT基因型可能是AS的保护性因素之一。

ox-LDL对巨噬细胞内皮脂肪酶表达的影响

目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对鼠源RAW264.7巨噬细胞内皮脂肪酶(EL)表达的影响。方法:用ox-LDL(0～100 mg/L)孵育RAW264.7细胞24 h使其活化,或者用PDTC(NF-κB抑制剂)预孵育RAW264.7细胞30 min再与ox-LDL(50 mg/L)共同孵育24 h;应用Western blotting检测EL和NF-κB p65的表达。结果:ox-LDL孵育RAW264.7细胞明显增加EL表达(P<0.05);ox-LDL(50 mg/L)孵育RAW264.7细胞15～30 min可激活NF-κB,用NF-κB抑制剂PDTC处理后则明显抑制ox-LDL诱导的EL表达增加(P<0.05)。结论:ox-LDL可明显增加RAW264.7细胞EL的表达,可能与NF-κB活化有关。

冠心病危险因素对内皮脂肪酶表达的影响作用

目的分析冠心病危险因素对人血浆内皮脂肪酶(Endothelial lipase,EL)表达的影响。方法133例受试者分为5组,每例抽取静脉血,采用酶联免疫吸附法检测血浆内皮脂肪酶浓度。结果对照组血浆EL浓度(338.6±51.0)ng/ml,单纯高血压组(418.1±72.3)ng/ml,脂质异常组(410.7±36.7)ng/ml,与对照组比较有统计学意义(P<0.05);当合并肥胖时EL高表达,高血压肥胖组、脂质异常肥胖组、脂质异常高血压肥胖组分别为(464.2±41.7)ng/ml、(458.2±51.8)ng/ml、(542.0±49.8)ng/ml,与对照组、单纯高血压组及单纯脂质异常组相比差异有显著性(P<0.05)。内皮脂肪酶与每个指标做多元线形回归分析结果:高敏C反应蛋白、BMI、LDL、HDL对内皮脂肪酶表达有影响作用。Pearson相关分析结果:内皮脂肪酶与HDL负相关(r=-0.35,P<0.05),余指标呈正相关。结论冠心病危险因素可以影响内皮脂肪酶的表达,有可能通过升高EL的表达致动脉粥样硬化。

内皮脂肪酶与高密度脂蛋白及动脉粥样硬化的关系

高密度脂蛋白具有一定的抗动脉粥样硬化的作用,而内皮脂肪酶可水解高密度脂蛋白,进而影响动脉粥样硬化的进展,故深入探讨三者关系,可能为动脉粥样硬化相关疾病的防治提供崭新的靶点。

内皮脂肪酶启动子-384A／C多态性与老年急性冠脉综合征及血脂的相关性

目的探讨内皮脂肪酶基因启动子-384A／C基因多态性与老年急性冠脉综合征及血脂的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测241例老年急性冠脉综合征（ACS）患者和181例健康体检者内皮脂肪酶基因启动子-384A／C基因型。结果中国常州地区汉族人群老年人存在EL-384A／C基因多态性，C等位基因频率为13．74％。对照组与老年ACS组EL-384A／C基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义；经校正性别、年龄、糖尿病、高血压、吸烟、高脂血症等冠心病危险因素后，结果仍然表明该多态性与老年ACS无明显相关性。不同基因型亚组间血脂水平差异无统计学意义。结论EL-384A／C基因多态性与老年ACS及血脂无明显相关性，该多态性可能不是中国常州地区汉族人群老年ACS发病的易感因素。

内皮脂肪酶与心血管疾病

内皮脂肪酶(EL)是三酰甘油脂肪酶家族新成员,自1999年被发现以后,其与动脉粥样硬化(AS)和冠心病(CHD)之间关系的研究逐渐深入,EL可能通过多条途径参与AS的发生、发展。本文对EL及其基因多态性近年来在心血管领域的研究成果作一综述。