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低氧诱导内皮-间充质转化致肺血管重构及药物干预研究进展
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作者 王洪麦 夏晴晴 +2 位作者 盖祥云 王金宇 赵悦孚 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期232-240,共9页
肺动脉高压(PH)是由于内皮功能障碍以及其他因素导致的肺血管重构,进而引起肺动脉压力升高,最终导致右心衰竭甚至死亡。目前临床药物治疗虽可显著改善PH症状,但不能从根本上解决血管重构和右心衰竭问题,故亟待寻找新的治疗手段。内皮细... 肺动脉高压(PH)是由于内皮功能障碍以及其他因素导致的肺血管重构,进而引起肺动脉压力升高,最终导致右心衰竭甚至死亡。目前临床药物治疗虽可显著改善PH症状,但不能从根本上解决血管重构和右心衰竭问题,故亟待寻找新的治疗手段。内皮细胞在低氧刺激后可获得间充质表型,即内皮-间充质转化(EndMT)。越来越多的研究表明,EndMT在PH肺血管重构中发挥重要作用。低氧条件下诱导End MT的信号通路有:(1)转化生长因子β/骨形态发生蛋白(TGF-β/BMP)信号通路,该通路是由Smad介导,低氧通过抑制或诱导下游介质Smad的磷酸化水平,从而调节EndMT相关基因的表达;(2) Notch信号通路,低氧可增强Jagged/Notch信号通路促进EndMT过程;(3) Wnt/β联蛋白信号通路,低氧增加β联蛋白表达,激活Wnt信号通路,调节EndMT调控基因的表达。低氧诱导的EndMT作为重要致病因素在PH发病中具有重要意义。本综述以期为肺血管重构的改善提供新研究方向,并为PH的防治提供新有效策略。 展开更多
关键词 肺血管重构 低氧 内皮-间充质转化 肺动脉高压
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MicroRNA-21对内皮-间充质转化的影响及其在慢性阻塞性肺疾病发病机制中的作用 被引量:1
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作者 廖毓梅 曾征鹏 +2 位作者 蔡金文 孙圣华 谢丽华 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期323-329,共7页
目的:慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种以持续气流受限为特征的疾病。本研究旨在探讨COPD小鼠模型是否存在内皮-间充质转化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT),并初步探讨微RNA(microRN... 目的:慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种以持续气流受限为特征的疾病。本研究旨在探讨COPD小鼠模型是否存在内皮-间充质转化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT),并初步探讨微RNA(microRNA,miR)-21与EndMT的关系。方法:建立小鼠COPD模型及miR-21基因敲除COPD动物模型(均为香烟烟雾诱导),将小鼠分为3组(n=4):对照组、COPD组和miR-21基因敲除COPD组(miR-21^(−/−)-COPD组)。采用Masson三色染色法观察血管周围胶原纤维沉积的情况,免疫组织化学染色观察肺组织切片中内皮细胞标志物血管内皮钙黏蛋白(vascular endothelial-cadherin,VE-cadherin)、内皮一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、血小板内皮细胞黏附分子-1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31)和间皮细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、神经钙黏蛋白(neural cadherin,N-cadherin)的表达情况。结果:与对照组相比,COPD组的胶原纤维沉积面积增加(P<0.05),VE-cadherin、eNOS、CD31的表达水平降低(均P<0.05),α-SMA、N-cadherin表达水平均升高(均P<0.05)。与COPD组相比,miR-21^(−/−)-COPD组胶原纤维沉积面积减小(P<0.05),VEcadherin、eNOS、CD31的表达水平均升高(均P<0.05),α-SMA、N-cadherin表达水平均降低(均P<0.05)。结论:香烟烟雾诱导的COPD动物模型存在EndMT过程,miR-21基因敲除可减少COPD小鼠血管周围胶原纤维沉积面积和延缓EndMT过程。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 MIR-21 内皮-间充质转化 血管重塑
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糖尿病肾病中微小RNA在肾脏内皮-间充质转化中的调控机制 被引量:2
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作者 袁芸 李宇宸 +1 位作者 杨璐瑶 胡琼英 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期1246-1251,共6页
内皮细胞是一种呈多边形厚度极薄的扁平状细胞,由其嵌合排列组成毛细血管、小动脉、动脉、静脉和淋巴管等血管结构的内表面,参与调节和维持血管通透性及物质交换的过程^([1])。特殊情况下,完全分化的内皮细胞具有转化为其他类型细胞的... 内皮细胞是一种呈多边形厚度极薄的扁平状细胞,由其嵌合排列组成毛细血管、小动脉、动脉、静脉和淋巴管等血管结构的内表面,参与调节和维持血管通透性及物质交换的过程^([1])。特殊情况下,完全分化的内皮细胞具有转化为其他类型细胞的可塑性,内皮细胞被生长因子刺激后发生形态功能变化,获得间充质样标志物,这一过程称为内皮-间充质转化(EndMT)^([2])。机体在纤维化过程中,由成纤维细胞组成的纤维化组织不受控制地过度积累,同时分泌大量细胞外基质(ECM). 展开更多
关键词 糖尿病肾病 内皮-间充质转化 微小RNA
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细胞分裂周期蛋白42通过内皮-间充质转化参与动脉型肺动脉高压小鼠右心室纤维化
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作者 王晓彤 秦立龙 +2 位作者 王寒黎 汪丽静 程玉生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1756-1764,共9页
目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是否通过内皮-间充质转化(EndMT)参与动脉型肺动脉高压(PAH)小鼠右心纤维化。方法:健康雄性C57BL/6小鼠(5~8周龄)18只,随机分成常氧对照(NC)组、PAH模型[SU5416(血管内皮生长因子受体2抑制剂)+低氧,S... 目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是否通过内皮-间充质转化(EndMT)参与动脉型肺动脉高压(PAH)小鼠右心纤维化。方法:健康雄性C57BL/6小鼠(5~8周龄)18只,随机分成常氧对照(NC)组、PAH模型[SU5416(血管内皮生长因子受体2抑制剂)+低氧,SuHx]组和SuHx+ML141(Cdc42抑制剂)组,每组6只。所有存活小鼠在4周后用异氟烷麻醉,行心脏超声检查及右心室收缩压(RVSP)监测,之后处死小鼠。用HE和Masson染色观察小鼠右室心肌细胞改变及纤维化程度。使用磁珠分选小鼠心脏内皮细胞并用不同条件处理。通过Western blot检测小鼠心脏组织Cdc42表达水平及内皮细胞Cdc42和EndMT相关蛋白[波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血小板内皮细胞黏附分子1(PECAM-1/CD31)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)和锌指蛋白Snail]表达水平,同时用倒置显微镜观察各组内皮细胞形态。结果:体内实验结果显示,与NC组相比,SuHx组小鼠心脏组织Cdc42表达水平显著升高(P<0.05);预防给予ML141(8 mg/kg)可降低小鼠RVSP,增大三尖瓣环平面收缩期位移(TAPSE),减轻心脏(尤其是血管旁)纤维化(P<0.01)。体外实验结果显示,SuHx组和低氧72 h组小鼠心脏内皮细胞Cdc42表达水平显著升高,EndMT增强,EndMT相关蛋白vimentin和α-SMA的表达显著增加,CD31和VE-cadherin的表达显著降低(P<0.05);预防给予ML141(10μmol/L)后可缓解低氧72 h诱导的EndMT。结论:Cdc42可能通过上调EndMT参与PAH小鼠右心纤维化。 展开更多
关键词 动脉型肺动脉高压 细胞分裂周期蛋白42 内皮-间充质转化 低氧
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Notch信号通路与内皮-间充质转化及肺纤维化关系的研究进展
5
作者 张伟津 蔡丽云 《中外医学研究》 2023年第21期177-181,共5页
肺纤维化是一种慢性进行性的呼吸系统疾病,在老年群体中表现出很高的患病率。目前仍是一种难以治愈的间质性肺部疾病。近来研究表明,肺内皮细胞可通过内皮-间充质转化(EndMT)参与肺间质纤维化的形成和发展从而导致纤维化。Notch信号通... 肺纤维化是一种慢性进行性的呼吸系统疾病,在老年群体中表现出很高的患病率。目前仍是一种难以治愈的间质性肺部疾病。近来研究表明,肺内皮细胞可通过内皮-间充质转化(EndMT)参与肺间质纤维化的形成和发展从而导致纤维化。Notch信号通路不仅广泛参与EndMT的过程而且广泛参与肺等器官的纤维化疾病,影响肺纤维化患者的预后。因此,本文主要对Notch信号通路与EndMT及肺纤维化的关系做一综述。 展开更多
关键词 肺纤维化 NOTCH信号通路 内皮-间充质转化
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c-SKI对冠脉内皮细胞增殖及内皮-间充质转化的影响 被引量:3
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作者 王娟 幸世峰 +3 位作者 吕忠英 李鹏 李红建 罗梅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1762-1768,共7页
目的:探讨核蛋白c-SKI对冠状动脉内皮细胞增殖能力及内皮-间充质转化的影响。方法:使用不同浓度的转化生长因子β1(TGF-β1)作用人冠脉内皮细胞不同时点,Western blot法检测各组细胞中c-SKI、间充质细胞标志物波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋... 目的:探讨核蛋白c-SKI对冠状动脉内皮细胞增殖能力及内皮-间充质转化的影响。方法:使用不同浓度的转化生长因子β1(TGF-β1)作用人冠脉内皮细胞不同时点,Western blot法检测各组细胞中c-SKI、间充质细胞标志物波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及内皮细胞标志物E-钙黏蛋白的表达。使用携带c-ski基因的慢病毒转染冠脉内皮细胞后采用RT-qPCR验证转染效率。将细胞分为4组:对照组、TGF-β1(5μg/L)组、c-ski基因感染+TGF-β1组及对照病毒感染+TGF-β1组。过表达c-SKI后,MTT实验和集落形成实验检测冠脉内皮细胞的增殖能力,Western blot检测波形蛋白、α-SMA、E-钙黏蛋白、Smad2、Smad3、p-Smad2和p-Smad3蛋白的水平。结果:TGF-β1处理冠脉内皮细胞后,c-SKI在冠脉内皮细胞中的表达呈剂量和时间依赖性下降(P<0.01)。MTT及集落形成实验结果显示,过表达c-SKI可显著抑制冠脉内皮细胞增殖(P<0.01)。Western blot检测结果显示,与病毒对照组相比,过表达c-SKI可显著下调冠脉内皮细胞中α-SMA和波形蛋白的表达量(P<0.01),上调E-钙黏蛋白的表达量(P<0.01),同时抑制Smad2和Smad3蛋白的磷酸化(P<0.01),逆转TGF-β1诱导的内皮-间充质转化。结论:内皮-间充质转化过程中c-SKI表达下调,而过表达c-SKI能够抑制冠脉内皮细胞增殖及内皮-间充质转化,其机制可能与调控TGF-β1/Smad信号通路活性有关。 展开更多
关键词 c-SKI 细胞增殖 内皮-间充质转化 TGF-Β1/SMAD信号通路 冠状动脉内皮细胞
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内皮-间充质转化在肺动脉高压发病机制中的研究进展 被引量:4
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作者 张静静 王岗 李满祥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1724-1728,共5页
Endothelial-mesenchymal transition(EndMT)is a biological process through which endothelial cells change their endothelial phenotype into a mesenchymal or myofibroblastic phenotype with the expression of mesenchymal ma... Endothelial-mesenchymal transition(EndMT)is a biological process through which endothelial cells change their endothelial phenotype into a mesenchymal or myofibroblastic phenotype with the expression of mesenchymal markers such asα-smooth muscle actin(α-SMA)and vimentin.When the pulmonary vascular endothelial cells are exposed to hypoxia and inflammatory stimulation,vascular smooth muscle cells in the outer and middle membrane accumulate through EndMT process,leading to pulmonary vascular remodeling and pulmonary arterial hypertension(PAH).Transforming growth factorβ(TGF-β)/bone morphogentic protein(BMP)signaling pathways promote EndMT process by bone morphogentic protein receptor 2(BMPR2)gene mutation which up-regulates high mobility group protein A1(HMGA1)gene and contributes to protein expression such as Slug and Snail,thus resulting in PAH.In brief,TGF-β/BMP signaling pathways and related regulators play an important role in pulmonary vascular reconstruction and the formation of PAH. 展开更多
关键词 肺动脉高压 内皮-间充质转化 Α-平滑肌肌动蛋白 TGF-β/BMP信号通路
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苦瓜蛋白对低剪切应力下apoE^(−/−)小鼠内皮-间充质转化的影响 被引量:1
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作者 张凯 刘峰涛 +4 位作者 刘亚密 陶军 夏林珍 梁伶俐 王佐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期443-449,共7页
目的:探讨苦瓜蛋白对低剪切应力内皮-间充质转化的影响,探讨其抗动脉粥样硬化作用新机制。方法:构建apoE^(−/−)小鼠颈动脉低剪切应力模型,将20只apoE^(−/−)小鼠随机分为苦瓜蛋白组和模型组,均予以高脂饮食喂养,苦瓜蛋白组腹腔注射苦瓜蛋... 目的:探讨苦瓜蛋白对低剪切应力内皮-间充质转化的影响,探讨其抗动脉粥样硬化作用新机制。方法:构建apoE^(−/−)小鼠颈动脉低剪切应力模型,将20只apoE^(−/−)小鼠随机分为苦瓜蛋白组和模型组,均予以高脂饮食喂养,苦瓜蛋白组腹腔注射苦瓜蛋白(5 mg·kg^(−1)·d^(−1)),模型组注射等体积的生理盐水。ELISA检测apoE^(−/−)小鼠血浆中炎症因子水平;Western blot和免疫荧光检测颈总动脉中内皮及间充质标志物表达和共定位情况,以及细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达水平。结果:模型组低剪切应力下内皮完整性受损,且出现了动脉粥样硬化病变和内皮-间充质转化,但均可被苦瓜蛋白可所抑制。与模型组比较,苦瓜蛋白组内皮标志物血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)表达显著上调(P<0.05),间充质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达显著下调(P<0.05)。机制研究发现,苦瓜蛋白可降低血清炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及IL-1β水平,以及黏附分子ICAM-1和VCAM-1的表达水平。结论:苦瓜蛋白能减轻低剪切应力下内皮-间充质转化,与其抑制炎症因子和黏附分子的表达有关。 展开更多
关键词 苦瓜蛋白 动脉粥样硬化 低剪切应力 内皮-间充质转化 炎症
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糖尿病肾病中表达上调miRNA在肾脏内皮-间充质转化中的调控机制研究进展 被引量:2
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作者 袁芸 胡琼英 《山东医药》 CAS 2020年第32期85-89,共5页
肾纤维化是糖尿病肾病(DKD)的主要病理特征,而内皮-间充质转化(EndMT)可引起组织和器官纤维化。近年来多项研究证实,微小RNA(miRNA)可调控EndMT,参与DKD的发生发展。在DKD中表达上调的miRNA,如miR-21、miR-214、miR-125b、miR-217、miR-... 肾纤维化是糖尿病肾病(DKD)的主要病理特征,而内皮-间充质转化(EndMT)可引起组织和器官纤维化。近年来多项研究证实,微小RNA(miRNA)可调控EndMT,参与DKD的发生发展。在DKD中表达上调的miRNA,如miR-21、miR-214、miR-125b、miR-217、miR-155、miR-433、miR-342、miR-199a等,在DKD肾纤维化病程中起到重要的调节作用,其可能依赖于经典的TGF-β信号通路或其他非典型信号通路调控EndMT。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 内皮-间充质转化 微小RNA 转化生长因子Β 肾纤维化
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TGF-β/miRNA/c-Ski在人冠脉内皮细胞中调控内皮-间充质转化的作用机制研究
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作者 韩素霞 吴晶晶 李景峰 《贵州医药》 CAS 2021年第5期679-681,共3页
目的分析TGF-β、miRNA以及c-Ski于人冠脉内皮细胞调控内皮-间充质转化(End-MT)的作用机制。方法以人冠状动脉内皮细胞为研究对象,构建基心肌纤维化细胞模型,设置空白对照组,采取0 ng/mL、1 ng/mL、2.5 g/mL及5 ng/mL几种浓度梯度TGF-β... 目的分析TGF-β、miRNA以及c-Ski于人冠脉内皮细胞调控内皮-间充质转化(End-MT)的作用机制。方法以人冠状动脉内皮细胞为研究对象,构建基心肌纤维化细胞模型,设置空白对照组,采取0 ng/mL、1 ng/mL、2.5 g/mL及5 ng/mL几种浓度梯度TGF-β1诱导冠脉内皮细胞,经慢病毒c-SKI载体传染细胞与动物,经免疫印迹法对c-SKI于End-MT细胞内的表达情况开展检测,分析过表达C-SKI对于End-MT有关分子标志物影响,结合在线软件及生物信息学分析,筛选可靶向结合c-SKI3′-UTR的microRNA,使用双荧光素酶报告验证其结合及调控关系。结果不同浓度TGF-β1组作用48 h之后,c-SKI表达呈现剂量依赖性降低,和空白对照组比较,5μg/L组c-SKI表达降低最明显(P<0.05)。和对照病毒感染+TGF-β1组比较,C-SKI基因感染+TGF-β1组冠脉内皮细胞内vimentin与a-SMA蛋白表达明显下降,E-ead蛋白表达升高(P<0.05)。和对照病毒感染+TGF-β1组比较,C-SKI基因感染+TGF-β1组p-Smad2与p-Smad3蛋白水平明显下降(P<0.05)。MiR-200a mimics转染后和对照组比较miR-200a表达明显上升(P<0.05)。1 ng/mL、2.5 g/mL及5 ng/mL浓度TGF-β1组与0 ng/mL浓度TGF-β1组对比,CD31与FSP1蛋白表达显著上升;于1 ng/mL、2.5 g/mL浓度TGF-β1组和0 ng/mL浓度TGF-β1组中,miR-200组和对照组比较,其CD31及VEcadherin蛋白表达显著上升(P<0.05),a-SMA与FSP1蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论于End-MT时C-SKI表达下调,C-SKI过表达可抑制冠脉内皮End-MT,机制可能和对TGF-β1/Smad信号通路的活性调控相关。miR-200a能抑制End-MT过程,作用机制可能和靶向抑制HMGB1对TGF-β1产生调控作用有关。 展开更多
关键词 内皮-间充质转化 冠脉内皮细胞 c-Ski TGF-Β/SMAD信号通路 MIRNA
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1-磷酸鞘氨醇抑制TGF-β诱导的人脐静脉内皮细胞间充质转化 被引量:1
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作者 汤石林 彭良善 +3 位作者 赵正亮 谭一清 颜波 王桥生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期822-826,共5页
目的:探讨1-磷酸鞘氨醇(S1P)对转化生长因子β(TGF-β)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)内皮-间充质转化(End-MT)的作用及机制。方法:根据实验分组采用TGF-β、S1P和S1P受体1(S1PR1)抑制剂VPC23019处理HUVECs。Western blot检测内皮细胞... 目的:探讨1-磷酸鞘氨醇(S1P)对转化生长因子β(TGF-β)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)内皮-间充质转化(End-MT)的作用及机制。方法:根据实验分组采用TGF-β、S1P和S1P受体1(S1PR1)抑制剂VPC23019处理HUVECs。Western blot检测内皮细胞标志物(CD31和VE-cadherin)、间充质细胞标志物(α-平滑肌肌动蛋白和成纤维细胞特异性蛋白1)、S1PR1和p-Smad3的表达;免疫荧光染色检测Smad3的核转位。结果:与TGF-β组相比,TGF-β+S1P组End-MT进程显著被抑制,Smad3磷酸化及核转位显著减少(P<0.05);而加入S1PR1抑制剂后,上述S1P的作用被逆转(P<0.05)。结论:在HUVECs中,S1P通过S1PR1抑制TGF-β诱导的End-MT,该效应可能与Smad3磷酸化及核转位水平的降低有关。 展开更多
关键词 1-磷酸鞘氨醇 转化生长因子Β SMAD3蛋白 内皮-间充质转化 人脐静脉内皮细胞
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血流剪切应力与内皮细胞命运 被引量:1
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作者 左朝艳 邱菊辉 《生理科学进展》 CAS 2023年第4期260-266,共7页
血管发育和稳态维持以及血管病理进程均依赖于血管内衬的内皮细胞(endothelial cells,ECs)。ECs与血液直接接触并受到血流剪切应力的作用,血流剪切应力通过调控ECs的发育和细胞命运等生物学过程来调节血管稳态。ECs命运转化主要包括生... 血管发育和稳态维持以及血管病理进程均依赖于血管内衬的内皮细胞(endothelial cells,ECs)。ECs与血液直接接触并受到血流剪切应力的作用,血流剪切应力通过调控ECs的发育和细胞命运等生物学过程来调节血管稳态。ECs命运转化主要包括生理条件下通过内皮-造血干细胞转化(endothelial-to-hematopoietic transition,EHT)产生造血干/祖细胞进入循环系统,以及病理条件下经内皮-间充质转化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)形成间充质细胞参与血管狭窄等,这两种命运转化的共同特点之一是细胞间黏附分子和黏附力的破坏。本文旨在概述血流剪切应力调控内皮细胞EHT和EndMT的分子机制,将提升对心血管发育和相关疾病发生机制的理解。 展开更多
关键词 内皮细胞 血流剪切应力 内皮-间充质转化 内皮-造血干细胞转化 心血管疾病
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转化生长因子β通路对血管再狭窄的影响及其机制
13
作者 骆忠辰 李鑫 +1 位作者 王伦常 舒畅 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1252-1259,共8页
转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)是血管再狭窄中重要的调控分子,在血管再狭窄的发生、发展中发挥关键作用。TGF-β是TGF-β超家族成员之一,可与TGF-β受体相结合,通过经典的依赖Smad蛋白通路或非经典通路将膜外... 转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)是血管再狭窄中重要的调控分子,在血管再狭窄的发生、发展中发挥关键作用。TGF-β是TGF-β超家族成员之一,可与TGF-β受体相结合,通过经典的依赖Smad蛋白通路或非经典通路将膜外信号转导到膜内,从而调控细胞的生长、增殖、分化和凋亡的过程。血管再狭窄至今仍是心脑及外周血管疾病中难以攻克的世界性难题之一,其发生、发展机制具有多样性和复杂性。预防术后血管再狭窄或延长血管通畅时间具有重要的临床意义。TGF-β通路在不同细胞类型中表现出多样性,探讨TGF-β在不同细胞类型中的作用及其对血管再狭窄的具体影响有助于为TGF-β与血管再狭窄的相关研究提供依据和策略。 展开更多
关键词 转化生长因子Β 血管再狭窄 血管平滑肌细胞 充质细胞 充质干细胞 内皮-间充质转化
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低氧预处理hUCMSC-Exos通过抑制肺血管EndMT缓解低氧性肺动脉高压
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作者 王玉香 刘川川 +6 位作者 张晴晴 黄攀 刘红 马有刚 王小波 王亚婷 马兰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2193-2203,共11页
目的:探讨低氧预处理人脐带间充质干细胞来源的外泌体(hUCMSC-Exos)对低氧性肺动脉高压(HPH)肺血管内皮-间充质转化(EndMT)的影响。方法:(1)用组织块贴壁法分离培养原代hUCMSCs,用超滤法提取hUCMSC-Exos并鉴定。(2)将24只SPF级雄性SD大... 目的:探讨低氧预处理人脐带间充质干细胞来源的外泌体(hUCMSC-Exos)对低氧性肺动脉高压(HPH)肺血管内皮-间充质转化(EndMT)的影响。方法:(1)用组织块贴壁法分离培养原代hUCMSCs,用超滤法提取hUCMSC-Exos并鉴定。(2)将24只SPF级雄性SD大鼠随机分为常氧(N)组、低氧(H)组、低氧+常氧hUCMSC-Exos组和低氧+低氧预处理hUCMSC-Exos组,每组6只。H组及各干预组大鼠置于模拟海拔5000 m低氧环境的低压氧舱中,并于低氧第3、5、7、10和14天经尾静脉注射常氧hUCMSC-Exos、低氧预处理hUCMSC-Exos或等体积PBS。造模21 d后检测各组大鼠右心室收缩压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI),HE染色观察肺组织病理改变。(3)将人肺小动脉内皮细胞(HPAECs)饥饿12 h后随机分为常氧对照(N-Con)组、低氧模型(H-Con)组、低氧+常氧hUCMSC-Exos组和低氧+低氧预处理hUCMSC-Exos组。Transwell实验和小管形成实验检测HPAECs迁移和小管形成能力;免疫荧光双染法检测HPAECs中CD31和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;Western blot法检测肺血管和HPAECs中CD31、VE-cadherin、α-SMA和vimentin蛋白水平。结果:(1)低氧21 d可成功构建HPH大鼠模型,且肺血管发生EndMT。与N组相比,H组大鼠RVSP、RVHI、血管壁面积占血管总面积的百分率(WA%)和血管壁厚度占血管外径的百分率(WT%)显著升高(P<0.01),肺血管管壁增厚,且肺血管中CD31和VE-cadherin蛋白表达显著减少(P<0.01),α-SMA和vimentin蛋白表达显著增加(P<0.05或P<0.01)。与H组相比,经常氧或低氧预处理hUCMSC-Exos干预后大鼠RVSP、RVHI、WA%和WT%显著降低(P<0.05或P<0.01),肺血管重构减轻,且低氧预处理hUCMSC-Exos显著抑制HPH肺血管重构和EndMT的形成。(2)低氧处理HPAECs 48 h可诱导细胞发生迁移、小管形成和End-MT。与H-Con组相比,经低氧预处理hUCMSC-Exos干预后细胞迁移和小管形成显著减少(P<0.01),CD31和VE-cadherin蛋白表达显著增多(P<0.05或P<0.01),α-SMA和vimentin蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论:低氧预处理hUCMSC-Exos通过抑制肺血管EndMT而缓解HPH肺血管重塑。 展开更多
关键词 低氧预处理 人脐带充质干细胞 外泌体 低氧性肺动脉高压 内皮-间充质转化
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大鼠急性心肌梗死后NLRP3炎性体-IL-1β信号轴激活与End-MT的关系 被引量:8
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作者 汤石林 刘一剑 +3 位作者 彭良善 赵正亮 谭一清 王桥生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1935-1939,共5页
目的:研究在急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)引发的心肌纤维化过程中,NLRP3炎性体-IL-1β信号轴的激活与内皮-间充质转化(endothelial-mesenchymal transition,End-MT)是否存在同一性。方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为... 目的:研究在急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)引发的心肌纤维化过程中,NLRP3炎性体-IL-1β信号轴的激活与内皮-间充质转化(endothelial-mesenchymal transition,End-MT)是否存在同一性。方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=15)与AMI组(n=15),术后28 d采用Masson染色检测心肌纤维化水平;Western blot检测NLRP3炎性体(NLRP3、ASC、pro-caspase-1和caspase-1)、内皮细胞标志物(CD31和VE-cadherin)及间充质细胞标志物(α-SMA和FSP1)的表达;酶联免疫吸附法检测NLRP3炎性体下游因子IL-1β的表达。结果:与假手术组相比,冠脉结扎组AMI大鼠心肌纤维化水平、End-MT进展程度、NLRP3炎性体活性及caspase-1和IL-1β的表达均显著增加(P<0.05)。结论:NLRP3炎性体-IL-1β信号轴的激活与End-MT进程具有显著同一性,提示NLRP3炎性体-IL-1β作为激活End-MT的潜在靶点将为研究AMI后心肌纤维化及心力衰竭提供新的理论依据。 展开更多
关键词 NLRP3炎性体 白细胞介素1Β 内皮-间充质转化 急性心肌梗死
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TGF-β/Smads通路参与EndoMT在HHPH中的作用及益气温阳活血化痰方的干预效应 被引量:2
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作者 张聪聪 张晶晶 +3 位作者 武垣伶 戴雍月 钱小英 王万铁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期507-514,共8页
目的:探讨转化生长因子β(TGF-β)/Smads信号通路与低氧高二氧化碳性肺动脉高压(HHPH)中肺动脉内皮-间充质转化(Endo MT)的关系及益气温阳活血化痰方的调控作用。方法:取健康雄性清洁级SD大鼠为研究对象,随机分为5组:常氧对照(N)组、低... 目的:探讨转化生长因子β(TGF-β)/Smads信号通路与低氧高二氧化碳性肺动脉高压(HHPH)中肺动脉内皮-间充质转化(Endo MT)的关系及益气温阳活血化痰方的调控作用。方法:取健康雄性清洁级SD大鼠为研究对象,随机分为5组:常氧对照(N)组、低氧高二氧化碳(HH)组及益气温阳活血化痰方高剂量(YH)组、中剂量(YM)组和低剂量(YL)组。N组置于常氧环境下饲养,其余4组置于低氧高二氧化碳(9%~11%O2和5%~6%CO2)环境下饲养4周。各中药组在放入氧舱前以相同体积不同浓度的益气温阳活血化痰方灌胃,YH、YM和YL组浓度分别为200 g/L、100 g/L和50 g/L。术中测平均肺动脉压和平均颈动脉压,术毕取右心室游离壁及左心室加心室间隔称重,以此计算右心室肥大指数。HE染色和免疫荧光法观察肺组织形态学的变化,采用RT-PCR和Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CD31、TGF-β1和Smad2/3的m RNA和蛋白表达以及p-Smad2/3的蛋白水平。结果:与N组比,其余4组肺动脉平均压、α-SMA、TGF-β1和Smad2/3的m RNA和蛋白表达以及pSmad2/3的蛋白水平上升,CD31 m RNA和蛋白表达水平降低,镜下观察到组织形态学损伤;与HH组比,YH、YM和YL组肺动脉平均压、α-SMA、TGF-β1和Smad2/3的m RNA和蛋白表达以及p-Smad2/3的蛋白水平下降,CD31m RNA和蛋白表达水平上升,肺组织形态学的损伤显著减轻。结论:在HHPH中,TGF-β/Smads通路可能参与了Endo MT;益气温阳活血化痰方可通过抑制TGF-β/Smads通路的表达降低肺动脉高压。 展开更多
关键词 低氧高二氧化碳性肺动脉高压 TGF-β/Smads信号通路 内皮-间充质转化 益气温阳活血化痰方
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SIRT3缺陷对脓毒症心肌损伤的影响及作用机制
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作者 徐天华 刘鹏昊 崔德荣 《医学研究杂志》 2024年第3期55-61,共7页
目的探讨SIRT3缺陷对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的脓毒症心肌损伤的影响及作用机制。方法通过对SIRT3基因敲除(SIRT3^(-/-))小鼠及野生型(wild type,WT)小鼠进行LPS(10mg/kg)腹腔注射24h制备脓毒症心肌损伤模型,等体积0.9%氯... 目的探讨SIRT3缺陷对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的脓毒症心肌损伤的影响及作用机制。方法通过对SIRT3基因敲除(SIRT3^(-/-))小鼠及野生型(wild type,WT)小鼠进行LPS(10mg/kg)腹腔注射24h制备脓毒症心肌损伤模型,等体积0.9%氯化钠溶液(normal saline,NS)腹腔注射作为对照,设立WT-NS组、WT-LPS组、SIRT3^(-/-)-LPS组、SIRT3^(-/-)-NS组。通过对人心脏微血管内皮细胞进行LPS(10μg/ml)刺激24h制备细胞损伤模型。正常培养作为对照,使用SIRT3过表达慢病毒及阴性对照病毒进行细胞转染,设立对照组、LPS组、LPS+SIRT3过表达组、阴性对照病毒组。采用心脏超声检测各组小鼠收缩末期及舒张末期左心室后壁厚度、左心室舒张末期容积。天狼星红染色检测各组心脏组织的胶原蛋白含量。免疫荧光法观察各组心脏微血管中内皮-间充质转化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)标志蛋白:血小板-内皮细胞黏附分子(platelet-endothelial cell adhesion molecule,CD31)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达情况。采用Western blot法检测CD31、α-SMA、SIRT3蛋白和自噬相关蛋白LC3、p62的表达情况。结果心脏超声发现,SIRT3^(-/-)-LPS组左心室舒张末期容积、收缩末期及舒张末期左心室后壁厚度均增加(P<0.001)。天狼星红染色结果表明,SIRT3缺陷可显著提升LPS诱导的脓毒症小鼠心脏组织的胶原蛋白含量(P<0.001)。LPS可诱导小鼠心脏微血管内皮细胞发生EndMT,而SIRT3缺陷会加重这一变化(P<0.05)。LPS可诱导小鼠心脏组织自噬水平应激性升高,而SIRT3缺陷会降低自噬水平(P<0.05)。体外实验同样证实了LPS诱导人心脏微血管内皮细胞自噬应激性增强(P<0.001),此时SIRT3蛋白表达下降伴随着EndMT的发生(P<0.05),而SIRT3过表达明显减轻了EndMT的程度(P<0.001),自噬水平进一步增加(P<0.05)。结论SIRT3缺陷能加重LPS诱导的脓毒症小鼠心脏舒张功能障碍及纤维化程度,其机制可能与其降低心脏组织自噬水平,促进心脏微血管内皮细胞发生EndMT有关。 展开更多
关键词 脓毒症 心肌损伤 心脏纤维化 内皮-间充质转化 SIRT3
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BMP-7/Smads通路参与EndoMT在大鼠HHPH中的作用 被引量:1
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作者 张晶晶 武垣伶 +5 位作者 黄丹娜 高慧 楼国强 周卓琳 Lingfang SHI 王万铁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期316-322,共7页
目的:探讨骨形态发生蛋白(BMP)-7/Smads通路参与的内皮-间充质转化(EndoMT)在大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压(HHPH)中的作用。方法:将大鼠肺动脉内皮细胞(RPAECs)分为常氧对照(Con)组、低氧高二氧化碳(HH)组、BMP受体激动剂rhBMP-7组、... 目的:探讨骨形态发生蛋白(BMP)-7/Smads通路参与的内皮-间充质转化(EndoMT)在大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压(HHPH)中的作用。方法:将大鼠肺动脉内皮细胞(RPAECs)分为常氧对照(Con)组、低氧高二氧化碳(HH)组、BMP受体激动剂rhBMP-7组、BMP受体抑制剂DMH-1组和溶剂DMSO组。各组给予相应的药物后,Con组置于常氧培养箱中培养,其余4组置于低氧高二氧化碳培养箱中培养。采用免疫荧光标记法观察细胞CD31和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;RT-PCR和Western blot法分别检测各组细胞α-SMA、CD31和Smad1/5/8的mRNA和蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞活力;Transwell小室法检测细胞的迁移水平。结果:与Con组相比,HH组α-SMA的mRNA和蛋白表达水平升高,而CD31的mRNA和蛋白表达水平、Smad1/5/8的mRNA和p-Smad1/5/8的蛋白表达水平降低,同时细胞活力降低而迁移增多(P<0.05)。与HH组相比,rhBMP-7组α-SMA的mRNA和蛋白表达水平降低,而CD31的mRNA和蛋白表达水平、Smad1/5/8的mRNA和p-Smad1/5/8的蛋白表达水平升高,同时细胞活力升高而迁移减少(P<0.05)。与rhBMP-7组相比,DMH-1组α-SMA的mRNA和蛋白表达水平升高,而CD31的mRNA和蛋白表达水平及Smad1/5/8的mRNA和p-Smad1/5/8的蛋白表达水平降低,同时细胞活力降低而迁移增多(P<0.05)。结论:低氧高二氧化碳可促进RPAECs发生EndoMT,从而促进HHPH的发展,其机制可能与抑制BMP-7/Smads通路有关。 展开更多
关键词 BMP-7/Smads通路 内皮-间充质转化 低氧高二氧化碳性肺动脉高压 肺动脉内皮细胞
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过表达c-SKI抑制异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌纤维化 被引量:3
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作者 张颖 向燕 +1 位作者 张岳 王娟 《基础医学与临床》 2021年第3期364-369,共6页
目的探讨原癌基因c-SKI在异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌纤维化中的作用及机制。方法将小鼠分为对照组(control组)、模型组(model组)、c-SKI基因感染模型组(LV-SKI组)及对照病毒感染模型组(LV-NC组),每组10只。模型组采用皮下注射ISO ... 目的探讨原癌基因c-SKI在异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌纤维化中的作用及机制。方法将小鼠分为对照组(control组)、模型组(model组)、c-SKI基因感染模型组(LV-SKI组)及对照病毒感染模型组(LV-NC组),每组10只。模型组采用皮下注射ISO 30 d,首次剂量为5 mg/kg,后续以2.5 mg/kg。2周后LV-SKI组和LV-NC组于18、21、24、27和30 d分别尾静脉注射c-SKI慢病毒和对照病毒,剂量均为100μL,滴度1×108 TU。HE染色和Masson染色观察心肌组织病理学;ELISA检测心肌组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白含量;Western blot检测c-SKI、间质细胞标志物波形蛋白(vimentin)、α-SMA、内皮细胞标志物CD31以及转录因子Snail、Twist及Slug的表达。结果与对照组相比,模型组小鼠心肌纤维组织中c-SKI的表达呈时间依赖性下降(P<0.01);模型组心肌细胞排列紊乱,间质显著增多,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白含量增加(P<0.01);心肌组织vimentin、α-SMA、Snail、Twist及Slug表达均上调,CD31蛋白表达下调(P<0.05)。过表达c-SKI后,与LV-NC组比较,小鼠心肌结构趋于整齐,间质胶原纤维减少,心肌组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白减少(P<0.01);Vimentin、α-SMA蛋白的表达下调(P<0.05);CD31蛋白的表达上调(P<0.05);同时转录因子Snail、Twist和Slug蛋白的表达也随之下调(P<0.01)。结论小鼠心肌纤维化进程中c-SKI表达下调,而过表达c-SKI能够通过抑制内皮-间充质转化(End-MT)改善ISO诱导的心肌纤维化。 展开更多
关键词 c-SKI 心肌纤维化 内皮-间充质转化(End-MT) 转录因子
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温阳化浊通络方抑制系统性硬化病EndoMT的机制研究
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作者 李凯 王倩 +1 位作者 段培培 卞华 《南阳理工学院学报》 2023年第6期118-122,128,共6页
目的:研究温阳化浊通络方抑制系统性硬化病(Systemic sclerosis,SSc)肺血管内皮细胞内皮-间充质转化(Endothelium-mesenchymal transformation,EndoMT)的效应和潜在分子机制。方法:利用博来霉素构建SSc小鼠模型,然后分别利用温阳化浊通... 目的:研究温阳化浊通络方抑制系统性硬化病(Systemic sclerosis,SSc)肺血管内皮细胞内皮-间充质转化(Endothelium-mesenchymal transformation,EndoMT)的效应和潜在分子机制。方法:利用博来霉素构建SSc小鼠模型,然后分别利用温阳化浊通络方或HIF-1α抑制剂KC7F2处理。采用masson染色观察小鼠肺组织纤维化程度。采用免疫组化检测小鼠肺组织和细胞中HIF-1α、Foxm1、smad3、VE-Cadherin、vimentin的蛋白表达水平。结果:在SSc小鼠模型中,温阳化浊通络方和KC7F2能够显著抑制小鼠肺组织的纤维化,并且下调肺组织中HIF-1α、Foxm1、smad3、vimentin的蛋白表达水平(P<0.05),同时上调VE-cadherin的蛋白表达水平(P<0.05)。结论:温阳化浊通络方能够抑制SSc肺血管内皮细胞EndoMT,其分子机制与其抑制HIF-1α/Foxm1/Smad3信号通路有关。 展开更多
关键词 温阳化浊通络方 系统性硬化病 HIF-1α/Foxm1/Smad信号通路 内皮-间充质转化
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