创伤后应激障碍状态下脊髓谷氨酸转运体-1调控内脏高敏感性-痛觉敏化的作用及其机制研究

目的 探讨在创伤后应激障碍（PTSD）状态下脊髓谷氨酸转运体-1（GLT-1）表达的改变及GLT-1激动剂头孢曲松钠（CTX）抗内脏伤害性刺激的作用.方法 SD大鼠分为5组：生理盐水对照组、PTSD内脏高敏感模型组、CTX预处理组、PTSD＋CTX组及PTSD＋CTX＋二氢卡因酸盐（DHK）组.每组7只鼠用于内脏敏感性测定,均最终完成试验;每组10只鼠用于GLT-1免疫荧光检测,最终分别有8、9、8、10、7只完成试验.采用腹腔注射卵清蛋白（OVA）基础致敏联合连续单一应激（SPS）建立PTSD内脏高敏感大鼠模型;建模后7d采用结直肠扩张（CRD）-内脏运动反射（VMR）评估PTSD状态下内脏敏感性改变;采用CTX选择性诱发编码GLT-1的基因转录及上调GLT-1的表达;采用免疫荧光及激光共聚焦显微技术研究脊髓GLT-1蛋白表达水平的变化.结果 与正常对照组比较,CTX组大鼠脊髓背角GLT-1表达水平较高,吸光度（A）值显著高于正常对照组（141.38±2.91比106.25±3.32,P=0.001）,而PTSD组则明显低于正常对照组（86.11±2.73比106.25±3.32,P=0.001）;PTSD＋ CTX组GLT-1的表达亦高于PTSD组（98.70±3.19比86.11±2.73,P=0.004）.在20、40、60、80 mmHg（1 mmHg =0.133 kPa）压力下行CRD,术后7 d PTSD组在各压力水平下的VMR曲线下面积（AUCVMR）均显著高于正常对照组（P值均＜0.05）;PTSD＋ CTX组在各压力水平的AUCVMR明显低于PTSD组（P值均＜0.01）;在80 mmHg行伤害性内脏刺激时,GLT-1抑制剂DHK可逆转CTX的抗伤害刺激效应（P =0.002）.在40、60、80 mmHg下行CRD时,CTX组的AUCvMR明显低于正常对照组（P值均＜0.05）.结论 腹腔注射OVA基础致敏联合SPS可成功建立PTSD内脏高敏感大鼠模型.在PTSD内脏高敏感状态下,CTX可通过上调脊髓GLT-1的表达发挥抗内脏伤害性刺激的作用,可能成为防止或抑制PTSD状态下内脏高敏感性-痛觉敏化新的靶点之一.

肠吉泰对腹泻型肠易激综合征大鼠CRH、SPmRNA表达的影响

目的观察肠吉泰对腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证模型大鼠促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、P物质(SP)mRNA表达的影响,探讨其治疗机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,肠吉泰低、中、高剂量组和匹维溴铵(得舒特)组。除正常组外,各组大鼠予束缚应激加大黄泻下及结直肠扩张法复制模型,并予以相应药物治疗。大鼠处死后剖取小肠,测量小肠墨汁推进率;取下丘脑及结肠标本用RT-PCR半定量检测CRH mRNA及SP mRNA的表达。结果与正常组比较,各组造模大鼠的下丘脑CRH、SPmRNA表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,除肠吉泰低剂量组大鼠下丘脑的SP mRNA表达差异无统计学意义外(P>0.05),其余各治疗组大鼠CRH、SPmRNA表达下调(P<0.05,P<0.01);与得舒特组比较,肠吉泰高、中剂量组大鼠结肠SP mRNA降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,各治疗组大鼠的大便频次显著降低、大便性状明显改善(P<0.05),小肠推进率降低(P<0.05),且肠吉泰与得舒特组大鼠大便频次、大便性状及小肠墨汁推进率差异无统计学意义(P>0.05)。结论肠吉泰对于腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证模型大鼠具有改善应激状态、调节肠动力、解除内脏高敏感性等治疗作用。推测肠吉泰通过调节大鼠下丘脑CRH、SP mRNA表达及结肠SP mRNA表达,改善腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证模型大鼠对束缚应激反应导致肠动力的紊乱,改善内脏痛觉敏感状态。