HDAC3抑制剂RGFP966通过下调TGF-β1/SMAD3/STAT-1信号通路抑制AIM2炎症小体活化和EMT缓解子宫内膜纤维化

目的探讨HDAC3抑制剂RGFP966缓解子宫内膜纤维化的分子机制。方法将18只6~8周雌性SD大鼠随机分为3组,Control组、IUA模型组(即宫内粘连大鼠模型组)、RGFP966治疗组(IUA模型组给予HDAC3抑制剂RGFP966治疗),每组6只。建立IUA大鼠模型。ELISA测定大鼠血清炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平。qPCR法测定大鼠子宫内膜组织上皮间质转化标志物E-cadherin、N-cadherin、α-SMA、Vimentin mRNA相对表达水平。蛋白质印迹法测定大鼠子宫内膜组织TGF-β1、SMAD3、p-STAT-1、STAT-1、AIM2、IL-18、cleaved-IL-1β、IL-1β的表达水平。结果与Control组相比,IUA模型组大鼠子宫角壁变薄,血清炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高(P<0.05);E-cadherin mRNA相对表达水平降低,N-cadherin、α-SMA、Vimentin mRNA相对表达水平升高(P<0.05);TGF-β1、SMAD3、p-STAT-1蛋白质表达水平增强(P<0.05);AIM2、IL-18、cleaved-IL-1β的表达水平增强(P<0.05)。与IUA模型组相比,RGFP966治疗组部分逆转(P<0.05)了上述指标。STAT-1和IL-1β的表达水平在上述3个分组中无明显差异(P>0.05)。结论HDAC3的抑制剂RGFP966可通过下调TGF-β1/SMAD3/STAT-1信号通路抑制AIM2炎症小体和EMT,缓解子宫内膜纤维化。

家畜子宫内膜纤维化的细胞分子机制研究进展

子宫内膜纤维化是子宫内膜受到持续损伤刺激导致其修复障碍引发的,以细胞外基质过度沉积为特征,可能导致子宫内膜结构破坏和功能障碍甚至衰竭,影响家畜繁殖力和生殖质量。因此,解析子宫内膜纤维化的形成机制对提高家畜繁殖力具有一定意义。本文阐述了纤维化发生的触发因素,形成的细胞分子机制及细胞代谢调节与细胞外基质之间的关系,并探讨了纤维化的治疗策略和未来研究方向,旨在为家畜子宫内膜纤维化的研究提供参考。

祛瘀消膜汤联合温针灸对药物流产不全刮宫术后宫腔粘连、内膜纤维化及血清sFIt-1、BNIP3的影响

目的:观察祛瘀消膜汤联合温针灸对药物流产不全刮宫术后宫腔粘连、内膜纤维化及血清Bcl2相互作用蛋白3(BNIP3)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)的影响。方法:选择2020年1月至2023年5月该院收治的药物流产不全患者96例,分组方式为随机数字表法。所有患者均给予刮宫术后常规治疗,对照组48例患者在刮宫术后给予温针灸治疗,联合组48例患者在对照组的基础上给予祛瘀消膜汤治疗。比较两组患者的临床疗效、治疗前后中医证候评分,记录腹痛持续时间、阴道出血时间和月经复潮时间,通过宫腔镜检查观察治疗后宫腔粘连发生率,检测治疗前后的血清sFIt-1、BNIP3、黄体生成素(LH)、雌激素(E2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,通过逆转录聚合酶链反应检测子宫内膜组织基质金属蛋白酶9(MMP9)、转化生长因子β3(TGF-β3)mRNA表达水平。结果:联合组患者的总有效率为97.92%(47/48),较对照组的83.33%(40/48)更高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,联合组患者产后恶露淋漓涩滞不爽、小腹疼痛拒按、淋漓量少、色紫黯有块、脉弦涩或沉而有力、舌紫黯或边有紫点评分较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。联合组患者腹痛持续时间、阴道出血时间和月经复潮时间短于对照组,宫腔粘连发生率低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,联合组患者的E2水平高于对照组,LH、TNF-α水平低于对照组,BNIP3、sFlt-1水平高于对照组,MMP9、TGF-β3 mRNA表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:祛瘀消膜汤联合温针灸治疗药物流产不全刮宫术后患者,可调节性激素水平,改善炎症状态,提高BNIP3、sFlt-1水平,改善子宫内膜纤维化,提升宫腔抗粘连作用,缓解病情,提高临床疗效。

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨子宫内膜来源间充质干细胞抑制子宫内膜纤维化的机制

目的探讨Wnt/β-catenin信号通路介导间质上皮转化(EMT)在子宫内膜来源间充质干细胞(eMSCs)抑制子宫内膜纤维化中的作用机制。方法将18只雌性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(Model)组和eMSCs组,每组6只。Sham组的大鼠在剖腹手术后不接受任何形式的子宫介入手术。Model组和eMSCs组建立子宫内粘连大鼠模型。eMSCs组在模型损伤后立即移植eMSCs细胞悬液进行治疗,总量为每子宫0.05 ml(2×107细胞/ml)。3周后收集单侧损伤子宫进行苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色。通过蛋白质印迹分析子宫内膜纤维化、EMT、Wnt/β-catenin通路蛋白表达。结果Model组大鼠宫腔结构破坏,腺体数量明显减少并积聚大量蓝色胶原纤维,但在eMSCs治疗后子宫内膜腺体数量显著增加,并且纤维化面积显著降低。与Sham组相比,Model组中I型胶原和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白的表达水平显著增加(P<0.05),但在eMSCs组中均显著减少(P<0.05)。在Model组中,N-cadherin、Vimentin和ZEB1的表达显著增加,而E-cadherin的表达减少。然而,在eMSCs组中,上述分子蛋白质的变化完全相反。与Sham组相比,Model组β-连环蛋白(β-catenin)和C-myc表达增加(P<0.05)。与Model组相比,eMSCs组中周期蛋白E(CyclinE)、β-catenin和C-myc表达增加(P<0.05)。结论eMSCs可以通过抑制EMT和子宫内膜纤维化来促进子宫内粘连大鼠子宫内膜修复,这种作用部分是通过激活Wnt/β-catenin信号通路来实现。

复原膏治疗人工流产术后肾虚血瘀型患者的疗效及其对子宫内膜纤维化的影响

目的探讨复原膏治疗人工流产术后肾虚血瘀型患者的疗效及其对子宫内膜纤维化和子宫情况的影响。方法选取2022年1月至2023年1月河北省沧州中西医结合医院收治的120例人工流产术后诊断为肾虚血瘀型患者作为研究对象。随机分为观察组和对照组,每组60例。对照组仅接受常规西药治疗,观察组在常规西药治疗的基础上口服复原膏治疗。比较两组的临床疗效、子宫内膜纤维化指标水平(子宫内膜厚度、子宫内膜积分、子宫内膜血管密度)、经阴道彩色多普勒超声检查结果(阻力指数、脉冲指数、收缩期末速度/最大收缩速度比值)、中医症状评分、肾虚血瘀证评分、月经恢复情况。结果观察组总有效率显著高于对照组(P<0.05)。观察组治疗后子宫内膜厚度、子宫内膜积分、子宫内膜血管密度均显著高于对照组,阻力指数、脉冲指数、收缩期末速度/最大收缩速度比值均显著低于对照组,中医症状评分和肾虚血瘀证评分均显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后的月经恢复正常率显著高于对照组(P<0.05)。结论复原膏能够有效治疗人工流产术后肾虚血瘀型患者,抑制子宫内膜纤维化,改善子宫情况,促进月经恢复。

基于TGF-β1/Smad通路探究补肾化瘀方对宫腔粘连大鼠子宫内膜纤维化的作用及机制

目的:观察补肾化瘀方对宫腔粘连(IUA)大鼠子宫内膜纤维化的改善作用,探究其作用机制。方法:采取机械+感染双重损伤法建立IUA大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型组、补肾化瘀方组、补肾化瘀方+SRI-011381组、SRI-011381组,每组15只。另取15只大鼠作为假手术组。药物治疗21 d后,观察大鼠子宫形态,HE染色观察子宫组织病理变化,计数子宫内膜腺体数量,Masson染色观察纤维化情况,ELISA试剂盒检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的水平,qRT-PCR检测子宫组织转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA、Smad3 mRNA、Smad4 mRNA和Smad7 mRNA表达水平,Western blotting法测定TGF-β1、Smad3、Smad4、Smad7、p-Smad3、p-Smad4、p-Smad7水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠子宫组织增粗,腺体数量减少,纤维化面积增加,血清炎症因子水平升高,TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA、Smad4 mRNA表达及Smad3、Smad4磷酸化增加,Smad7 mRNA表达及磷酸化减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,补肾化瘀方组大鼠子宫腺体数量增加,纤维化面积减少,血清炎症因子水平降低,TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA、Smad4 mRNA表达及Smad3、Smad4磷酸化减少,Smad7 mRNA表达及磷酸化增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。SRI-011381可抑制补肾化瘀方的作用,促进纤维化,进一步激活TGF-β1/Smad通路(P<0.05)。结论:补肾化瘀方对IUA大鼠子宫内膜纤维化有改善作用,其机制可能与调节TGF-β1/Smad通路有关。

生长激素和全反式维甲酸拮抗子宫内膜纤维化的机制

目的 探讨生长激素(GH)和全反式维甲酸(ATRA)拮抗子宫内膜纤维化的机制。方法 选取新鲜子宫内膜组织进行原代人子宫内膜基质细胞(ESCs)培养。实验细胞分别设立正常组、模型组、GH实验组、ATRA实验组。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定细胞骨桥蛋白(OPN)、整合素αγβ3(Itgαγβ3)、Ⅰ型胶原α1(COL1A1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达水平,用免疫蛋白印迹试验(Western blot)测定细胞中OPN、Itgαγβ3、COL1A1、α-SMA 蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组中细胞的Itgαγβ3和OPN mRNA水平降低( P <0.05);与模型组比较,GH实验组细胞的OPN、Itgαγβ mRNA表达水平增加( P <0.05),且与正常组比较,差异无统计学意义( P >0.05)。与正常组比较,模型组COL1A1、α-SMA mRNA的表达量显著增加( P <0.05);与模型组比较,ATRA实验组中细胞COL1A1、α-SMA mRNA的表达量减少( P <0.05),且与正常组比较,差异无统计学意义( P >0.05)。与正常组比较,模型组中细胞OPN、Itgαγβ3蛋白水平降低( P <0.05);与模型组比较,GH实验组细胞中OPN、Itgαγβ蛋白表达水平增加( P <0.05),且与正常组比较,差异无统计学意义( P >0.05)。与正常组比较,模型组中COL1A1、α-SMA蛋白的表达水平增加,与模型组比较,ATRA实验组中细胞COL1A1、α-SMA蛋白的表达水平下调( P <0.05),且与正常组比较,差异无统计学意义( P > 0.05)。结论 GH和ATRA可分别通过促进OPN、Itgαγβ3 mRNA的表达及抑制COL1A1、α-SMA mRNA的表达来拮抗子宫内膜纤维化。

榆栀止血颗粒减轻宫腔粘连大鼠子宫内膜纤维化

目的探讨榆栀止血颗粒对宫腔粘连大鼠基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)轴及内膜纤维化的影响。方法将大鼠随机分成假手术组、模型组(建立宫腔粘连大鼠模型)、榆栀止血颗粒低、中、高剂量组,分别灌胃给予30、60和120 mg/kg,1次/d,连续21 d。末次灌胃24 h后,试剂盒检测血清中白介素6(IL-6),肿瘤坏死因子α(TNF-α),转化生长因子β1(TGF-β1)水平;HE染色和Masson染色检测大鼠子宫内膜腺体数量和间质纤维化程度;蛋白免疫印迹法检测SDF-1、CXCR4蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠子宫组织结构破坏,腺体数量减少,纤维化增生,可见大量炎性细胞浸润,血清IL-6、TNF-α、TGF-β1水平显著升高(P<0.05),子宫组织中SDF-1蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组相比,榆栀止血颗粒低、中、高剂量组的腺体数量依次增多,纤维化程度减弱,炎性细胞减少,血清中IL-6、TNF-α、TGF-β1水平显著降低(P<0.05),子宫中SDF-1蛋白表达显著降低(P<0.05),且均呈剂量依赖性。结论榆栀止血颗粒可能通过抑制SDF-1/CXCR4轴,修复宫腔粘连大鼠子宫结构,缓解组织纤维化,减轻炎性反应。

丹白颗粒对宫腔粘连大鼠TGF-β/Smad信号通路及内膜纤维化的影响

目的:探讨丹白颗粒对宫腔粘连(IUA)大鼠子宫内膜纤维化的影响及其可能机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组(15只)和模型组(65只),通过机械性刮除及感染性损伤手术进行大鼠IUA模型构建,假手术组仅进行开腹及子宫缝合手术,将构建成功的60只大鼠分为模型组、丹白颗粒低剂量组(2.5g/kg)、丹白颗粒中剂量组(5.0g/kg)、丹白颗粒高剂量组(10.0g/kg),每组15只,造模成功后24h开始给药,丹白颗粒低中高剂量组按剂量灌胃给药,假手术组与模型组以等量生理盐水灌胃,灌胃时间为上午7∶00至10∶00,持续灌胃24d;末次给药24h后,采集大鼠子宫组织,测定大鼠子宫通透性及AFS评分,以苏木精-伊红染色(HE)检测各组大鼠子宫组织病理变化、内膜厚度、腺体数量;以Masson染色检测大鼠子宫内膜纤维化程度;以酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测大鼠子宫组织胶原含量;以蛋白免疫印迹法(Western blot)检测子宫内膜转化生长因子1(TGF-β1)/Smad通路蛋白表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠宫腔消失、腔壁组织呈现粘连状态,大鼠子宫内膜厚度及腺体数量显著降低,子宫通畅性评分、AFS评分、子宫不可溶性胶原含量、子宫内膜纤维化面积显著升高,子宫内膜TGF-β1、Smad3蛋白表达水平明显升高,Smad7蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,丹白颗粒低、中、高剂量组大鼠子宫内膜厚度、腺体数量有一定的回升,子宫通畅性、子宫内膜纤维化程度得到缓解,不可溶性胶原含量显著降低,TGF-β1、Smad3蛋白表达水平呈降低趋势,Smad7蛋白表达水平呈升高趋势(P<0.05),且呈现一定的剂量效应关系。结论:丹白颗粒可有效缓解IUA大鼠子宫内膜纤维化程度,可能与抑制TGF-β/Smad通路有关。

β-氨基丙腈抑制机械刮宫后大鼠子宫内膜纤维化的研究

目的研究β-氨基丙腈在抑制大鼠子宫内膜损伤后纤维化中的作用及最佳使用剂量。方法将54只8周龄Wistar大鼠随机分为正常组(6只)、对照组(12只)和实验组(36只);对照组大鼠刮宫后自然愈合,实验组大鼠刮宫后立即开始每天注射β-氨基丙腈并根据注射剂量分为100mg/kg/d、200mg/kg/d、300mg/kg/d三个剂量组;对照组和实验组的各剂量组分别于刮宫后72h和7d各处死6只大鼠。获取的大鼠子宫标本进行形态学、病理学、组织化学及胶原检测。结果实验组大鼠子宫大体形态学接近正常组;HE染色和Masson染色观察结果显示,与相同时间点对照组相比,实验组三个剂量组子宫内膜增厚且腺体数量增多,内膜基质纤维化程度低,但7d时300mg/kg/d剂量组内膜腺体数量减少,腺腔狭小。子宫搔刮损伤后72h和7d时,不可溶胶原纤维含量在对照组中均显著高于正常组(P<0.01),实验组均显著低于对照组(P<0.01),且200mg/kg/d剂量组低于100mg/kg/d剂量组(P<0.05),但与300mg/kg/d剂量组无显著差异(P>0.05);可溶性胶原含量在对照组和300mg/kg剂量组中均高于正常组(P<0.05),其他各组间无统计学差异(P>0.05)。结论β-氨基丙腈可以有效抑制Wistar大鼠子宫内膜纤维化,200mg/kg/d给药量对机械刮宫后大鼠子宫内膜纤维化的抑制效果最佳,该研究为子宫内膜纤维化的发生机制和治疗方法研究奠定基础。

生长激素与全反式维甲酸缓解大鼠子宫内膜纤维化的分子机制的比较研究

目的探讨与比较生长激素与全反式维甲酸缓解大鼠子宫内膜纤维化的分子机制。方法共选择40只无特定病原体(SPF)级雌性Wistar大鼠为研究对象,采用刮宫手术建立子宫内膜纤维化模型。将建模成功的36只宫腔粘连大鼠随机平分为3组-模型组、生长激素组与全反式维甲酸组,每组各12只。模型组、生长激素组与全反式维甲酸组分别给予腹腔注射0.9%氯化钠溶液、生长激素(1 mg/kg)与全反式维甲酸(1 mg/kg)治疗,1次/d连续给药,持续14 d。制备子宫组织石蜡切片病理,测定与记录子宫内膜腺体与子宫内膜厚度;放射免疫法检测血清性激素(雌二醇、孕酮)水平;蛋白质印迹法检测子宫组织中转化生长因子β1(TGF-β1)及其受体蛋白smad 4的表达。结果治疗第7天与治疗第14天,生长激素组与全反式维甲酸组的子宫内膜腺体计数高于模型组,子宫内膜纤维化面积低于模型组,而与生长激素组相比,全反式维甲酸组子宫内膜腺体计数显著增加,子宫内膜纤维化面积显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗第7天与治疗第14天,生长激素组与全反式维甲酸组的血清孕酮水平低于模型组,全反式维甲酸组低于生长激素组,差异均有统计学意义(P<0.05);3组不同时间点的血清雌二醇水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗第7天与治疗第14天,生长激素组与全反式维甲酸组的子宫组织TGF-β1、smad 4蛋白相对表达水平低于模型组,全反式维甲酸组低于生长激素组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论相对于生长激素,全反式维甲酸可更有效下调宫腔粘连形成过程中异常活化的TGF-β1/smad 4信号通路,调节性激素的表达,减轻子宫内膜纤维化程度,从而缓解宫腔粘连形成。

Wnt/β-catenin信号通路抑制剂MSAB对人子宫内膜基质细胞纤维化反应的影响

目的:探讨Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路抑制剂3-(4-甲基苯基磺酰胺基)苯甲酸甲酯(MSAB)对人子宫内膜基质细胞(HESCs)纤维化反应的影响,为MSAB应用于宫腔粘连(IUA)靶向治疗提供依据。方法:体外培养正常HESCs,分为对照组和转化生长因子β1(TGF-β1)组;体外培养IUA患者粘连部分的HESCs,作为IUA组。采用Western blotting法检测TGF-β1作用不同时间(0、 12、 24、 48和60h)后各组细胞中纤维化标志蛋白Ⅰ型胶原α1(COL1A1)蛋白表达水平。采用MTT实验检测各组细胞增殖活性。采用Western blotting法检测对照组和IUA组细胞中细胞COL1A1、间质标志蛋白[N-钙黏蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]以及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin表达水平。根据MSAB浓度,将正常HESCs分为0(对照组)、 0.25、 0.50、 0.75和1.00μmol·L^(-1) MSAB组,MTT实验检测各组细胞存活率。MSAB作用后,将正常HESCs分为对照组(正常HESCs)、 TGF-β1组(10μg·L^(-1) TGF-β1诱导正常HESCs 24 h后撤药,更换为完全养基并继续培养24 h)和MSAB组(10μg·L^(-1) TGF-β1诱导正常HESCs 24 h后撤药,更换为含0.75μmol·L^(-1) MSAB的完全培养基并继续培养24 h)。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中上皮-间质转化(EMT)相关转录因子Snail、Slug、Smuc、 ZEB1和ZEB2和COL1A1mRNA表达水平,采用Westernblotting法检测各组细胞中COL1A1蛋白、 N-钙黏蛋白、 α-SMA蛋白、 β-catenin和c-myc蛋白表达水平。结果:与对照组(TGF-β1作用0 h)比较,TGF-β1组作用12、24、48和60 h时HESCs中COL1A1蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,IUA组和TGF-β1组HESCs增殖活性差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,IUA组HESCs中COL1A1、β-连环蛋白、N-钙黏蛋白和α-SMA蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,0.75和1.00μmol·L^(-1) MSAB组细胞存活率降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,TGF-β1组细胞中Snail、Slug和COL1A1 mRNA表达水平升高(P<0.05或P<0.01);与TGF-β1组比较,MSAB组细胞中Snail、Slug和COL1A1 mRNA表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,作用24 h时TGF-β1组细胞中COL1A1蛋白、N-钙黏蛋白、 α-SMA蛋白、 β-catenin和c-myc蛋白表达水平升高(P<0.01);与TGF-β1组比较,MSAB组细胞中COL1A1蛋白、 N-钙黏蛋白、 α-SMA蛋白、β-catenin和c-myc蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。结结论论:MSAB可抑制体外培养HESCs的纤维化反应,该结果为MASB应用于IUA靶向治疗提供了理论基础。

基于Wnt/β-catenin通路介导的上皮间质转化探讨电针治疗宫腔粘连大鼠子宫内膜纤维化的作用机制

目的:观察电针对宫腔粘连(IUA)大鼠子宫内膜Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路与上皮间质转化(EMT)相关蛋白的影响,探讨其修复IUA子宫内膜的可能机制。方法:雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、ICG-001组,每组10只。采用机械搔刮联合脂多糖感染双重损伤法制备IUA模型。电针组针刺“关元”,电针双侧“足三里”“三阴交”,20 min/次,1次/d;ICG-001组腹腔注射β-catenin抑制剂ICG-001(5 mg/kg),1次/2 d;以上干预均连续进行3个动情周期。每组5只大鼠干预后取材,HE染色法观察IUA大鼠子宫内膜形态、子宫内膜厚度及腺体数目变化,Masson染色法观察子宫内膜组织纤维化程度,免疫组织化学法检测子宫内膜组织转化生长因子β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)、结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、糖原合酶激酶3β(GSK-3β)、β-catenin、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)的阳性表达,Western blot法检测子宫内膜组织中GSK-3β、β-catenin、E-cadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白相对表达量;每组剩余5只大鼠,干预后与雄鼠合笼,记录各组大鼠子宫胚胎着床数目。结果:HE染色示模型组子宫内膜组织部分坏死或缺失,电针组有所恢复,且较ICG-001组更好。与空白组相比,模型组大鼠子宫内膜组织腺体数目与子宫内膜厚度,子宫内膜组织中E-cadherin和GSK-3β蛋白表达与阳性表达降低(P<0.0001,P<0.001,P<0.01),子宫内膜纤维化面积比值,子宫内膜组织中TGF-β1、α-SMA、FN、CTGF、Col-Ⅰ阳性表达,N-cadherin、Vimentin及β-catenin蛋白表达与阳性表达升高(P<0.0001,P<0.001,P<0.01),胚胎着床数目减少(P<0.0001);与模型组相比,电针组与ICG-001组大鼠子宫内膜组织腺体数目与子宫内膜厚度,子宫内膜组织E-cadherin与GSK-3β蛋白表达及阳性表达升高(P<0.001,P<0.05,P<0.01),子宫内膜纤维化面积比值,子宫内膜组织TGF-β1、α-SMA、FN、CTGF、Col-Ⅰ阳性表达,N-cadherin、Vimentin、β-catenin蛋白表达与阳性表达降低(P<0.001,P<0.01,P<0.05),胚胎着床数目增多(P<0.001);与电针组相比,ICG-001组以上指标差异均无统计学意义。结论:电针可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路逆转EMT进程,降低内膜组织纤维化程度,从而促进IUA子宫内膜修复。

二甲双胍对TGF-β1诱导的人子宫内膜间质细胞纤维化的影响

目的探讨二甲双胍对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人子宫内膜间质细胞纤维化的影响。方法采用10 ng/ml TGF-β1作用于人子宫内膜间质细胞株(HESCs)诱导其发生纤维化,建立纤维化细胞模型,并给予不同浓度二甲双胍干预。实验分为5组:正常对照组、模型组、10μmol/L二甲双胍干预组、50μmol/L二甲双胍干预组、200μmol/L二甲双胍干预组。qPCR、Westernblotting检测各组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原蛋白(Col1α1)及纤维连接蛋白的mRNA及蛋白表达水平;CCK-8、EdU染色检测HESCs细胞增殖情况。结果 5组细胞α-SMA的mRNA表达水平依次为1.003±0.108、4.329±0.342、3.383±0.342、2.310±0.263、1.566±0.205,Col1α1的mRNA表达水平依次为1.002±0.299、3.462±0.695、2.342±0.531、1.970±0.336、1.450±0.233,纤维连接蛋白的mRNA表达水平依次为1.000±0.225、4.455±0.524、3.164±0.317、2.728±0.311、2.145±0.218,组间比较差异均有统计学意义(P<0.001)。与正常对照组相比,模型组α-SMA、Col1α1、纤维连接蛋白的mRNA表达水平升高(P<0.01);与模型组相比,10、50、200μmol/L二甲双胍干预组α-SMA、Col1α1、纤维连接蛋白的mRNA表达水平均下降(P<0.01)。5组细胞α-SMA的蛋白表达水平依次为0.807±0.198、3.422±0.464、2.770±0.429、2.560±0.430、1.342±0.328,Col1α1的蛋白表达水平依次为0.600±0.124、2.545±0.429、2.035±0.320、1.342±0.312、0.890±0.215,纤维连接蛋白的蛋白表达水平依次为0.780±0.150、3.810±0.417、3.6675±0.326、2.453±0.333、1.080±0.215,组间比较差异均有统计学意义(P<0.001)。与正常对照组相比,模型组α-SMA、Col1α1、纤维连接蛋白的蛋白表达水平升高(P<0.01);与模型组相比,10、50、200μmol/L二甲双胍干预组α-SMA、Col1α1及50、200μmol/L二甲双胍干预组纤维连接蛋白的蛋白表达水平下降,但10μmol/L二甲双胍干预组纤维连接蛋白的蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。5组细胞OD值分别为0.313±0.091、1.497±0.081、1.095±0.059、0.895±0.046、0.560±0.082,EdU阳性细胞率分别为12.665%±3.146%、47.650%±4.656%、37.568%±2.549%、32.050%±3.652%、26.050%±3.453%,组间比较差异有统计学意义(P<0.001)。与正常对照组相比,模型组细胞增殖能力显著增强;与模型组相比,10、50、200μmol/L二甲双胍干预组细胞增殖能力下降(P<0.01)。结论二甲双胍能抑制TGF-β1诱导的HESCs转分化、ECM合成及增殖,发挥抗纤维化的作用。

心内膜心肌纤维化的诊断和治疗

目的总结5例心内膜心肌纤维化的诊断和治疗经验。方法自1991年11月至2005年11月收治5例心内膜心肌纤维化患者,男性3例,女性2例,年龄7～58岁。其中右室型4例,左室型1例。5例均进行超声心动图检查,心室造影和心导管测压4例,MRI和同位素检查各1例。3例进行了手术治疗,切除纤维化心内膜,同时包括三尖瓣替换、二尖瓣替换和三尖瓣成形术各1例。结果入院时5例经超声心动图检查,确诊1例,3例单纯诊断为房室瓣反流,1例误诊为三尖瓣下移畸形。心室造影4例,确诊2例,2例单纯诊断为房室瓣反流。MRI检查1例,即确诊。2例术中确诊。3例手术患者中,2例右室型患者分别随访14年、3个月,前者心功能Ⅱ级,后者Ⅰ级。1例左室型患者术后2年半死于二尖瓣位机械瓣瓣周漏导致的心衰。结论心内膜心肌纤维化单独超声心动图检查容易误诊、漏诊。结合MRI有助于明确诊断。凡有严重房室瓣反流或明显心功能不全的患者,宜行手术治疗,包括房室瓣成形或替换及纤维内膜切除。

电影磁共振正常心脏测量及心内膜心肌纤维化症研究

目的:测量磁共振正常心脏径线,探讨EMF磁共振成像特征。方法:20例正常人心脏,平扫常规用横轴位、冠状位、长轴位及短轴位。而电影MR则改进为用平扫显示较好的层面进行扫描。并用改良轴位与横轴位进行对比,再与超声测量结果对比。测量EMF相应数据。结果:各正常径线测量值与国内作者测量值一致,横轴位与改良轴位测量数据相近似,左室MR功能测量与B超测量值相关好(P>0.05)。根据MRI的特征性表现可将EMF区分为右室型、双室型及左室型,并与其它心脏疾病鉴别。结论:MRI可准确测量心脏各径线,判断心脏功能,尤其电影MRI对EMF有特殊的诊断与鉴别诊断意义。

磁共振成像对心内膜心肌纤维化症的诊断价值

目的 探讨MRI对心内膜心肌纤维化症 (EMF)的诊断价值。材料与方法 选择经超声、心血管造影和 /或病理证实的 10例EMF进行MRI平扫及电影MRI检查 ,测量各径线及心脏功能 ,分析心腔及室壁情况 ,对比 3种检查方法对EMF的诊断价值。结果 右室型 7例 ,MRI均见右室流入道缩短、变形 ,心尖闭塞 ,流出道及主肺动脉扩张 ,右房高度扩张 ,右室壁运动普遍减弱 ,其中 2例并发右房血栓。双室型 3例除见右室型表现外 ,尚有左房扩张 ,左室心尖闭塞 ,左室功能受损。经测量右室流出道、右房、主肺动脉径线 ,MRI、右房造影及超声检查三者无差异。结论 MRI对EMF的诊断有独到的优越性。对EMF的检查应首选超声及MRI,必要时才选用X线心血管造影。

8例心内膜心肌纤维化的诊疗经验

目的总结8例心内膜心肌纤维化(EMF)的诊断和治疗经验。方法对有不明原因的心力衰竭并考虑为EMF的8例患者施行超声心动图(UCG)、核磁共振成象(MRI)、心内膜心肌活检(EMB)等检查,4例予内科治疗,4例行外科手术。结果UCG、MRI及EMB获得EMF诊断的例数分别为3/8,4/4及3/4,同时行以上3种检查诊断的例数为3/3。4例经内科治疗,2周至6个月内全部死亡。2例施行右心室心内膜切除加三尖瓣成形术,术后恢复良好,随访6～9年,心功能2级,能从事轻度工作。2例行右心室心内膜切除加三尖瓣置换术,手术死亡1例,1例存活6年,死于心力衰竭。结论综合应用UCG、MRI及EMB可提高EMF的诊断率,对病变较轻的EMF患者行心内膜切除加瓣膜成形或置换术可获得良好的效果,对病变重的病例应行心脏移植。

基于肠道菌群代谢产物的变化探讨芪苈强心胶囊改善心肌纤维化的机制

目的从肠道菌群代谢产物氧化三甲胺(TMAO)、脂多糖(LPS)的变化角度探讨芪苈强心胶囊对心肌梗死后大鼠心肌纤维化的影响和作用机制。方法将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、芪苈强心高剂量组(1.0 g/kg)、芪苈强心中剂量组(0.5 g/kg)、芪苈强心低剂量组(0.25 g/kg)、培哚普利组(0.84 mg/kg),每组10只。造模时死亡13只,灌胃时死亡5只,最终假手术组8只,模型组8只,芪苈强心高剂量组7只,芪苈强心中剂量组6只,芪苈强心低剂量组7只,培哚普利组6只。超声心动图检测各组大鼠的左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVEDS),苏木精-伊红染色检测心肌与回肠组织的病理形态,Masson染色检测心肌纤维化程度,计算心肌胶原容积分数(CVF),液相色谱-质谱法检测血浆TMAO的含量,酶联免疫吸附测定可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)和LPS的含量。结果与假手术组比较,模型组大鼠LVFS、LVEF显著降低,LVEDD、LVEDS、sST2、TMAO、LPS显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,芪苈强心高、中、低剂量组及培哚普利组大鼠LVFS、LVEF显著升高,芪苈强心高剂量组大鼠血浆sST2浓度[(2025.45±413.13)pg/ml vs(2800.86±208.64)pg/ml]、血浆TMAO含量[(351.68±129.01)ng/ml vs(641.41±188.44)ng/ml]、血浆LPS浓度[(420.22±62.32)EU/L vs(594.62±83.40)EU/L]显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论芪苈强心胶囊可能通过抑制肠道菌群代谢产物TMAO、LPS改善心肌纤维化,具体机制还需进一步探究。