中风活心软胶囊通过PPARγ受体上调STAT3磷酸化激活PI3K/AKT通路抑制脑缺血再灌注损伤内质网应激的作用机制研究

目的探讨中风活心软胶囊介导过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)受体上调信号传导转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)磷酸化诱导磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(BAKT serine/threonine kinase,AKT)信号通路参与脑缺血再灌注损伤内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激和神经保护的作用机制研究,阐明中风活心软胶囊对脑缺血后神经损伤修复的调控机制。方法选取30只SPF级雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组和治疗组,采用Zea Longa法建立右侧大脑中动脉缺血(middle cerebral artery ischemia,MCAI)大鼠模型,采用改良神经功能损伤评分(modified neurological severity score,mNSS)评估大鼠神经功能缺损情况,以mNSS评分2~18分为造模成功。仅治疗组给予中风活心软胶囊。Western blot法分别检测缺血半暗区皮质PPARγ受体蛋白、STAT3磷酸化蛋白、PI3K/AKT信号通路蛋白的表达,检测ER应激标记分子葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)及真核翻译起始因子2α激酶3(PKR-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)-激活转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)-C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)通路蛋白表达水平。结果模型组大鼠神经功能缺损情况,透射电镜观察缺血半暗区皮质神经元显著减少,提示右侧MCAI大鼠模型构建成功。模型组、治疗组mNSS评分均高于对照组,但治疗组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠缺血区PPARγ受体蛋白、STAT3磷酸化蛋白、PI3K及AKT蛋白表达均低于对照组与治疗组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组与对照组各指标比较差异无统计学意义。治疗组、模型组大鼠缺血区GRP78、PERK、ATF4和CHOP蛋白表达均高于对照组,但治疗组均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中风活心软胶囊可显著提高脑缺血大鼠缺血半暗区皮质PPARγ受体蛋白、STAT3磷酸化蛋白、PI3K/AKT信号通路蛋白表达,其作用机制可能是通过介导PPARγ受体上调STAT3磷酸化诱导PI3K/AKT信号通路参与脑缺血再灌注损伤ER应激和神经保护,从而发挥脑保护效应。

慢性疼痛中内质网应激机制的研究进展

慢性疼痛作为公共卫生难题,其发病机制复杂,涉及脊髓神经元兴奋、胶质细胞激活及受体活化等。药物治疗虽能缓解疼痛,但不良反应限制了其应用。研究表明,内质网应激在慢性疼痛中扮演关键角色,通过影响疼痛感受器敏感性、调控伤害信号传递、触发炎症反应及神经可塑性改变,加剧疼痛并促进其发展。本文综述了内质网蛋白激酶样内切割酶(PKR-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)、内质网应激调节因子1α (inositol-requiring enzyme 1α, IRE1α)和激活转录因子6 (activating transcription factor 6, ATF6)等通路在内质网应激与慢性疼痛中的具体机制,旨在为其深入研究和临床应用提供科学支撑,并探讨尚未解决的问题及未来发展方向。

Caspase-12在内质网应激中的激活途径及与疾病关系研究进展

随着内质网应激成为研究热点,作为其凋亡途径之一的Caspase-12激活也受到了更多的关注。Caspae-12是含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶家族成员之一,目前仅在鼠中得到克隆物,而人体中的Caspase-12因为基因突变而丧失了调控凋亡的作用,但可能是其同源异构体Caspase-4发挥相同作用。目前发现有三种途径可以激活Caspase-12:IRE1途径、m-钙蛋白酶途径及Caspase-7途径,而这三种途径的发生都与内质网发生应激有关系,Caspase-12被激活后进入细胞液激活其他Caspase家族成员来完成凋亡途径。Caspase-12的激活导致了很多系统的疾病:淀粉样-β蛋白毒性导致的阿尔茨海默病、视网膜变性、呼吸系统感染等。提示可以把Caspase-12作为疾病防治的靶点,而对Caspase-12的了解将为Caspase-4的研究提供借鉴。

丹皮酚通过下调内质网应激抑制心肌肥厚

目的 探讨丹皮酚(paeonol,PAE)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinogenⅡ,AngⅡ)诱导的大鼠心肌肥厚的影响及其作用机制。方法 将40只SD大鼠分为5组,包括对照组、AngⅡ模型组、低浓度丹皮酚组、中浓度丹皮酚组、高浓度丹皮酚组。PAE每天灌胃(25、50和100 mg·kg^(-1)·d^(-1))1次,连续28 d。通过向H9c2细胞中加入1μmol·L^(-1)的AngⅡ诱导48 h,建立体外肥大模型。结果 在AngⅡ诱导的大鼠中,PAE改善了超声心动图指标,降低了大鼠的心脏肥厚指数,降低了ANP、BNP mRNA和蛋白表达水平,减轻了心脏纤维化。在体外,PAE减轻了心肌细胞肥大,降低了AngⅡ诱导的H9c2细胞中ANP、BNP的mRNA和蛋白表达水平,同时也降低了内质网应激标志蛋白p-PERK、GRP78、ATF4和CHOP的蛋白表达,并在内质网应激激动剂衣霉素(tunicamycin,TN)处理后逆转。结论 PAE可改善心肌肥厚,其作用机制可能是通过抑制内质网应激,它可能是延缓心肌肥大发展的一种新药。

内质网应激与疾病的关系研究进展

内质网(endoplasmic reticulum,ER)是真核细胞的重要细胞器,负责绝大多数蛋白质的合成、加工及转运。为维持正常生理功能,细胞内质网对各种诱发因素极为敏感,通过激活自身应激状态缓解内质网压力以恢复稳态,持续或严重的内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)状态则促进细胞走向凋亡。目前发现ERS介导的细胞凋亡与疾病发生密切相关,本文将ERS相关信号通路、ERS与疾病的关系研究进展作一综述,为探索其参与疾病发生的机理、靶向干预ERS在疾病治疗中的作用提供新思路。

p38 MAPK通路调控自噬-内质网应激途径介导草酸钙肾结石形成的机制研究

目的 探究p38 MAPK通路对大鼠草酸钙(CaOx)肾结石形成的影响及其作用机制,为肾结石的治疗选择提供新的思路。方法 将40只大鼠分为对照组、SB203580组、CaOx组、SB203580+CaOx组,每组10只,CaOx组和SB203580+CaOx组以1%乙二醇与1%氯化铵配制的混合液灌胃建立CaOx肾结石模型,对照组和SB203580组以饮用水灌胃;造模后,SB203580组和SB203580+CaOx组腹腔注入剂量为5 mg/kg的SB203580,1次/d,连续注射14 d,对照组和CaOx组腹腔注入等体积生理盐水。称量大鼠肾脏质量并计算肾脏系数,全自动生化分析仪检测血清中血清尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定尿液中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤分子-1(KIM-1)水平,钙盐染色(Von Kossa)观察黑色晶体沉积及组织损伤情况,原位末端标记法(TUNEL)观察肾小管细胞凋亡情况,免疫组化染色检测自噬标记物表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)与蛋白质印迹(Western blotting)测定自噬及内质网应激途径相关分子表达。结果 与CaOx组比较,SB203580+CaOx组大鼠造模后体质量较高(P<0.05),肾脏质量、肾脏系数、BUN、SCr、NGAL、KIM-1水平均较低(P<0.05),肾脏组织病理损伤减轻且黑色结晶明显减少,TUNEL阳性细胞比例、LC3B与Beclin-1阳性表达面积占比、LC3B、Beclin-1、CHOP、GRP78 mRNA表达、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值、Beclin-1、CHOP、GRP78蛋白表达均下调(P<0.05),p62 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05)。结论 p38 MAPK通路参与大鼠CaOx肾结石形成,抑制该通路能够减少肾结石形成,该作用可能与其调控自噬-内质网应激有关。

内质网应激对肝细胞过氧化物酶体增殖物激活受体α表达的影响

目的探讨不同严重程度内质网应激对过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor alpha,PPARα)表达的影响。方法以小鼠肝细胞AML-12为研究对象,内质网应激诱导剂衣霉素(Tunicamycin,TM)以时间梯度、浓度梯度细胞诱导不同严重程度的内质网应激。采用实时荧光定量PCR方法和免疫印迹方法检测葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)、PPARα在内质网应激过程中的基因和蛋白动态表达;用免疫荧光染色方法检测PPARα蛋白在内质网应激过程中的表达情况和位置变化。结果在TM分别以不同时间和不同浓度诱导AML-12细胞内质网应激的过程中,随TM刺激时间延长与浓度增加,CHOP、GRP78 mRNA和蛋白水平也逐渐升高;而PPARαmRNA和蛋白呈现先升高后下降的表达趋势。在免疫荧光检测中,TM刺激早期PPARα主要在细胞质中表达,晚期集中在细胞核内;低浓度TM刺激时PPARα的位置主要表达在细胞质,而高浓度TM刺激后,PPARα聚集在细胞核中。结论细胞轻度内质网应激时,PPARα表达升高,而在细胞严重内质网应激时PPARα表达下降。

油茶皂苷通过内质网应激途径诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的研究

目的探讨油茶皂苷诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用及其作用机制。方法采用MTT法考察了油茶皂苷对肿瘤细胞增殖的影响;用Western blot方法分析油茶皂苷对caspase-3、PARP、Bip、ATF6、IRE1、Perk、eIF2a和eEF2蛋白质表达的影响。结果油茶皂苷(10～30 mg.L-1)明显抑制HepG2细胞的增殖。同时可激活Caspase信号通路,诱发PARP底物的断裂;进一步上调IRE1表达量及活化Perk、eIF2a和eEF2蛋白。结论油茶皂苷通过内质网应激途径诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡。

高脂膳食对C57小鼠肝脏内质网应激及PAI-1表达的影响

目的研究高脂膳食致C57小鼠脂肪肝内质网应激及其纤溶酶原激活物抑制物1(plasminogen activator in-hibitor-1,PAI-1)的变化。方法采用高脂膳食诱导代谢综合征(胰岛素抵抗、脂肪肝、肥胖)小鼠模型(HF组,n=10),以正常普食喂养的小鼠为对照组(NF组,n=12),喂养25周,检测各组小鼠血清中空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINs)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、PAI-1、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测各组小鼠肝组织中C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、PAI-1mRNA的表达。苏木精-伊红染色观察肝组织的形态学改变。结果 HF组肝脏病理检测提示中度脂肪肝,血清中FBG、FINs、TC、TG、PAI-1、ALT、AST均较NF组呈不同水平增高(均P<0.05),同时,肝组织中CHOP、PAI-1mRNA表达水平也明显上调(均P<0.01)。结论高脂膳食喂养可诱发C57小鼠脂肪肝内质网应激;PAI-1mRNA表达增高且活性增强,可能参与了脂肪肝内质网应激。

冬凌草甲素对HepG2细胞内质网应激蛋白IRE-1、PERK和CHOP的作用研究

目的研究内质网应激对冬凌草甲素处理的肝癌细胞HepG2的作用。方法采用特异性小干扰RNA(siRNA)转染HepG2细胞72 h抑制内质网应激蛋白RNA激活蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、抑制物阻抗性酯酶1(IRE-1)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达后,MTT法观察40μmol·L-1冬凌草甲素处理12h的转染细胞的细胞存活率。结果 PERK和IRE-1 siRNA转染抑制相应蛋白表达后增加冬凌草甲素诱导的HepG2细胞死亡(P<0.05);而抑制CHOP表达对冬凌草甲素处理的HepG2细胞存活率没有影响(P>0.05)。结论冬凌草甲素诱导的内质网应激对HepG2细胞具有保护作用。

脑损伤触发细胞类型特异性和时间依赖性内质网应激反应

未折叠蛋白反应(UPR)是一种通过协调蛋白质稳态以响应内质网(ER)应激来维持细胞活力的信号转导网络。当适应性反应未能改善蛋白质稳态时,UPR也会引发细胞死亡。尽管越来越多的证据表明UPR在神经退行性疾病和脑损伤中发挥作用,但我们对在神经病理学条件下如何诱导ER应激的理解是有限的。我们使用ER应激激活指示剂(ERAI)小鼠研究了脑损伤后ER应激反应的细胞和时间特异性模式,这让我们能够通过剪接的XBP-1与绿色荧光蛋白(GFP)Venus变体融合蛋白增强的荧光来监测体内的UPR。在ERAI小鼠皮质刺伤后的整个观察期间(受伤后6 h~7 d),同侧皮质的GFP信号和GFP+细胞数量增加,证实了UPR的发生。脑损伤后早期(从6 h起)在受损神经元中即观察到了GFP信号。然而,非神经元细胞(主要是内皮细胞,其次是星形胶质细胞)在脑损伤后占GFP+细胞的大部分。在局灶性脑缺血的小鼠模型中观察到了类似的结果。这些发现表明,UPR在神经元和非神经元细胞中的激活,尤其是内皮细胞和星形胶质细胞,可能在急性脑损伤中发挥重要作用,并可能成为其潜在的治疗靶点。

枳实含药血清对大鼠胃Cajal间质细胞内质网应激损伤的影响及机制

目的探讨枳实含药血清对大鼠胃Cajal间质细胞(ICCs)内质网应激(ERS)损伤的影响及机制。方法采用酶解法分离培养ICCs并行c-kit免疫荧光染色法鉴定细胞。使用衣霉素(Tm)构建ICCs内质网应激模型,4苯基丁酸(4-PBA)抑制内质网应激。血清药理学方法制备枳实含药血清。取对数生长期的ICCs,随机分为四组,ICCs组正常培养,ERS模型组予1μg/m L Tm处理,抑制剂组予含1μg/m L Tm和10 mmol/L 4-PBA处理,枳实组予1μg/m L Tm和20%枳实含药血清,每组作用时间均为24 h。透射电子显微镜观察胃ICCs内质网的超微结构;实时荧光定量PCR法检测ERS相关因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激活转录因子6(ATF6) mRNA表达。结果成功分离、培养并鉴定ICCs。透射电子显微镜下正常ICCs的内质网结构正常,排列整齐;模型组ICCs细胞器减少,内质网肿胀,扩张、囊泡化改变、排列紊乱;枳实组ICCs内质网肿胀,呈局限性扩张。与ICCs组比较,ERS模型组GRP78、ATF6 mRNA表达升高(P均<0. 05);与ERS模型组比较,枳实组GRP78、ATF6 mRNA表达降低(P均<0. 05)。结论枳实含药血清可减轻ICCs细胞的ERS损伤,其机制可能与调控ERS ATF6通路有关。

内质网应激中活化转录因子6通路及相关调控因子对未折叠蛋白反应的调控

目的内质网应激在多种疾病的发病机制中起到关键作用,持续或强烈的内质网应激反应可诱导细胞凋亡。作为一种内质网跨膜蛋白,活化转录因子6(ATF6)可以感受内质网应激并传递信号诱导未折叠蛋白反应。我们主要对ATF6通路以及其调控凋亡的机制进行综述,重要概述了相关激活剂和抑制剂,希望能为一些神经退行性疾病的治疗提供参考。

ATF4在内质网应激调控成骨分化中的作用

为避免内质网中未折叠蛋白质的过度累积,真核细胞能激活一系列信号通路来维持内质网稳态,这个过程称为内质网应激。在骨生长发育中,适宜的内质网应激有助于成骨细胞、破骨细胞和软骨细胞的生长,可以促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。而过度的内质网应激会抑制成骨分化,严重的甚至导致骨质疏松、成骨不全等相关骨病的发生。内质网应激时可激活未折叠蛋白质反应,其主要是通过PERK/eIF2α/ATF4信号通路,上调转录激活因子4(ATF4)的表达。ATF4位于许多成骨分化调节因子的下游,是促进成骨分化的关键因子,在内质网应激对成骨分化的调节中发挥重要作用。在成骨分化过程中,适宜的内质网应激能通过激活PERK信号通路,诱导ATF4表达增加,进而上调骨钙素、骨涎蛋白等成骨所必需基因的表达,促进成骨分化。过度的内质网应激会激活ATF4/CHOP促凋亡途径,并导致Bax、胱天蛋白酶等凋亡信号分子的大量产生,进而导致细胞凋亡,抑制成骨分化。由于ATF4在ERS和成骨分化中的重要作用,ATF4在骨质疏松、成骨不全等骨相关疾病的治疗中具有重要意义。本文通过综述ATF4在内质网应激调控成骨分化中的作用机制,为相关骨性疾病治疗提供理论依据。

人参皂苷CK抑制STAT3诱导人肝癌细胞凋亡的内质网应激作用机制的研究

目的探讨人参皂苷CK (ginsenoside, CK)通过抑制STAT3诱导人肝癌细胞凋亡的内质网应激作用机制。方法利用MTT法检测人参皂苷CK对人肝癌HepG2细胞增殖的影响;应用流式细胞术检测细胞凋亡;CRISPR/Cas9技术敲除STAT3基因;Western blot技术检测人参皂苷CK作用后STAT3、p-STAT3及细胞凋亡、内质网应激相关蛋白的表达。结果人参皂苷CK对人肝癌细胞的增殖有抑制作用,且能诱导细胞凋亡;下调p-STAT3的表达,上调Cleaved caspase3,Cleaved PARP和GRP78、CHOP、Cleaved caspase 4、p-PERK、p-IRE1、p-JNK、p-eIF2α的表达。结论人参皂苷CK能够通过抑制STAT3的磷酸化调控人肝癌细胞凋亡,其作用机制与内质网应激有关。

糖尿病周围神经病变中内质网应激诱导的细胞凋亡机制研究进展

糖尿病周围神经病变(DPN)的发病机制复杂,不可缓解的内质网应激反应(ERS)可诱导细胞凋亡,损伤神经细胞结构和功能,从而导致DPN。当未折叠的或折叠错误的蛋白在内质网上过度积累时,会触发内质网产生一系列应激反应以保护细胞,即未折叠蛋白反应(UPR),一般用UPR来提示ERS的发生。UPR主要包括3个信号通路:蛋白激酶R样内质网激酶通路、激活转录因子6通路和肌醇需求酶1通路。分析DPN中ERS诱导的细胞凋亡机制,可为预防和治疗DPN提供参考及新思路。

内质网应激诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞系凋亡

目的探讨内质网应激(ERS)致雌激素受体阴性(ER-)人乳腺癌MDA-MB-231细胞系凋亡及钙激活中性蛋白酶2(calpain2)在凋亡效应中的作用。方法实验设空白对照组(DMEM)、对照组(DMEM+DMSO)和实验组,用不同浓度衣霉素(TM)诱导乳腺癌细胞不同时间,MTT法和流式细胞术检测细胞增殖抑制率及凋亡率;Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达量,以GRP78表达最高点确定ERS模型建立,检测凋亡相关蛋白caspase4和CHOP表达以及calpain及其内源性抑制酶calpastatin的表达,用ERS抑制剂(4-PBA)和calpain抑制剂(calpeptin)分别预处理细胞2 h,观察对上述效应的影响。结果 9、12和18μmol/L TM诱导ERS对该细胞增殖有明显抑制效应,抑制率分别为33.88%±1.32%、51.51%±8.85%和55.77%±2.61%,细胞凋亡率分别为9μmol/L TM组16.70%±0.46%和12μmol/L TM组28.1%±1.09%,与对照组相比有明显差异(P<0.05);9μmol/L TM诱导细胞24 h的GRP78表达上调最高(P<0.01);ERS还可明显上调caspase4、CHOP和calpain表达,下调calpastatin表达(P<0.01或P<0.05),上述效应均能被4-PBA和calpeptin减弱或阻断(P<0.05)。结论 ERS可诱导MDA-MB-231细胞凋亡,calpain2参与调控凋亡发生。

异槲皮苷通过内质网应激/自噬途径诱导宫颈癌细胞凋亡的作用机制

目的:研究异槲皮苷通过内质网应激和自噬途径诱导宫颈癌细胞凋亡的作用机制。方法:将SiHa细胞随机分为对照组、异槲皮苷低剂量组、异槲皮苷中剂量组和异槲皮苷高剂量组。异槲皮苷低、中、高剂量组细胞分别使用终浓度为20μmol/L、40μmol/L和80μmol/L的异槲皮苷培养,对照组细胞使用正常培养基培养。使用CCK-8分别在24 h、48 h和72 h检测细胞增殖情况;EDU检测各组细胞在72 h时的增殖情况;荧光定量PCR检测各组细胞内质网应激相关mRNA的表达;Western Blotting检测各组细胞蛋白表达情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:与对照组细胞比较,低、中、高剂量异槲皮苷作用后,细胞OD值均明显降低;葡萄糖调节蛋白78 mRNA、CHOP mRNA以及葡萄糖调节蛋白78蛋白、C/EBP同源蛋白质(CHOP)、胱天蛋白酶12蛋白、Beclin 1蛋白、Bax蛋白、Cl-胱天蛋白酶-3蛋白表达水平以及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均明显升高;P62蛋白、Bcl-2蛋白、p-JAK2蛋白和p-信号转导及转录激活蛋白3表达水平均明显降低;细胞凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。且异槲皮苷的作用呈剂量依赖性。结论:异槲皮苷可通过内质网应激途径和自噬途径,诱导宫颈癌细胞凋亡。

高糖诱导的心肌细胞损伤的内质网应激机制研究

目的:本文对高糖诱导的心肌细胞损伤的内质网应激机制研究,为临床治疗提供借鉴。方法:心肌细胞随机分为3组:对照组、高糖组和4-BPA组。高糖组给予高糖处理12h,4-BPA组细胞在高糖处理的第6h给予4-BPA处理。免疫印迹法分析各组细胞内质网应激蛋白CHOP、BIP、PERK的表达。结果:高糖引起心肌细胞内质网应激蛋白CHOP、BIP、PERK的增强表达,且与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01);4-BPA处理后上述蛋白的异常表达得到部分改善,且与高糖组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:高糖损伤心肌细胞可能是通过激活细胞内内质网应激信号通路实现。

干细胞因子抑制糖氧剥夺诱导的人脑微血管内皮细胞内质网应激性凋亡的研究

目的探讨干细胞因子(SCF)抑制糖氧剥夺(OGD)诱导的人脑微血管内皮细胞(h-BMEC)内质网应激性凋亡的机制。方法将h-BMEC分为对照组、OGD组、SCF+OGD组(简称SCF组)、SCF+Compound C+OGD组(简称Comp C组)和SCF+AICAR+OGD组(简称AICAR组);培养48h后,采用噻唑蓝法检测细胞存活率,膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)双染法检测细胞凋亡率,水溶性四唑盐-8(WST-8)法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸(TBA)法检测丙二醛(MDA)含量,Western blot法检测腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、断裂半胱氨酸蛋白酶-12(cleaved Caspase-12)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达。结果与OGD组比较,SCF组细胞存活率、SOD活性、Bcl-2表达均降低(均P<0.05),MDA含量、细胞凋亡率、Bax表达、Bax/Bcl-2以及PERK、CHOP、cleaved Caspase-12、p-AMPK表达均增高(均P<0.05);与SCF组比较,AICAR组细胞存活率、SOD活性、Bcl-2表达均降低(均P<0.05),MDA含量、细胞凋亡率、Bax表达、Bax/Bcl-2以及PERK、CHOP、cleaved Caspase-12、p-AMPK表达均增高(均P<0.05);Comp C组AICAR组细胞存活率、SOD活性、MDA含量、细胞凋亡率、Bax/Bcl-2比例、Bax、Bcl-2、、PERK、CHOP、cleaved Caspase-12、p-AMPK表达差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论SCF对OGD诱导的h-BMEC损伤具有抑制作用,其分子机制与抑制AMPK介导的内质网应激性凋亡有关。