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小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移瘤株Hca-F的再克隆技术 被引量:4
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作者 白洁 王波 +4 位作者 侯力 李莹 凌茂英 吕申 白颖 《大连医科大学学报》 CAS 2003年第1期65-66,共2页
[目的 ]探讨小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移瘤株Hca -F的再克隆技术。 [方法 ]采用有限稀释法对已使用多年的小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移瘤株Hca -F进行再克隆 ;6 15小鼠皮下接种 ,检测再克隆瘤株淋巴结转移能力。 [结果 ]共分离出 3个不... [目的 ]探讨小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移瘤株Hca -F的再克隆技术。 [方法 ]采用有限稀释法对已使用多年的小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移瘤株Hca -F进行再克隆 ;6 15小鼠皮下接种 ,检测再克隆瘤株淋巴结转移能力。 [结果 ]共分离出 3个不同的瘤株 ,Hca -F - 2 - 2 4c6 ,Hca -F -3-d4 ,Hca -F - 3-a4 ,流式细胞仪检测证明 3株瘤细胞均为单克隆细胞。动物实验证明三株瘤细胞淋巴结转移率分别为 95 .5 % ,87% ,4 2 .5 %。 [结论 ]有限稀释法操作简单 。 展开更多
关键词 淋巴道转移 肿瘤转移 有限稀释法 腹水型肝癌 再克隆技术
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转基因和再克隆对克隆胚胎细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 孙国杰 李荣 +6 位作者 戴蕴平 王海平 王莉莉 刘颖 丁方荣 卫恒习 李宁 《自然科学进展》 北大核心 2009年第3期266-271,共6页
细胞凋亡在着床前胚胎发育过程中发挥着重要作用,胚胎凋亡检测能为获得高质量的体细胞克隆胚胎提供有益信息,进而有助于提高克隆效率.用原位末端标记法对牛的转基因克隆和转基因再克隆囊胚进行了细胞凋亡检测,再克隆囊胚是利用转基因克... 细胞凋亡在着床前胚胎发育过程中发挥着重要作用,胚胎凋亡检测能为获得高质量的体细胞克隆胚胎提供有益信息,进而有助于提高克隆效率.用原位末端标记法对牛的转基因克隆和转基因再克隆囊胚进行了细胞凋亡检测,再克隆囊胚是利用转基因克隆牛的体细胞作为供体细胞进行体细胞核移植后获得的第二代克隆胚胎.结果表明转基因克隆胚胎的囊胚发育率显著低于非转基因克隆胚胎的囊胚发育率,而转基因克隆囊胚的细胞凋亡指数显著高于非转基因克隆胚胎的细胞凋亡指数.此外,转基因再克隆胚胎的囊胚发育率和胚胎细胞凋亡指数与非转基因克隆胚胎的囊胚发育率和胚胎细胞凋亡指数相比差异性不显著.结果表明早期的转基因克隆胚胎发育能力的减弱可能是由于供体细胞的基因转染和药物筛选过程导致的,而再克隆对其早期胚胎的发育能力没有负面影响. 展开更多
关键词 凋亡 转基因克隆囊胚 转基因再克隆囊胚
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大动物再克隆首获成功
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《国外科技动态》 2004年第6期42-43,共2页
关键词 克隆 体细胞 再克隆实验 动物实验
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克隆鼠再克隆的新技术
4
作者 丁力群 《畜牧兽医科技信息》 1998年第17期7-8,共2页
美国夏威夷大学的日本著名生物学家柳町隆造教授领导的一个国际研究小组,利用“微注射”技术,将成年母鼠的体细胞已成功克隆出祖孙三代50多只老鼠,这是人类首次用克隆动物再次克隆出克隆动物。其首次成功率为3%(多莉为277次才克隆成功... 美国夏威夷大学的日本著名生物学家柳町隆造教授领导的一个国际研究小组,利用“微注射”技术,将成年母鼠的体细胞已成功克隆出祖孙三代50多只老鼠,这是人类首次用克隆动物再次克隆出克隆动物。其首次成功率为3%(多莉为277次才克隆成功)。鼠克隆法可用来克隆羊、牛、猪等家畜。其具体方法是:利用针状吸管将成年克隆母鼠卵巢丘细胞内含有基因物质的核吸出来再“ 展开更多
关键词 再克隆 新技术 克隆动物 微注射 美国夏威夷 基因物质 体细胞 人类首次 克隆 母鼠
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丙戊酸钠促进猪再克隆胚胎体外发育 被引量:1
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作者 孙羽 王安峰 +2 位作者 韩杨 陈仙菊 张明军 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期600-603,共4页
对VPA处理的最佳处理时间和处理浓度进行探索,希望通过VPA处理来改善再克隆胚胎的发育能力。结果表明,使用1mmol/L VPA处理16h,可以获得较高的囊胚形成率。然后通过免疫荧光检测发现,囊胚时期acH3K9的乙酰化水平在处理组中高于非处理组... 对VPA处理的最佳处理时间和处理浓度进行探索,希望通过VPA处理来改善再克隆胚胎的发育能力。结果表明,使用1mmol/L VPA处理16h,可以获得较高的囊胚形成率。然后通过免疫荧光检测发现,囊胚时期acH3K9的乙酰化水平在处理组中高于非处理组。多能性因子Oct4、Nanog、Sox2和Klf4的实时定量检测结果则显示,它们之间的表达水平同样差异不显著。结果表明VPA能够显著提高猪再克隆胚胎体内发育能力。 展开更多
关键词 体细胞核移植 再克隆 丙戊酸钠 囊胚
原文传递
山羊胚胎克隆的研究 被引量:5
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作者 成勇 孙长美 +2 位作者 邹贤刚 杜淼 徐少甫 《江苏农学院学报》 CSCD 1995年第1期51-55,共5页
应用细胞核移植技术,把未分化或处于不同发育阶段的胚胎分裂球或细胞移入成熟的去核卵母细胞,并使之融合,成为G_0代克隆卵。将G_0代克隆卵移入同期发情的山羊输卵管中培养5d,回收得到克隆胚,选择其中正常发育至8~16细... 应用细胞核移植技术,把未分化或处于不同发育阶段的胚胎分裂球或细胞移入成熟的去核卵母细胞,并使之融合,成为G_0代克隆卵。将G_0代克隆卵移入同期发情的山羊输卵管中培养5d,回收得到克隆胚,选择其中正常发育至8~16细胞的克隆胚,将其胚胎细胞再移入成熟的去核卵母细胞,并进行电融合,构成G_1代再克隆卵。129枚G_0代克隆卵和143枚G_1代再克隆卵移入同期发情的山羊输卵管,获得G_0代克隆羊2只和G_1代再克隆羊4只。介绍了产生克隆动物的各个技术环节以及这些环节与克隆动物出生率的关系。 展开更多
关键词 山羊 胚胎移植 无性繁殖系 再克隆
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克隆山羊成纤维细胞IGF2-H19基因座甲基化分析
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作者 刘孜斐 邓明田 +2 位作者 任才芳 万永杰 王锋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2277-2285,共9页
旨在研究山羊体细胞核移植对克隆后代成纤维细胞IGF2-H19基因座甲基化的影响。以奶山羊耳成纤维细胞(GFC,对照组)和克隆山羊耳成纤维细胞(CFC,试验组)为试验材料,培养至第5代时,采用细胞计数法绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞凋亡... 旨在研究山羊体细胞核移植对克隆后代成纤维细胞IGF2-H19基因座甲基化的影响。以奶山羊耳成纤维细胞(GFC,对照组)和克隆山羊耳成纤维细胞(CFC,试验组)为试验材料,培养至第5代时,采用细胞计数法绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR分析基因的表达差异,亚硫酸氢盐测序(BSP)分析差异甲基化区域的甲基化水平。结果显示,GFC和CFC组细胞的生长曲线均呈典型"S"型,但CFC组细胞的凋亡率显著高于GFC组(P<0.01);CFC组细胞中Dnmt1(P<0.01)、Dnmt3b(P<0.01)、Tet1(P<0.05)、Tet2(P<0.05)、H19(P<0.05)和IGF2(P<0.01)基因表达水平均显著低于GFC组,而Tet3、Dnmt3a和IGF2R在2组间无显著性差异;CFC组细胞中IGF2两个差异甲基化区域(DMR1和DMR2)的甲基化水平均显著低于GFC组(74.1%vs.57.8%,P<0.01;76.8%vs.40.0%,P<0.01),但IGF2-H19印记基因控制区域甲基化水平显著高于GFC组(68.8%vs.84.0%,P<0.01)。体细胞核移植通过影响Dnmt和Tet家族基因的表达引起IGF2-H19基因座甲基化的异常,导致基因印记紊乱,进而影响再克隆的效率。 展开更多
关键词 体细胞核移植 再克隆 IGF2-H19 DNA甲基化 山羊耳成纤维细胞
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简讯
8
《中国科教创新导刊》 2004年第6期42-48,共7页
关键词 类地行星 月壤 克隆 研究人员 再克隆 卫星 密封舱 月球 低氧诱导因子-1 接收面积
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科技航讯
9
《中国.城乡桥》 1998年第9期27-27,共1页
【正】 克隆技术取得新进展——克隆老鼠再克隆首次成功 据科技日报报道,美国夏威夷大学国际研究小组采用新克隆技术培育出三代共50多只克隆鼠。这是人类首次用克隆动再次克隆出克隆动物。利用成年动的体细胞克隆哺乳动物至少已有两例... 【正】 克隆技术取得新进展——克隆老鼠再克隆首次成功 据科技日报报道,美国夏威夷大学国际研究小组采用新克隆技术培育出三代共50多只克隆鼠。这是人类首次用克隆动再次克隆出克隆动物。利用成年动的体细胞克隆哺乳动物至少已有两例取得成功,一是英国的多莉羊,二是日本的孪生牛。夏威夷大学的科学家们指出,鼠克隆技术比牛羊克隆技术又前进了一步,首先是成功率高达3%。 展开更多
关键词 克隆技术 体细胞克隆 抗除草剂基因 直播水稻 多莉羊 哺乳动物 转基因植株 再克隆 科学家 克隆动物
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CLONING AND ANALYSIS OF THE GENOMIC DNA SEQUENCE OF AUGMENTER OF LIVERR EGENERATION FROM RAT 被引量:8
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作者 董菁 成军 +3 位作者 王勤环 施双双 王刚 斯崇文 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2002年第2期63-67,共5页
Objective.To search for genomic DNA sequence of the augmenter of liver regeneration(ALR)of rat.Methods.Polymerase chain reaction(PCR)with specific primers was used to amp lify the sequence from the rat genome.Results.... Objective.To search for genomic DNA sequence of the augmenter of liver regeneration(ALR)of rat.Methods.Polymerase chain reaction(PCR)with specific primers was used to amp lify the sequence from the rat genome.Results.A piece of genomic DNA sequence and a p iece of pseudogene of rat ALR were identified.The lengths of the gene and pseudogene are 1508bp and 442bp,respectively.The ALR gene of rat includes 3exons and 2introns.The 442bp DNA sequence may represent a pseudogene or a ALR-related peptide.Predicted amino acid sequence analysis showed that there were 14different amino acid residues between the gene and pseu do-gene.ALR-related peptide is 84amin o acid residues in length and relates closely to ALR protein.Conclusion.There might be a multigene family of A LR in rat. 展开更多
关键词 liver regeneration polymerase chain reaction GENE PSEUDOGENE
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Cloning and screening of scarless healing-related gene(s) in rabbit skin
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作者 张波 刘大维 +1 位作者 王正国 朱佩芳 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2004年第2期99-103,共5页
Background: Over the past years, scientists have been working on the mechanisms of the scarless healing. The remarkable phenotypic differences between fetal and adult healing may lead us to find out their characterist... Background: Over the past years, scientists have been working on the mechanisms of the scarless healing. The remarkable phenotypic differences between fetal and adult healing may lead us to find out their characteristics in genetics, which represent potentially important mechanisms to explain the differences in the quality of wound repair observed in fetus versus adult tissues. Methods: Middle laparotomy and hysterotomy were performed on pregnant rabbits on 20-day gestation to expose the fetal back, and longitudinal incision which penetrated full skin was made on the back of fetus. The trauma fetus skin was harvested at 12 h post-operation (FT), the fetus control (FC) and trauma adult skin (AT) were taken at the same time. dscDNA was synthesized from total RNA of skin samples with SMART technology. An improved suppression subtractive hybridization (SSH) method was applied to analyze the samples. Having taken one of the three samples as Tester respectively, the other two together as Drivers, one forward and two reverse hybridization products were gotten. Having amplified by selective PCR, the products were inserted into vector, and then transferred into E.coli HB101. The colonies were screened by electrophoresis, reverse Northern afterwards, and the positive clones were sequenced. BLAST in NCBI was performed to compare and analyze the positive clones (expressed sequence Tag, ESTs). Results: Totally 298 clones were gotten and 61 positive clones were obtained after screening. The 61 selected positive clones were sequenced and 54 sequences were goten. Conclusion: Instead of traditional SSH, an improved SSH with 2 Drivers was applied in the experiment. The improved program is reasonable and correct in both theory and practice. 展开更多
关键词 scarless healing GENE CLONING SCREENING
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