废旧锂离子电池再生制备LiNi_xCo_yMn_(1-x-y)O_2正极材料及其性能

对利用废旧锂离子电池,再生制备镍钴锰酸锂正极材料的工艺进行研究。废旧电池经拆解、破碎、浸出、中和、萃取、深度除杂、共沉淀及高温合成等工序,可再生制得镍钴锰酸锂正极材料。使用化学滴定和分光光度法分析常量元素,ICP-AES分析微量元素,S EM、XRD表征材料的形貌和物相,纽扣电池和聚合物电池测试材料的电化学性能。研究表明,在900~950℃的反应温度下,可以再生制备出具有较高容量和优异循环性能的镍钴锰酸锂正极材料。LiNi_xCo_yMn_(1-x-y)O_2系列正极随着Ni含量的增加,容量逐渐增加,而工作电压逐渐降低。

葡萄溃疡病菌原生质体的制备与再生条件的优化

对葡萄溃疡病菌菌丝摇培时间、酶解时间、渗透压稳定剂种类及再生培养基类型进行了探索和优化,建立了葡萄溃疡病菌稳定、高效的原生质体制备体系。以SR培养基作为再生培养基时,原生质体再生率达到最高,为32.2%。该研究为建立葡萄溃疡病菌高效、稳定的遗传转化体系,开展其致病机理的研究奠定了基础。

刺糖多孢菌原生质体制备与再生条件优化

目的研究多杀菌素产生菌刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)原生质体制备与再生的最佳条件。方法利用数理统计的方法研究了不同制备培养基、菌龄、甘氨酸浓度、溶菌酶处理条件以及再生培养基对原生质体制备和再生的影响,并考察了原生质体的适宜保藏温度。结果菌体在添加0.3%甘氨酸的EHC培养基中培养72h,用2mg/mL溶菌酶32℃酶解40min后,涂布在再生培养基R6上再生,原生质体制备率超过99%,再生数可达到107cfu/mL。刺糖多孢菌原生质体可置于4℃短期保存72h,长期保存需要放置于-80℃条件下。结论优化的结果为刺糖多孢菌原生质体融合育种和遗传转化体系建立奠定了基础。

产苦马豆素疯草内生真菌Undifilum oxytropis原生质体的制备和再生

以产苦马豆素内生真菌Undifilum oxytropis NX-FEL001为供试菌株,研究了培养方式、菌龄、酶解时间和酶解温度等,对U.oxytropis原生质体制备和再生的影响。结果表明,U.oxytropis菌丝在质量分数为10g/L纤维素酶+10g/L蜗牛酶+1g/L溶壁酶组成的复合酶溶液,35℃恒温,80r/min振荡孵育3h左右,原生质体释放量最高;原生质体在YCM培养基上,22℃培养9d可以再生形成菌落,培养15d其再生率可达8.5%;原生质体在YCM培养基上再生后其菌落颜色与野生型U.oxytropis不一致,呈现白色;菌丝形态与野生型U.oxytropis相一致,经检测再生后菌丝仍然能够产生苦马豆素。U.oxytropis原生质体的制备,将为进行疯草内生真菌的遗传转化和基因操作研究提供重要工具,为进一步开展疯草内生真菌合成苦马豆素的分子调控机制奠定了基础。

海洋低温蛋白酶生产菌YS-9412-130原生质体的制备与再生

以海洋低温蛋白酶生产菌株YS-9412-130为研究对象,从传代、菌龄、溶菌酶浓度与酶解时间、甘氨酸与EDTA预处理以及稳定剂对该菌原生质体形成与再生的影响进行研究。结果表明,在相同条件下,第一代菌至第五代菌原生质体的形成率分别为86.9%、70.3%、66.8%、63.4%、60.2%,再生率分别为10.5%、18.6%、17.9%、18.2%、17.8%;取该菌对数生长前期、对数生长中后期、稳定期部分菌液制备原生质体,原生质体的形成率分别为72.1%、70.4%、60.5%,再生率为13.4%、18.9%、10.4%;溶菌酶浓度为2.5 mg/mL5、mg/mL1、0 mg/mL、20 mg/mL,酶解60 min,原生质体的形成率分别为40.6%、70.8%、81.8%、95.6%,原生质体的再生率为19.0%、19.2%、19.0%、10.6%;使用10 mg/mL溶菌酶酶解YS-9412-130菌30 min、60 min、90 min、120 min,原生质体的形成率分别为30.8%、81.3%、81.7%、82.9%,原生质体的再生率分别为19.2%、19.3%、16.9%、11.2%;在细菌培养液中添加终质量浓度为5 mg/mL、10 mg/mL、20 mg/mL和40 mg/mL的甘氨酸,培养该菌16 h后制备原生质体,原生质体的形成率分别为81.0%、81.1%、90.3%、90.8%、90.6%,再生率为19.1%、19.0%、19.3%、12.0%、9.0%;EDTA对原生质体的形成稍有促进作用,但作用超过30 min会影响原生质体的再生;分别以0.6 mol/L KCl、0.3 mol/L KCl+0.3 mol/L蔗糖、0.6 mol/L蔗糖作为稳定剂,原生质体的再生率分别为10.9%、19.6%、25.9%。结论认为,YS-9412-130原生质体制备的最佳条件为选用第2代YS-9412-130菌,在培养基中添加终质度浓度为10 mg/mL的甘氨酸培养16 h后,再将菌体置于含有0.05 mol/L EDTA的高渗溶液中30℃预处理30 min,用10 mg/mL溶菌酶,30℃酶解60 min,再用0.6 mol/L蔗糖作为原生质体再生培养稳定剂,比较适合于YS-9412-130原生质体的制备与再生。这一试验结果将为通过原生质体技术对YS-9412-130菌进行遗传改良提供重要参数。[中国水产科学,2006,13(1):106-111]

酿酒酵母W5原生质体制备及再生条件的初步研究

对影响酿酒酵母W5制备与再生的一系列因素做了初步的研究,确定了原生质体制备与再生的最佳条件:菌龄为12h,脱壁预处理剂作用20min,在30℃,pH为偏酸或者偏碱的条件下,选用2%(m/v)的蜗牛酶用10mL试管摇床温育15min;渗透压稳定剂采用17%(m/v)蔗糖,原生质体制备率和再生率可达到95.11%和14.66%。

甜瓜蔓枯病菌原生质体制备及再生体系研究

【目的】建立高效的病原菌原生质体制备和再生体系,明确甜瓜蔓枯病菌的致病机理。【方法】采用单因素分析法,利用2种混合酶20 g·L^(−1) Driselase和8 g·L^(−1) Lysing enzymes,以不同菌龄、摇培转速、不同酶解时间、温度、渗透压稳定剂的种类及pH、再生培养基为研究条件;对甜瓜蔓枯病菌原生质体的制备及再生体系进行优化。【结果】结果表明:以培养36 h左右的菌丝体为材料,以0.7 mol·L^(−1) NaCl作为渗透压稳定剂(pH=7),用20 g·L^(−1) Driselase和8 g·L^(−1) Lysing enzymes在30℃、140 r·min^(−1)条件下酶解4 h,原生质体的产量可达9.65×10^(7)个·mL^(−1);以琼脂含量为0.6%的SR培养基作为再生培养基,甜瓜蔓枯病菌的再生率可达22.53%;原生质体的再生率在存放10 h内下降迅速,10 h后下降速度逐渐平缓。【结论】确定了蔓枯病菌的高效原生质体制备与再生体系,为该菌株遗传转化体系的建立奠定基础。

安琪超级酿酒酵母原生质体制备与再生条件研究

应用正交试验研究预处理剂、酶种类和浓度、渗透压稳定剂和酶解时间对安琪超级酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)原生质体形成率和再生的影响。结果表明,渗透压稳定剂在上述4种因素中对原生质体的形成和再生影响最大。最优组合为:使用β-巯基乙醇作预处理剂,0.4%蜗牛酶加0.4%纤维素酶,使用0.53 M蔗糖做渗透压稳定剂,28℃酶解1 h。安琪超级酿酒酵母原生质体的形成率为98.6223%,再生率为19.9904%。

嘧肽霉素生物合成阻断突变株原生质体制备和再生条件的研究

针对嘧肽霉素的生物合成阻断突变株,研究了其最佳的菌体培养、原生质体制备和再生条件。采用改良的含15%蔗糖、0.5%甘氨酸的YEME液体培养基振荡培养36h,获得细腻丰富的菌丝体;对不同的酶浓度、酶解温度和酶解时间进行3因子4水平的正交试验,筛选最佳酶解条件为:溶菌酶浓度2mg·mL-1,28℃,作用90min,可获得最高的制备率为99%;再生培养基以R2YE为最佳,采取直接涂布方式,25.5℃培养可达48%的再生率。

马铃薯晚疫病菌原生质体制备及再生体系的研究

为明确致病疫霉的致病机理需要建立高效的病原菌原生质体制备和再生体系。通过对马铃薯晚疫病菌制备和再生过程的研究,采用两种裂解酶Driselase和Cellulase R-10,以不同菌龄、裂解酶、裂解酶的浓度和裂解酶的反应时间为研究条件,得到原生质体制备的最佳条件为:以培养18 d的菌丝体为材料,用10 mg/m L Driselase处理菌丝60 min后,原生质体产量达9.5×104个/g;以0.1 mol/L氯化钙和0.4 mol/L甘露醇作为渗透压稳定剂,以黑麦V8固体再生培养基得到的原生质体再生率最高达3.1%。

废锂离子电池阴极制备再生材料研究进展

近年来,随着电子产品更新换代速度的加快,作为电子产品核心组件的锂离子电池的废弃量也逐渐增多,给环境带来了巨大的风险,对废弃锂离子电池进行回收再利用显得十分重要。综述了利用废锂离子电池阴极制备再生材料的研究进展,通过对4种常用的废锂离子电池阴极再生材料制备方法的技术进展,以及所制备的再生材料应用于电极、催化剂等多领域的应用效能进行阐述和分析,指出了废锂离子电池阴极材料资源化再利用所面临的挑战,并对其未来发展前景进行了展望。

肠道肠球菌AUH-HM195原生质体制备与再生条件初探

应用正交试验研究菌龄、酶浓度、酶解时间和渗透压稳定剂种类对肠道肠球菌(Enterococcus hirae)AUH-HM195原生质体制备与再生的影响。结果表明:菌龄与酶浓度的交互作用对原生质体的制备和再生影响最大。最优组合为:菌龄6 h,溶菌酶浓度5 mg/mL,酶解时间1 h,渗透压稳定剂在制备时使用0.7 mol/L KCl,再生时使用17%蔗糖,制备率为93.2%,再生率为14.5%。

链霉菌702原生质体的制备和再生条件研究

为了确定链霉菌702菌株原生质体制备和再生较优组合条件,以链霉菌702菌株为试验材料,试验设计以单因素和多因素多水平的正交试验。在单因素试验结果中探索该菌的对数生长期为35 h^50 h,在菌丝体培养基中添加1.0%甘氨酸有利于该菌原生质体制备和再生;正交试验分别以影响该菌原生质体制备和再生的菌丝体培养时间、溶菌酶使用浓度、酶解温度和酶解时间的四因素三水平的L9(34)正交试验,试验表明:链霉菌702菌株原生质制备和再生较优组合为A2B2C3D1,即菌丝体培养时间为43 h,溶菌酶浓度为2.0 mg/mL,酶解温度为37℃,酶解时间60 m in,原生质体的制备率和再生率分别达到96.5%和27.8%。本试验为该菌进一步进行原生质体诱变打下良好的基础。

基于响应面法的富油胶粉再生剂制备参数优化

为了研究不同制备参数下富油胶粉(ORR粉)再生剂的再生功效,采用响应面法建立了制备参数(制备温度、制备时间和胶粉掺量)与ORR粉再生沥青性能(针入度、软化点和10℃延度)的响应模型,优化了ORR粉再生剂的制备参数,探究了优化制备参数下ORR粉再生剂的性能及其再生功效。结果表明:制备温度、制备时间、胶粉掺量及其交互作用影响ORR粉再生剂对老化沥青的再生功效,单因素影响程度排序为:RP掺量>制备温度>制备时间。建议在224℃下将39%的胶粉(与WCO的质量比)与WCO共混61 min后制备ORR粉再生剂。此时,ORR粉再生剂基本满足RA-25型再生剂的技术要求,其可以显著软化老化沥青且有效恢复老化沥青的低温性能,但不明显削弱老化沥青的高温性能,使再生沥青达到70#基质沥青的性能水平。

热固性聚氨酯粉末物性参数的测定及应用

为获取热固性聚氨酯粉末离散元接触模型的关键物性参数,应用于废旧热固性塑料粉末混合再生制备的精确模拟计算。以120目的聚氨酯超细粉末为例,融合了Johnson-Kendall-Roberts(JKR)模型及其尺度变换准则,借助 MATLAB图像处理技术,利用 Minitab软件对关键物性参数:碰撞恢复系数、静摩擦因数、JKR表面能,进行了Box-Behnken试验设计,得到仿真试验的堆积角回归模型,以多次真实试验测定的堆积角均值38.45°为响应值,对回归模型进行接触参数寻优,获得关键接触参数的最佳组合为:碰撞恢复系数0.25,静摩擦因数0.69,JKR表面能 6.97 J/m 2 ,最后将仿真得到的堆积角与真实试验值进行对比验证,误差在5%以内,无显著性差异。结果表明,以堆积角为参照虚拟标定的热固性聚氨酯粉末接触参数是可行的;同时探究了接触参数应用于混合搅拌再生试验的混合效率可达到80.34%,研究成果为废旧热固性塑料再生材料的制备提供了理论依据。

原生质体法介导真菌遗传转化的研究进展

原生质体法介导真菌遗传转化体系是实现大规模随机、定点突变和菌种改良的方法之一,为研究真菌致病性和侵染机制奠定了基础。原生质体法构建转化体系的步骤包括原生质体的制备、转化与再生,其中关键是原生质体的制备,通常采用酶解法破除细胞壁获得原生质体,其获得率直接影响转化效率。转化通常借助于聚乙二醇(PEG)介导、电击或限制性内切酶法完成,其中PEG介导的原生质体转化法较传统,技术较成熟;电击法操作较简单;限制性内切酶(REMI)介导的整合转化,因其转化效率较高,可产生大量稳定的转化子,正被越来越多地应用于丝状真菌的遗传转化。

生防真菌寡雄腐霉原生质体的制备及再生

寡雄腐霉Pythium oligandrum是一种对动、植物和环境无害,兼具杀菌和增产效果的生防真菌。本研究以0.8mol/L甘露醇与25mmol/L CaCl_2和10mmol/L Tris-HCl作为渗透压稳定剂,使寡雄腐霉菌丝体在含有裂解酶、纤维素酶、破壁酶的复合酶系中酶解得到其原生质体。此原生质体通过液体振荡培养的途径恢复再生1d后涂于平板上可生长为成熟菌体。本研究所述方法制备得到的寡雄腐霉原生质体数量超过1×10~9CFU/m L,活性超过80%;通过液体培养再生途径使得寡雄腐霉原生质体再生率达32.9%。此方法操作简便,稳定性好,获得的寡雄腐霉原生质体品质高、数量多,完全能够满足后期基因遗传转化、细胞融合培养等研究应用。

紫外诱变原生质体选育溶菌酶高产菌株的研究

以1株产海洋溶菌酶活性较高的菌株(S-12-86)为原始菌株,对其原生质体的制备、再生及紫外诱变育种进行了研究。实验所确定的原生质体的最佳制备条件为:菌株S-12-86培养18h,溶菌酶浓度为1.0mg/ml,在35℃下,酶解30min,原生质体形成率为97.6%,再生率为23.6%。同时实验所确定的原生质体诱变的适宜条件为:30W紫外灯下80cm照射120s。对大量再生突变株进行筛选,最终获得了1株遗传性能稳定的菌株R-J-101,其产酶活力达到1808U/mg,比原始菌株(1290U/mg)提高了40%。

黏膜乳杆菌原生质体的制备与再生最佳条件的确定

为了对从瘤胃中分离并鉴定的黏膜乳杆菌原生质体的制备与再生的最佳条件进行确定,为黏膜乳杆菌的基因操作和原生质体融合做准备,试验从影响原生质体形成与再生的菌龄、酶浓度、酶解时间、酶解温度的四因素三水平上进行L9(34)正交试验。结果表明:黏膜乳杆菌原生质体制备与再生的最佳条件为菌体培养10 h,溶菌酶浓度为100μg/mL+变溶菌素5μg/mL,酶解温度为37℃,酶解时间为60 min,原生质体的制备率和再生率分别为98.3%和24.0%。

Research on Protoplast Preparation and Regeneration Conditions of Tremella aurantialba

[Objective] This study aimed to explore the protoplast preparation and re- generation conditions of Tremella aurantialba. [Method] Optimal combination of five factors affecting the protoplast preparation and regeneration of Tremella aurantialba was selected by using orthogonal experiment, including enzyme system, culture age, enzymolysis temperature, enzymolysis duration and osmotic stabilizer. [Result] The results showed that there were three release modes of Tremella aurantialba proto- plasts： release from top in the early period of enzymolysis, release from the side and release in situ. The optimal protoplast preparation condition was selecting mycelium cultured in liquid medium for 3 d, for enzymolysis in mixed enzyme solu- tion containing 1% of cellulase ＋1% of snailase ＋1% of lywallzyme at 36 ℃; for 4 h, with 0.6 mol/L sucrose as osmotic stabilizer, and the obtained preparation rate had reached 1.76 ×10^7 protoplasts/ml. The optimal regeneration condition was using mycelium cultured in liquid medium for 5 d, for enzymolysis in enzyme solution con- taining 1.5% of lywallzyme at 33 ℃ for 3 h, with 0.6 mol/L sucrose as osmotic sta- bilizer, and the regeneration rate had reached 0.22%. [Conclusion] This study provid- ed valuable support for protoplast fusion, ultraviolet mutation breeding and genetic engineering research.