再生基因4蛋白、特异性蛋白1在卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨再生基因4(REG4)蛋白、特异性蛋白1(SP1)在卵巢癌组织中的表达及临床意义。方法:选取2019年7月~2022年7月期间收治的卵巢癌(OC)患者60例,术后提取卵巢癌变组织和癌旁组织。采用免疫组织化学染色法检测REG4和SP1蛋白的表达情况,对比卵巢癌变组织和癌旁组织中REG4蛋白和SP1蛋白阳性情况,分析REG4蛋白和SP1蛋白在卵巢癌组织中表达与临床病理参数的相关性。结果:卵巢癌变组织REG4蛋白、SP1蛋白的阳性表达率为86.67%、71.67%高于癌旁正常组织的31.67%、16.67%(P<0.05)。不同年龄的OC患者的REG4和SP1阳性表达率无明显差异(P>0.05);病理分类中REG4阳性表达率从高到低依次为浆液性腺癌、子宫内膜样腺癌、粘液性腺癌、透明细胞癌(P<0.05),SP1阳性表达率从高到低依次为浆液性腺癌、粘液性腺癌、子宫内膜样腺癌、透明细胞癌(P<0.05);FIGOⅢ-Ⅳ期患者REG4和SP1阳性表达率高于FIGOⅠ-Ⅱ期患者阳性表达率(P<0.05);分化程度中REG4和SP1阳性表达率从高到低依次为低分化、中分化、高分化(P<0.05);淋巴转移患者REG4和SP1阳性表达率高于未淋巴转移患者阳性表达率(P<0.05)。结论:OC肿瘤组织中的REG4蛋白、SP1蛋白的阳性表达率均高于正常卵巢组织,并与病理分类、FIGO分期、分化程度、淋巴转移密切相关,对于OC的临床诊断及预后改善具有重要意义。

血清胃蛋白酶原与再生基因Ⅳ联合检验对胃癌早期诊断的应用价值

研究血清胃蛋白酶原和再生基因Ⅳ联合检验在胃癌早期诊断中的应用效果。方法 选择我院在2022年1月至2023年1月期间收治的20例胃癌及80例良性胃病患者,然后选取50例健康体检者(对照组),比较三组检测指标,分析血清胃蛋白酶原、再生基因Ⅳ、联合检测效能。结果 三组的检测指标对比(P<0.05)。联合检测效能高于单一检测(P<0.05)。结论 应用血清胃蛋白酶原与再生基因Ⅳ联合检验胃癌,检验效能以及应用价值高,值得推广。

小归芍化浊解毒方对胃癌前病变大鼠胃蛋白酶原及胃黏膜组织再生基因表达的影响

目的探讨小归芍化浊解毒方对实验性胃癌前病变(PLGC)的作用和机制。方法把100只大鼠随机分成为A(空白)组、B(模型)组、C(中药大剂量)组、D(中药小剂量)组、E(对照)组,各20只,除A组外,其余各组采用N-甲基-N-硝基N-亚硝基胍(MNNG)配合饥饱失常诱导造模。造模后A组正常喂养;B组予蒸馏水灌胃;C组按2 ml/kg予小归芍化浊解毒方大剂量混悬液灌胃;D组按2 ml/kg予小归芍化浊解毒方小剂量混悬液灌胃;E组将胃复春混悬液灌胃。测定血清胃蛋白酶原(PGI)及胃黏膜组织再生基因(RegI)的表达量。结果小归芍化浊解毒方大剂量组与胃复春组比较,能有效改善胃黏膜肠化和异型增生(P<0.05)。小归芍大小剂量组与胃复春组比较,能明显升高血清PGI含量(P<0.05)。小归芍化浊解毒方大剂量组与胃复春组比较,能明显降低RegI的表达水平(P<0.05)。结论小归芍化浊解毒方可能通过降低RegI的表达同时升高PCI的含量,逆转PLGC。

脊髓横断损伤后再生基因蛋白的表达

目的探讨再生基因蛋白(Reg-2)在脊髓横断损伤后表达的时序变化及其可能的意义。方法SD雌性大鼠45只,实验分为脊髓损伤组(30只)、假手术组(15只)。脊髓损伤组大鼠麻醉后于T9、T10脊髓节段之间用手术刀完全切断脊髓,建立大鼠脊髓横断损伤模型;假手术组大鼠只打开推板,不损伤脊髓,为阴性对照。分别于脊髓损伤后1h、1d、3d、7d1、4d用多聚甲醛灌注后,以T10节段为中心取出长约2cm的脊髓,制作冠状切面及横断切面冷冻切片。分别通过免疫组织化学、免疫荧光和Western blotting法检测Reg-2的表达水平及部位,并与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、少突胶质细胞系转录因子2(Olig2)以及神经肽Y(NPY)、降钙素基因相关肽(CGRP)、神经性生长蛋白-43(GAP-43)等神经细胞特异性标记物做双重标记。结果脊髓损伤组中,表达Reg-2的阳性细胞随着时间的推移,先增加后减少,脊髓损伤后的1周内维持在较高水平,其中第3d后角神经元的Reg-2表达最高,第7d前角神经元Reg-2的表达最高。结论Reg-2可能参与了脊髓损伤后早期的神经再生和重建进程。

人再生基因蛋白Ⅳ和细胞角蛋白18在胃癌患者血清中的表达及临床意义

目的探讨人再生基因蛋白Ⅳ（REGⅣ）和细胞角蛋白18（CK18）在胃癌患者血清中的表达及其在疗效监测中的应用价值。方法收集2008年5月-2010年7月在北京肿瘤医院消化肿瘤内科接受化疗的61例晚期胃腺癌患者及32例同期健康成年人的血清标本，采用ELISA法检测胃癌患者化疗前后以及健康对照者的血清REGIV、CK1871水平。所有化疗均为一线治疗，方案以氟尿嘧啶类药物为基础，联合铂类（顺铂或奥沙利铂）加或不加紫杉类的三药或两药联合方案，根据RECIST1．0标准行疗效评价，分为完全缓解（CR）、部分缓解（vR）、稳定（SD）和进展（VD）。结果胃癌组血清REGIV和CK18水平显著高于对照组[P〈0．01，REGIV5．15（2．14—22．55）ng／mlvs2．22（0．02～12．29）ng／ml，CK-18132．29（24．97～473．62）U／Lvs63．05（16．06—294．58）U／L]。在胃癌患者中，有淋巴结转移者的REGⅣ和CK18水平高于无淋巴结转移者（p〈0．05）。61例胃癌患者中，26例对化疗敏感（CR＋PR），35例不敏感（SD＋PD），这两类患者化疗前的REGIV、CK18表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。36例有化疗前后配对血清标本的患者中，CR＋PR患者14例，sD16例，PD6N，各类患者的REGIV、CK18表达水平在化疗前后差异无统计学意义（p〉0．05）。结论REGIV和CK18作为血清标志物对胃癌有一定诊断价值，但两者化疗前水平及化疗前后变化与晚期胃癌疗效无明显相关性。

再生基因Ⅳ在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的探讨再生基因Ⅳ(RegⅣ)在子宫内膜癌、不典型增生子宫内膜及正常子宫内膜组织中的表达情况,并分析RegⅣ与子宫内膜癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测138例子宫内膜癌组织、25例不典型增生子宫内膜组织、31例正常子宫内膜组织中RegⅣ蛋白的表达,并分析其表达与子宫内膜癌临床病理特征及预后的关系。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,采用Cox回归模型分析影响子宫内膜癌预后的独立因素。结果 RegⅣ在正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜、子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为9.7%(3/31)、32.0%(8/25)和60.1%(83/138),差异有统计学意义(P<0.05)。RegⅣ表达与子宫内膜癌患者的年龄、病理分期、组织学分级、肌层浸润深度及淋巴结转移相关(P<0.05),而与病理类型无关(P>0.05)。Cox多因素分析显示,RegⅣ表达是影响子宫内膜癌患者无病生存期的独立因素(P<0.05)。结论 RegⅣ可能在子宫内膜癌的发生、发展中起一定作用,并指导预后的评估。

胃腺癌组织再生基因蛋白Ⅳ的表达及临床意义

目的探讨再生基因蛋白Ⅳ(regenerating gene typeⅣ,RegⅣ)在胃腺癌发生发展中的可能价值及意义。方法采用S-P免疫组织化学技术测定63例胃腺癌及相应的癌旁正常组织中RegⅣ及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、Akt蛋白的表达;分析胃癌患者不同临床病理特征下RegⅣ、PI3K、Akt蛋白的表达差异,并分析胃癌组织RegⅣ蛋白与PI3K、Akt蛋白表达的相关性。结果 63例胃腺癌组织中RegⅣ、PI3K、Akt蛋白的阳性表达率为50.7%(32/63)、68.3%(43/63)、60.3%(38/63),均高于癌旁正常组织19.0%(12/63)、20.6%(13/63)、9.5%(6/63),差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤分化程度间RegⅣ蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05);不同肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移与否、临床分期间PI3K蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05);淋巴结转移与否胃癌组织Akt蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。胃腺癌组织中RegⅣ蛋白与PI3K、Akt表达正相关(rs=0.284、0.305,P<0.05),PI3K蛋白与Akt蛋白表达正相关(rs=0.423,P<0.05)。结论 RegⅣ高表达与胃腺癌发展相关,PI3K/Akt信号通路的激活可能参与其中。

大鼠脊髓损伤模型的改良及伤后再生基因-2蛋白的表达变化

目的:制备改良的大鼠脊髓损伤(SCI)动物模型,并探讨再生基因(Reg)-2蛋白在SCI后的表达规律。方法:采用36只SD大鼠。参考Allen法,使用自制打击装置致大鼠T13段脊髓中度损伤。以行为联合评分法(CBS)评定模型的可靠性。免疫印迹法和免疫组织化学(SABC)法对正常对照组、伤后第1天、第2天、第3天、第5天和第7天的大鼠脊髓组织中的Reg-2蛋白进行检测。结果:SCI后大鼠一般情况符合临床损伤特点,且稳定性强;各损伤组大鼠神经功能联合评分均呈明显下降趋势,与正常对照组比较差异具有显著性意义(P<0.05);在正常对照组大鼠脊髓神经元内有微量的Reg-2蛋白表达(阳性细胞数为17.3±2.6,Reg-2相对表达量为0.038±0.007)。SCI后1天,大鼠脊髓内Reg-2表达的免疫阳性细胞随着损伤时间的推移逐渐增多,至伤后第7天仍呈高水平表达(阳性细胞数为90.0±3.6,相对表达量为0.694±0.018),各组间比较差异具有显著性意义(P<0.05)。伤后3天内,Reg-2免疫阳性细胞以后角神经元为主,而伤后7天以前角神经元和胶质细胞为主。结论:本实验装置制作的大鼠SCI模型稳定、可靠;SCI后Reg-2蛋白表达开始升高,对受损神经起保护和修复作用。

血清胃蛋白酶原与再生基因Ⅳ联合检验对胃癌早期诊断的应用价值

目的探讨血清胃蛋白酶(PG)与再生基因Ⅳ(RegⅣ)联合检验在胃癌早期诊断中的临床价值。方法选取2015~2016年收治的400例胃病患者,根据病理检查的诊断结果分为胃癌组27例,良性胃病组373例,另选取同期健康体检100例作为对照组。对比观察各组患者血清PG、RegⅣ、CA19-9、CEA水平,分析PG与RegⅣ联合检测的诊断效能。结果胃癌组患者血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ水平明显低于良性胃病组和健康对照组(P<0.05);RegⅣ、CA19-9、CEA水平明显高于良性胃病组和健康对照组明显升高(P<0.05)。以病理诊断结果为金标准,PG与RegⅣ联合检测诊断胃癌的敏感度为85.19%、特异度为78.82%,均高于CA19-9联合CEA检测(P<0.05)。结论 PG与RegⅣ联合检测对于胃癌早期有较高的灵敏度与特异度,可以作为胃癌早期诊断的有效辅助指标。

再生基因蛋白Ⅳ、骨桥蛋白、表皮生长因子受体蛋白在胃腺癌中的表达及临床意义

目的研究再生基因蛋白(Reg)Ⅳ、骨桥蛋白(OPN)及表皮生长因子受体(EGFR)在胃腺癌中的表达及与其临床意义。方法应用S-P免疫组化技术检测65例胃腺癌及其相应的癌旁正常组织中RegⅣ、OPN、EGFR蛋白的表达。结果 65例胃腺癌组织中RegⅣ、OPN、EGFR蛋白的阳性表达率53.8%(35/65),63.1%(41/65),56.9%(37/65)均高于癌旁正常组织12.3%(8/65)、4.6%(3/65)、18.5%(12/65)(P<0.05)。RegⅣ蛋白的表达与胃癌分化程度相关有统计学意义(P<0.05),OPN蛋白的表达与浸润深度、肿瘤分化程度、临床分期相关有统计学意义(P<0.05),EGFR蛋白的表达与胃腺癌的浸润深度、淋巴结转移、临床分期相关有统计学意义(P<0.05)。RegⅣ、OPN与EGFR蛋白在胃腺癌组织中的表达呈正相关关系(P<0.05),RegⅣ与OPN蛋白在胃腺癌组织中的表达呈正相关关系(P<0.05)。结论 RegⅣ、OPN、EGFR蛋白均在胃癌组织中表达呈正相关,并在胃癌的发生发展发挥重要作用。

再生基因家族的研究

再生基因家族自1988年被发现以来,其在糖尿病、炎症创伤与肿瘤尤其在消化系统肿瘤中的作用日渐被重视。越来越多的该家族成员被发现,并已开始考虑在临床治疗中应用。这些研究开始显示再生基因家族的潜在应用价值。

大鼠不同程度脊髓损伤后再生基因蛋白-2的表达变化

目的比较大鼠不同程度脊髓损伤(SCI)后再生基因蛋白(Reg)-2的表达差异。方法 30只SPF级Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、轻伤组(致伤能量25 g·cm)、中度损伤组(50 g·cm)和重伤组(75 g·cm)。各损伤组大鼠采用自制打击装置建立SCI动物模型,并于伤后1、3、5和7 d采用联合行为评分(CBS)检查大鼠神经功能恢复情况。伤后7 d处死动物,取损伤节段脊髓组织,采用RT-PCR和免疫组织化学SABC法检测Reg-2 mRNA和Reg-2的表达。结果各损伤组大鼠CBS较正常组显著升高(P<0.05),并随损伤时间的延长而逐渐降低,各损伤组组内比较,差异具有统计学意义(P<0.05);Reg-2 mRNA表达量和Reg-2阳性细胞数在各损伤组均显著高于正常组(P<0.05),并且随损伤程度的加重而升高,各损伤组之间比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。轻伤组Reg-2阳性细胞以神经元为主,而在重伤组以神经胶质细胞为主。结论 SCI后Reg-2表达开始升高,其表达水平具有一定的损伤程度依赖性。

再生基因4(REG4)真核表达载体的构建及其蛋白在HEK293T细胞中的表达、纯化

目的构建再生基因4(regenerating gene 4,REG4)的真核表达载体,转染人胚肾细胞293T(human embryonic kidney 293T cells,HEK 293T),获得重组人再生胰岛衍生蛋白IV(regenerating islet-derived protein IV,Reg IV)。方法根据NCBI数据库REG4基因序列进行基因优化、合成,将其克隆至pCDNA3.4载体并进行双酶切和测序鉴定,通过转染试剂聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)将pCDNA3.4-REG4质粒瞬时转染至HEK 293T细胞(实验组),同时以pEGFP-C1质粒作为转染对照组,未转染重组质粒的HEK 293T细胞作为空白对照组。荧光显微镜观察转染对照组转染效率,分别收集实验组及空白对照组细胞和细胞培养液上清,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)与免疫印迹试验(Western-Blot,WB)检测Reg IV蛋白表达水平。通过镍柱及丙烯葡聚糖凝胶S-400(Sephacryl S-400)柱进行蛋白纯化,SDS-PAGE及WB对纯化后重组蛋白进行鉴定。结果经测序和双酶切鉴定,重组质粒pCDNA3.4-REG4构建成功。转染对照组(pEGFP-C1质粒)荧光显微镜观察结果显示转染效率约50%,表明转染成功。WB结果显示仅在实验组(pCDNA3.4-REG4质粒)的细胞中检测到RegIV蛋白。镍柱纯化时目的蛋白无法与镍柱填料有效结合,SephacrylS-400凝胶柱层析纯化获得了此重组蛋白。结论成功构建了REG4基因真核表达载体并在HEK 293T细胞中成功表达,为深入研究Reg IV蛋白的作用机理及开发潜在的抗癌靶向药物奠定了基础。

再生基因家族与消化系统肿瘤

再生基因家族自1988年被发现以来,其在糖尿病、炎症创伤和肿瘤尤其是消化系统肿瘤中的作用越来越受到重视.目前,越来越多的再生基因家族成员被发现.随着相关研究的逐步深入,再生基因家族在肿瘤中所起的重要作用,尤其是RegⅣ在消化系统肿瘤中作用越来越引起人们的注意.

再生基因家族在消化道肿瘤中的研究进展

再生基因（regenerating gene，Reg）自1988年由Terazono等在老鼠再生胰岛β细胞中首次发现后，其家族成员陆续被发现表达于人类多种组织中，其在糖尿病、炎症、创伤和肿瘤尤其是消化道肿瘤中的作用越来越受到重视。近年来国内外学者研究发现Reg基因及其蛋白表达与恶性肿瘤尤其是消化道肿瘤的发生发展、生物学行为和预后有密切的关系。现就Reg基因及其蛋白表达等方面的国内外研究进展加以综述。

再生基因Ⅳ联合血清胃蛋白酶原检测对胃癌的诊断价值

目的探讨再生基因Ⅳ联合血清胃蛋白酶原表达水平对胃癌早期诊断价值。方法研究自2018年11月-2019年12月之间,选取本院收治的胃癌患者40例作为试验组,另选取同期本院健康志愿者共40例作为对照组,对两组患者行血清胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)、再生基因Ⅳ(regeneration genes-Ⅳ,RegⅣ)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)及糖蛋白抗原199(carbohydrate antigen 199,CA19-9)水平检查,对比两组患者血清表达水平。结果试验组患者的PGⅠ、PGⅡ、Reg Ⅳ、CA199、CEA表达水平和对照组患者差别显著,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论再生基因Ⅳ联合血清胃蛋白酶原对胃癌患者早期有着较高的检出率,能够给临床提供有价值的信息。

再生基因4(RegⅣ)的原核表达、蛋白结构复性及纯化

目的:构建再生基因4(Reg Ⅳ)的原核表达载体,获得重组人Reg Ⅳ蛋白。方法:将已构建好的pEGFP-C1-Reg Ⅳ质粒进行酶切纯化获得目的基因,并构建到pET-30a原核表达载体上,经测序鉴定后将序列正确的重组质粒转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定,并用凝胶层析对表达产物进行复性纯化。结果:构建了pET-30a-Reg Ⅳ原核表达重组质粒,IPTG诱导表达出约22KD的重组蛋白,表达产物经复性纯化后获得纯度较高的目的蛋白。结论:成功构建了Reg Ⅳ原核表达载体,并成功表达了重组人Reg Ⅳ蛋白。

血清胃蛋白酶原与再生基因Ⅳ联合检验对胃癌早期诊断的应用价值

目的探讨血清胃蛋白酶原(PG)与再生基因Ⅳ(RegⅣ)联合检验对胃癌早期诊断的价值。方法选择该院收治的胃部病变患者216例,分别检测血清PGⅠ、PGⅡ、RegⅣ、CEA和CA19-9水平。结果 216例胃部病变者经活检检查发现胃癌患者18例(胃癌组),良性胃病患者198例(胃病组)。胃癌组血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ均显著低于良性胃病组和对照组(体检健康者100例),良性胃病组血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组RegⅣ、CEA和CA19-9均显著高于良性胃病组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清PG联合RegⅣ检测胃癌的敏感性为83.3%,特异性为78.2%。血清CEA联合CA19-9检测胃癌的敏感性为55.6%,特异性为59.1%。PG与RegⅣ联合检验敏感性、特异性均显著高于CEA与CA19-9联合检验,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PG与RegⅣ联合检验具有较高的灵敏性和特异性,对于胃癌早期诊断具有较高的辅助诊断价值。

再生基因蛋白4对早期胃癌辅助诊断价值的临床研究

胃癌是消化系统常见的恶性肿瘤[1-2]。胃镜下直视取检是诊断胃癌的可靠方法,但这属于有创检测,无明显症状的患者往往依从性较低[3]。再生基因蛋白4（Reg4）与胃癌的发生发展相关,且作为外分泌蛋白可在外周血中检测到[4]。本研究分析Reg4对早期胃癌的诊断价值,现报告如下。1资料与方法1.1一般资料选取2013年1月—2015年1月在本院接受诊疗的55例早期胃癌患者为观察组。

血清胃蛋白酶原与再生基因Ⅳ联合检验对胃癌早期诊断的应用价值

目的探讨胃癌早期诊断采用血清胃蛋白酶原(PG)与再生基因Ⅳ(RegⅣ)联合检验的临床应用价值。方法入选我院符合标准的胃部病变患者200例,均实施血清PG、CEA和CA19-9检测。选取同期健康人群200例为对照组,对胃癌患者实施PG联合RegⅣ检验、血清CEA联合CA19-9检验两种检验方法,观察两种检查的结果。结果200例患者中,胃癌患者20例,其中胃癌组患者的血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ水平均显著低于对照组和良性组,良性组血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ水平显著高于对照组,胃癌组患者的RegⅣ、CEA和CA19-9水平均显著高于对照组和良性组,血清PG联合RegⅣ检验胃癌患者的敏感性72.1%和特异性78.3%显著优于血清CEA联合CA19-9检验的55.7%和59.2%,结果具有统计学差异(P<0.05)。结论 PG与RegⅣ联合检验,具有较高的特异性和灵敏性,对临床早期诊断胃癌具有较高的辅助诊断价值。