内耳异位再生毛细胞的ADF/destrin发育表达及其作用机制

目的探究内耳异位再生毛细胞中ADF/destrin发育表达及其作用机制。方法采用免疫荧光染色等工具分析正常发育阶段参与此次研究的小鼠内耳不同部位ADF/destrin分布及其表达情况,再结合ADF/destrin敲除小鼠的表型,确定ADF/destrin在小鼠内耳异位细胞中的作用机制。结果在胚胎E14.5时,ADF/destrin处于上半规壶腹感觉上皮的毛细胞及其周边支持细胞中表达;在小鼠胚胎于E18.5时,大部分ADF/destrin存在上半规管壶腹支持细胞中;正常小鼠刚出生1 d时,ADF/destrin在上半规管壶腹感觉上皮和支持细胞表皮板均有所表达;正常小鼠再出生4 d时,dADF/destrin和r-tubulin主要出现在支持细胞中;dADF/destrin在小鼠内耳毛细胞体外诱导分化体系中的表达,结果发现dADF/destrin的表达随着支持细胞表达的增加而增加;与正常小鼠相比,dADF/destrin敲除小鼠体积更小,发育迟缓,且内耳结构也有一定的絮乱。结论dADF/destrin在小鼠内耳异位再生毛细胞的发育过程中具有重要作用。

雏鸡耳卡那霉素中毒后耳蜗再生毛细胞超微结构的动态观察

目的 探讨鸟氨基苷类药物中毒后耳蜗再生毛细胞超微结构的变化与听功能恢复的关系。方法 将雏鸡连续肌注卡那霉素 [2 0 0mg (kg.d) ]10d ,分别于开始给药后第 8天、药毕后第 1、7、10、15、2 1、3 0天时处死 ,采用透射电镜观察其耳蜗再生毛细胞超微结构的动态变化。结果 在开始给药后第 8天时 ,可观察到一些再生毛细胞前体。药毕 10天时 ,再生毛细胞的外形及纤毛的阶梯形排列已成熟。至药毕 2 1天时 ,表皮板、囊泡、高尔基体、核糖体、线粒体等亚细胞结构也与正常对照类似。结论 鸟卡那霉素中毒后耳蜗再生毛细胞形态结构的迅速成熟 ,可能是其听功能得以迅速恢复的一个重要基础。

卡那霉素损伤后雏鸡耳蜗再生毛细胞超微结构的连续动态观察

目的探讨药物损伤后鸟类耳蜗再生毛细胞超微结构的变化与听功能恢复的关系。方法将雏鸡连续肌注卡那霉素10天,分别于开始给药后第8天、药毕后第1、7、10、15、21、30天时处死,采用透射电镜观察其基底乳头再生毛细胞超微结构的动态变化。结果在开始给药后第8天时,可观察到一些再生毛细胞前体。药毕10天时,再生毛细胞的外形及纤毛的阶梯形排列已成熟,至药毕21天时,表皮板、囊泡、高尔基体、核糖体、线粒体等亚细胞结构亦与正常对照类似。结论再生毛细胞形态结构的迅速成熟可能是鸟类听功能得以迅速恢复的一个重要基础。

Hippo信号通路对毛细胞损伤及再生的研究进展

Hippo信号通路在进化上高度保守,对控制细胞增殖及分化、调控组织大小、损伤修复等过程起重要作用。研究发现,Hippo信号通路在毛细胞中表达,该通路主要成员的活性和表达可调控毛细胞内炎症因子的表达、氧化物水平、毛细胞增殖等过程。哺乳动物中,毛细胞损伤后可导致不可逆性感音神经性听力损失。在减少毛细胞损伤基础上,诱导支持细胞和感觉上皮细胞增殖和转分化,以及干细胞转化,从而实现毛细胞再生,是目前感音神经性听力损失的治疗策略。本综述对Hippo信号通路在毛细胞损伤及再生中发挥作用的研究进行梳理,以期为实现毛细胞再生提供新思路。

鸡卡那霉素中毒后EphrinA2蛋白表达与耳蜗毛细胞神经连接再生及重塑的关系

目的探讨EphrinA2在鸡卡那霉素中毒后耳蜗毛细胞神经连接再生及重塑过程中的作用。方法66只新生罗曼鸡为实验对象。试验组48只,于生后3d开始连续肌注卡那霉素200mg·kg-1.d-1,共用10d,设施药完毕前2d、完毕后1、3、7、15、21、30、60d8组。对照组18只,设3、13、43d龄3组,不施与任何药物。所有动物按预定时间点处死,取听神经行Western印迹分析,处死前均作ABR测试。结果对照组动物各时间点Eph-rinA2蛋白表达量基本一致。施药完毕前2d及施药完毕后1d时,试验组动物听神经组织中EphrinA2蛋白表达较对照组明显降低,施药完毕15d后,EphrinA2蛋白表达明显升高,施药完毕30d时,EphrinA2蛋白表达已与对照组基本相同。同时,实验组用药10天后ABR阈值达116.3±4.3dBSPL,停药后3、7、10天时分别为112.0±5.2、101.5±4.3、94.3±4.8dBSPL,10天后无变化。结论鸡卡那霉素耳中毒后听神经组织中EphrinA2蛋白的表达与其耳蜗毛细胞神经连接的再生及重塑基本同步,提示EphrinA2在鸡卡那霉素耳中毒后耳蜗毛细胞神经连接的再生及重塑中可能有重要作用。

小白鼠前庭毛细胞再生研究

本实验以小白鼠为对象，利用组织培养的方法，观测新霉素对前庭毛细胞破坏的超微结构特征及毛细胞数定量分析，探讨培养条件下毛细胞破坏后能否再生及再生细胞的形态特征及时间过程。一、材料和方法１．取材：生后１５ｄ的昆明鼠６０只，雌雄兼用，上海医科大学实验动物中...

听觉损伤后毛细胞再生与聋病基因治疗策略

听觉损伤可引起耳蜗毛细胞和听觉神经元的不可逆性损伤,从而导致永久性的感音神经性耳聋。虽然内耳所独具的结构是基因治疗非常独特和重要的靶器官,但能否实现损伤后毛细胞的再生是其前提条件。国内外研究者们做了大量的探索并取得重要突破,从非哺乳动物到哺乳动物毛细胞再生,从前庭毛细胞到耳蜗毛细胞再生,从未成熟期到成年期毛细胞再生,从离体培养毛细胞再生到在体毛细胞再生,整整经历了近半个世纪。但是毛细胞的再生并不等同于听力完全恢复。针对内耳基因治疗时间窗问题,我们根据听觉损伤后不同的病理状态,提出听觉损伤后毛细胞再生和基因治疗的基本策略:(1)毛细胞纤毛损伤阶段,是基因治疗的最好时机,通过完全修复或纤毛再生达到功能的完全或部分恢复;(2)内耳毛细胞虽有损伤但没有坏死,支持细胞和神经纤维基本正常,所以有恢复形态和功能的机会,这个阶段导入Math1基因应该有效,是基因治疗的最关键时机;(3)毛细胞严重损伤但支持细胞尚存,是毛细胞再生的抢救阶段,而且还可以争取在Corti器细胞构架没有塌陷之前进行干细胞导入,所以这个阶段内细胞移植可能有效地实现听力恢复;(4)Corti器完全失去构架,仅仅残留上皮层或瘢痕化,基因导入完全无效,即使干细胞导入也会面临困难,如何重塑Corti器构架是巨大挑战。为了实现耳聋基因治疗临床应用的可能性,我们还探索了最有效简便的外源基因内耳导入方式以及高效安全可靠的基因载体比如纳米载体的研发。毛细胞再生研究已经取得突破性进展,但还面临诸多挑战。通过不懈的努力,聋病基因治疗的最终临床应用一定会实现。

庆大霉素损害鸡耳蜗后毛细胞再生的超微结构及其与听功能恢复的关系

给实验组鸡按50mg／（kg·d）剂量肌注庆大霉素共10d后，间隔1、3、6、9和12d对实验组和对照组鸡耳蜗电位（Ap）及听觉脑干诱发电位（ABR）进行测定，随后处死动物，用透射电镜（TEM）和扫描电镜观察鸡基底乳头（BP）毛细胞再生的超微结构和过程，结果可见毛细胞再生来源于Bp表层扁平状或立方形上皮细胞，在早期再生毛细胞胞质密度高，含有大量的线粒体，随后静纤毛长出，细胞核出现，表皮极发育成熟时静纤毛束形成，其毛细胞底部的神经末梢已长出，此时伴有Ap和ABR阈值的恢复。说明再生毛细胞形态成熟时已具有听觉功能的恢复，再生毛细胞在受损耳蜗听功能的恢复过程中起主要作用。

顺铂对化疗患者听功能的影响:引起细胞凋亡和毛细胞再生及移植的机制与进展

顺铂是临床上常用的抗癌药之一,由于其较强的耳毒性而限制了用量,影响化疗后患者的生活质量。为探索顺铂引起细胞凋亡的机制和毛细胞再生、移植等最新防治方法的研究进展,综述了近年来有关顺铂耳毒性的表现和可能机制及其防治方法。

内耳毛细胞再生的前体细胞及其发育调控基因

自从在鸟类等非哺乳脊椎动物中发现毛细胞再生现象至今已有20年，人们对毛细胞再生的研究也取得了丰硕的成果，而且有可能从试验性研究向临床应用性研究发展。目前对内耳毛细胞再生方面的研究．尤其是再生毛细胞的前体细胞和再生机制的探讨日益增多。

内耳毛细胞再生及其信号通路的研究进展

噪声暴露、环境因素、药物毒性或年龄老化等均可导致耳蜗毛细胞损伤,并继发螺旋神经节细胞损伤,成年哺乳动物毛细胞损伤后无自发再生能力可导致永久性的感音神经性聋[1~3]。近年来国内外学者对于激活内耳相关通路、诱导内耳感觉前体细胞(部分具有增殖能力的支持细胞亦称感觉前体细胞)或干细胞重新进入细胞周期,增殖、分化为毛细胞,使听力或前庭功能恢复的研究成为热点[4],毛细胞再生有望成为听力恢复的理想治疗方法。本文就内耳毛细再生及其信号通路等研究进行综述。

高强纯音声损伤鸡耳蜗后毛细胞再生研究

本文报告给２天日龄雏鸡每日１．５ｋＨｚ１２０ｄＢＳＰＬ高强纯音暴露８小时，共刺激６天；随后分０．１、２和３周处死动物，其耳蜗基底乳头（Ｂｐ）行扫描电镜（ＳＥＭ）和光镜（ＬＭ）观察，结果发现１．５ｋＨｚ强纯音仅造成鸡Ｂｐ基部至中部内侧较窄范围毛细胞损害，毛细胞消失率占３０％左右；当恢复１周后，受损处毛细胞迅速再生，至恢复２周后Ｂｐ基本正常。证明高强度纯音损害鸡内耳后受损区毛细胞有再生能力，再生毛细胞发育成熟而使Ｂｐ恢复正常形态。

庆大霉素和窄带白噪声对鸡耳蜗损害后毛细胞再生形式研究

本文报告用庆大霉素（ＧＭ）和窄带白噪声（ＮＢ）联合作用对鸡耳蜗损害后观察毛细胞再生的组织形态。ＧＭ＋ＮＢ损害鸡内耳６天后，可见鸡耳蜗基底乳头（ＢＰ）基部至中上部有广泛的毛细胞消失，病理改变有三种形式：（ｌ）空洞变形；（２）毛细胞崩溃消失；（３）支持细胞转化。损害后一周再生毛细胞发育成熟、数目增多；两周后再生毛细胞已生长旺盛，完全成熟，说明鸡耳蜗毛细胞有较强的再生能力。

庆大霉素中毒后雏鸡耳蜗毛细胞再生和表皮生长因子的促再生作用

目的:观察雏鸡庆大霉素(GM)中毒后耳蜗毛细胞的再生及表皮生长因子(EGF)对其再生的影响.方法:给雏鸡注射GM10d,其后再注射EGF5d,分别用光镜、扫描电镜及透射电镜观察耳蜗基底乳头(BP)形态学变化;用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色观察BP细胞增殖.结果:停用GM后1d,BP毛细胞损失平均约51%,毛细胞形态不规则,线粒体和表皮板肿胀,细胞自溶破坏.停用GM后5d,支持细胞表面增宽,中间出现小的表皮板和短的听毛,此为新的毛细胞.14d新生毛细胞形态规则,21d发育成熟,BP形态接近正常.PCNA阳性细胞主要是支持细胞和透明细胞.EGF组毛细胞再生活跃,PCNA阳性细胞核明显增多.停用GM后10d,毛细胞数明显比GM组多,14dBP形态接近正常.结论:GM耳中毒的雏鸡耳蜗毛细胞可以再生;再生的毛细胞可能来源于支持细胞和透明细胞;EGF可促进这一过程.

哺乳动物和人的内耳毛细胞再生研究

继近年来证实了恒温动物鸟类内耳毛细胞在胚胎发生后有形成新的毛细胞能力后,今年又进一步发现哺乳动物甚至人的内耳前庭毛细胞和耳蜗毛细胞在受损后也有再生能力,无疑这对防聋治聋等研究将有重大的现实意义。本文就有关这方面的工作进展进行了综述。

哺乳类动物内耳毛细胞的分化和再生

哺乳动物内耳毛细胞的分化与再生是近年来听觉研究领域内重要热点课题。它的研究使人类感音神经性聋的治疗见到了新的曙光。本文对哺乳类动物内耳毛细胞再生的发现,前体细胞的来源,再生途径和调控等方面的研究进展作一综述。

内耳毛细胞再生

冷血类脊椎动物胚胎后毛细胞再生已被认识几十年了。目前研究工作主要集中在再生毛细胞前体的来源和激发毛细胞再生的启动机制。初步研究表明这种修复性增殖也可发生在哺乳动物内耳。直接刺激毛细胞再生及移植活的毛细胞最终可能成为治疗人内耳损伤的方法。