P物质在再生视网膜节细胞中的表达及IBMX和CPT-cAMP对其表达的影响

采用金黄地鼠视神经切断并缝接坐骨神经的再生实验模型,玻璃体内注射IBMX或/和CPT-cAMP,荧光金逆行标记再生的RGCs结合P物质免疫荧光组化双标法,研究外周神经缝接于视神经断端能否促进P物质阳性的视网膜节细胞(RGCs)再生及IBMX或/和CPT-cAMP处理对其再生的影响。实验结果:①术后四周,对照AG组每个视网膜 再生RGCs数1329±104,双标细胞平均数为45±5,占再生RGCs总数的3.4％;②AG+IBMX组每个视网膜再生RGCs数为2099±419,再生P物质阳性节细胞平均数为119±22,占再生RGCs总数的6.55％;③AG+cAMP组每个视网膜再生RGCs数为2048±133,再生P物质阳性节细胞平均数为127±37,占再生RGCs总数的6.15％;④AG+IB-MX+cAMP组每个视网膜再生RGCs数为4370±487,再生P物质阳性节细胞平均数为339±72,占再生RGCs总数的7.98％,与对照组的差异具有统计学意义。表明成年哺乳动物P物质阳性RGCs能再生,玻璃体内注射IBMX或/和CPT-cAMP可以促进该类RGCs再生。

福斯可林和3-异丁基-1-甲基黄呤嘌对成年金黄地鼠视网膜节细胞再生的影响

目的 :探讨福斯可林 (forskolin)或 /和 3 异丁基 1 甲基黄呤嘌 (IBMX)玻璃体内注射对视网膜节细胞再生的作用。材料和方法 :采用逆行示踪标记术 ,研究外周神经缝接的对照组和外周神经缝接后 ,玻璃体内注射forskolin和 /或IBMX的实验组视网膜节细胞再生情况。结果 :(1 )对照组 (AG)术后 4、6周 ,每个视网膜再生的节细胞数分别为 :1 2 60± 1 3 7个和 95 7± 1 75个 ;(2 )在上述两个时间点上各实验组每个视网膜再生的节细胞数分别为 :①forskolin组 (AG +F) :1 80 3± 64 8个和 1 0 68± 3 88个 ;②IBMX组 (AG +I) :2 2 84± 1 0 0 5个和 1 0 0 2± 1 5 7个 ;③forskolin和IBMX联合应用组 (AG +I+F) :480 4± 3 75个和 3 1 61± 60 5个 ;其中 ,AG +I+F组同AG ,AG +F ,AG +I组相比在这两个时间点上均存在显著性差异 (P <0 .0 0 1 )。结论 :研究结果提示联合应用forskolin和IBMX可大幅提高视网膜节细胞的再生。

骨髓间充质干细胞对成年大鼠视网膜节细胞再生的影响

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对受损成年大鼠视网膜节细胞(RGCs)轴突再生的影响。方法:切断大鼠视神经,缝接自体坐骨神经(AG)。动物分对照组、AG+MSCs组、AG+MSCs+tPNS(三七总皂苷)组。各组动物存活3、4周,用粒蓝逆行标记再生的RGCs,荧光镜下观察视网膜平铺片中再生RGCs的数量变化。免疫组化检测MSCs在玻璃体内的分化。结果:动物存活3、4周,再生的RGCs数目实验组与对照组有显著性差异。AG+MSC组和AG+MSCs+tPNS组,存活的细胞表达Vimentin、NF和GFAP,Laminin无表达。结论:玻璃体植入MSCs可促进受损伤的视网膜节细胞轴突再生。

CPT-环磷酸腺苷对视网膜节细胞再生的影响

目的 探讨玻璃体内插入外周神经和玻璃体内注射CPT 环磷酸腺苷对轴突损伤的视网膜节细胞再生的影响。 方法 2 0只成年金黄地鼠随机分 4组 ,每组 5只。切断视神经 (ON)并缝接坐骨神经为再生对照组(attachedgraft,AG) ;ON切断并缝接坐骨神经后再于玻璃体内注射CPT cAMP和 或插入一小段自体坐骨神经 (SN)为实验组。采用逆行示踪标记术 ,观察视网膜平铺片节细胞数。 结果 1 对照组 (AG) ,视网膜再生的节细胞数为 :142 8± 2 84个 ;2 外周神经组 (AG +SN) :每个视网膜再生的节细胞平均数为 2 2 2 0± 415个 ;3 CPT cAMP组 (AG+cAMP) :每个视网膜再生的节细胞平均数为 2 175± 36 4个 ;4 外周神经和CPT cAMP联合组 (AG +cAMP +SN) :每个视网膜再生的节细胞平均数为 42 5 5± 82 0个 ;其中 ,AG +SN、AG +CPT组同AG组相比存在差异显著性 (P <0 0 1) ;AG +CPT +SN组同AG、AG +CPT和AG +SN组相比均有差异显著性 (P <0 0 1)。 结论 研究结果提示玻璃体内注射CPT +cAMP或联合应用外周神经和CPT cAMP可大幅提高受损视网膜节细胞的再生。