血清干扰素γ诱导蛋白10和甘露糖结合凝集素在再生障碍性贫血和骨髓增生异常综合征患者中的含量及临床意义

目的探讨血清干扰素γ诱导蛋白10(IP10)和甘露糖结合凝集素(MBL)在再生障碍性贫血(AA)和骨髓增生异常综合征(MDS)患者中的含量及临床意义。方法选取2019年1月至2021年6月在昆山市第三人民医院初诊的26例AA患者(AA组)和42例MDS患者(MDS组)作为观察组,另选取30名健康体检者作为对照组。检测并比较两组血清IP10和MBL水平,分析两组血清IP10与MBL的相关性,比较两组不同淋巴细胞亚群比例及CD4^(+)、CD8^(+)淋巴细胞比值。结果AA组和MDS组血清IP-10水平均高于对照组,血清MBL水平均低于对照组,且AA组血清IP-10水平高于MDS组,AA组血清MBL水平低于MDS组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson线性相关分析结果显示,两组血清IP-10与MBL均呈负相关性(r<0,P<0.05)。AA组外周血总CD3^(+)T淋巴细胞比例高于MDS组,差异有统计学意义(P<0.05);两组外周血CD3-CD16+/CD56+NK淋巴细胞比例和CD19+B淋巴细胞比例比较差异无统计学意义。AA组CD3^(+)CD8^(+)T淋巴细胞比例高于MDS组,而CD4^(+)/CD8^(+)比值低于MDS组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过检测患者血清IP-10和MBL水平,以及分析外周血T淋巴细胞亚群CD4^(+)/CD8^(+)比值,有助于为AA及MDS的发病机制、早期鉴别诊断等方面提供更有价值的信息。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在再生障碍性贫血患者中的表达及意义

目的通过检测再生障碍性贫血(AA)患者骨髓单个核细胞表面肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的表达,探讨TRAIL在AA造血干细胞凋亡中的作用。方法采用流式细胞术对12例AA患者(AA组)、11例AA治疗后缓解患者(缓解组)、12例正常对照者(对照组)骨髓单个核细胞表面TRAIL的表达进行检测。结果 AA组、缓解组、对照组TRAIL均有表达;AA组TRAIL的阳性表达率(5.8±3.3)%高于缓解组(2.4±2.0)%和对照组(3.2±2.2)%(P<0.05);缓解组与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TRAIL在AA患者骨髓单个核细胞表面的表达阳性率增高,提示TRAIL介导的细胞凋亡可能在AA的发病机制中发挥一定的作用。

慢性再生障碍性贫血治疗前后骨髓细胞组织化学及超微结构的动态研究

通过对35例慢性再生障碍性贫血(CAA)患者应用不同方案治疗前后骨髓细胞糖原、细胞色素氧化酶(CCOase)和中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)的显微分光图像分析仪定量分析和超微结构研究,支持了本病是由于骨髓微环境与造血干细胞损伤而引起的学说。同时,对体内酶系统紊乱导致CAA发病过程作了初步阐明,从而提出CAA发病机制新假说。

联合应用苯与白消安建立大鼠急性再生障碍性贫血模型

目的建立大鼠急性再生障碍性贫血模型。方法Wistar大鼠36只随机分为5组。苯组（n=6）每次皮下注射苯0．5ml／kg，每周3次，共5周；白消安组（n=6）每周1次白消安15mg／kg灌胃，共5周；苯白5周组（n=12）每次皮下注射苯0．5ml／kg，每周3次，同期白消安15mg／kg灌胃，每周1次，均应用5周；苯白3周组（n=6）前3周实验内容同苯白5周组；空白对照组（n=6）不予特殊处理。实验过程中观察大鼠一般情况的变化，患病率和死亡率，检测血细胞数、骨髓有核细胞计数和造血器官的病理形态。结果苯白5周组急性再生障碍性贫血的患病率为100％，死亡率为100％，平均存活时间为（43．5±6．9）d。各项血液学参数呈渐进性减低，停药后1-3周降至最低，直至死亡。病理形态学观察：骨髓脂肪化，脾脏、淋巴结等淋巴器官组织明显萎缩，肝、脾无髓外造血灶。苯组、白消安组血细胞数计数有不同程度减低，但未达再生障碍性贫血标准。结论苯与白消安联合应用5周可建立较理想的造血干细胞衰竭型急性再生障碍性贫血模型。

泛T淋巴细胞结合照射诱导的再生障碍性贫血小鼠模型的优化

目的:建立适用于研究T淋巴细胞功能的获得性再生障碍性贫血(acquired aplastic anemia,AA)动物模型以及应用于再生障碍性贫血发病机制及治疗研究的动物模型。方法:对X射线联合淋巴细胞注射诱导的获得性再生障碍性贫血小鼠模型进行优化。AA组:富集C57BL/6J小鼠的脾脏泛T细胞,按细胞数5×10^(6)/只经尾静脉注射至分别经3、4和5 Gy X射线照射的CB6F1小鼠体内;单纯照射组(total body irradiation,TBI):经尾静脉注射与AA组相同体积的PBS至分别经3、4和5 Gy X射线照射的CB6F1小鼠体内;对照组:经尾静脉注射与AA组相同体积的PBS至CB6F1小鼠体内;检测外周血血常规,计数骨髓有核细胞数,骨髓病理切片检测骨髓造血,流式细胞术检测骨髓T细胞分布比例、骨髓细胞凋亡和脾脏T细胞的分化程度。结果:相较于4、5 Gy照射的AA组,3 Gy照射的AA组生存期明显延长;经3、4、5 Gy X射线照射联合泛T淋巴细胞注射均可成功诱导受体鼠外周血红细胞、白细胞、血小板数严重减少,骨髓有核细胞严重减少,骨髓造血衰竭,骨髓中T淋巴细胞占比明显增加,CD4^(+)T和CD8^(+)T细胞均增加但以CD8^(+)T细胞为主,并促进T细胞从初始T细胞向效应记忆T细胞分化。结论:3、4和5 Gy X射线的照射联合5×10^(6)泛T细胞注射均可通过引起T淋巴细胞功能亢进,成功构建AA动物模型;较4、5 Gy照射剂量,3 Gy照射组生存期明显延长,外周血血象与AA临床患者表现更接近。

再生障碍性贫血小鼠造模方法

目的探讨再生障碍性贫血(AA)小鼠造模方法。方法三次造模分别采用:免疫介导法:小鼠经6.0 Gy60Coγ射线亚致死量全身照射后,由尾静脉输入DBA/2小鼠的胸腺、淋巴结混合细胞悬液1×106个细胞/0.2 ml/只。混合方法:小鼠一次全身3.0 Gy60Coγ射线照射后,分别在第4、5、6天腹腔注射环磷酰胺50.0 mg/kg及氯霉素62.5 mg/kg。化学方法:用苯+玉米油,背部皮下注射,3次/w,共注射15次。同时腹腔注射环磷酰胺溶液(50 mg/kg),每日1次共7次。结果免疫介导法造模后模型小鼠在15 d内除1只小鼠外全部死亡;混合方法造模,模型小鼠骨髓活检提示造模失败;化学方法造模,造模成功,模型维持时间长。结论免疫介导和混合方法造模速度快,对模型小鼠骨髓抑制明显,与临床急性AA接近;化学方法造模周期长,模型小鼠骨髓抑制较轻,与临床慢性AA接近。

三氧化二砷调控再生障碍性贫血患者BM-MSC成脂/成骨分化异常的实验研究

本研究旨在探讨三氧化二砷(As2O3)对再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)患者骨髓间充质干细胞(BM-MSC)成脂与成骨分化失衡的调控作用。分离纯化AA患者BM-MSC,分别置于成脂与成骨诱导分化培养体系,在相应培养体系中分别加入As2O3、环孢霉素A(Cs A)、As2O3联合Cs A及不加药,As2O3的药物浓度为0.001μmol/ml,Cs A的药物浓度为2.5 mmol/ml。将细胞相应分为As2O3组、Cs A组、联合组和对照组,采用细胞形态学观察、油红O染色、Von-Kossa染色及RT-PCR等检测方法,检测相应分化标志。结果显示,在向成脂诱导分化方面,As2O3组的脂肪细胞分化率为(18.3±1.9)%,低于Cs A组的(91.8±2.7)%及对照组的(92.1±1.2)%(P<0.05),而与联合组的(8.3±1.9)%相比,则未见明显差异(P>0.05),但Cs A组的脂肪细胞分化率要高于联合组(P<0.05),Cs A组与对照组相比则未见明显差异。RT-PCR检测结果显示,As2O3组的LPL-mRNA表达水平分要低于Cs A组及对照组(P<0.05),而与联合组相比,则未见明显差异(P>0.05),但Cs A组的LPL-mRNA表达水平分要高于联合组(P<0.05)。通过Von-Kossa染色检测发现,在成骨诱导培养14 d后,在As2O3组、联合组可见明显钙盐沉积,而Cs A组及对照组则未观察到明显钙盐沉积现象。RT-PCR检测结果显示,As2O3组的OST-mRNA表达水平要高于Cs A组及对照组(P<0.05),而与联合组相比,则未见明显差异(P>0.05),但Cs A组的表达水平要低于联合组(P<0.05)。结论:As2O3可以抑制AA患者BM-MSC向脂肪细胞分化,并可增强其向成骨细胞分化,Cs A对AA患者BM-MSC向成骨细胞分化无明显促进作用。

CEIA-LIF法在重型再生障碍性贫血患者干扰素-γ水平检测中的应用

目的检测再生障碍性贫血(再障)患者单个CD8+T细胞内干扰素-γ(IFN-γ)的绝对含量。方法用毛细管电泳免疫分析激光诱导荧光法对再障患者外周血单个CD8+T细胞内IFN-γ的水平进行定量检测。结果2例重型再障(SAA)患者免疫治疗前外周血单个CD8+T细胞内IFN-γ的水平分别为(151.53±28.92)z mol和(223.72±45.23)z mol,免疫治疗后相应的降为(45.57±13.90)z mol和(36.44±9.66)z mol,正常对照为(47.47±17.97)z mol。经统计分析,SAA患者治疗前、后及与正常对照比较差异均有统计学意义。结论毛细管电泳免疫分析激光诱导荧光法可以检测到外周血单个CD8+T细胞内IFN-γ的z mol水平,有望成为一种新的检测方法应用于临床。

低增生性骨髓增生异常综合征与再生障碍性贫血的鉴别

目的探讨实验室检查指标在低增生性骨髓增生异常综合征(Hypo-MDS)和再生障碍性贫血(AA)鉴别诊断中的价值。方法对16例Hypo-MDS,59例AA患者的血象、骨髓象、骨髓病理以及细胞遗传学特点进行回顾性分析,长期随访并比较。结果 Hypo-MDS外周血涂片可见原始粒细胞、有核红细胞、成熟粒细胞颗粒缺如、假Pelger-Huet畸型、成熟红细胞大小明显不均,多形性,而AA患者未见上述特征。Hypo-MDS骨髓涂片红系、粒系、巨核系病态造血分别占87.5%、62.5%、37.5%,仅20.3%AA患者有单一红系轻度病态造血。16例Hypo-MDS患者中,11例骨髓涂片,所有患者骨髓切片CD34+细胞≥1%,而AA患者CD34+细胞均≤0.4%。Hypo-MDS的异常核型检出率(37.5%)较AA(3.57%)明显增高,且AA均为小克隆异常。结论长期随访中,形态学、免疫化学及细胞遗传学的联合检测是低增生性骨髓增生异常综合征与再生障碍性贫血鉴别的必要手段。

BLIMP-1在再生障碍性贫血患儿Treg细胞中的表达及意义

目的:研究B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(BLIMP-1)在再生障碍性贫血(AA)患儿Treg细胞中的表达并分析其与Treg细胞数量、血浆中抑制性细胞因子白介素(IL)-10和转化生长因子(TGF)-β水平的相关性。方法:收集10例初诊AA患儿和10例健康儿童的外周血标本。采用qPCR法检测FOXP3、PRDM1的mRNA表达水平。采用流式细胞术检测Treg细胞比例、Treg细胞中BLIMP-1表达以及血浆中IL-2、IL-17A、IL-6、γ干扰素、IL-10和TGF-β等细胞因子水平。采用Pearson相关模型分析Treg细胞中BLIMP-1表达与Treg细胞数量、血浆中IL-10和TGF-β水平的相关性。结果:与对照组相比,AA患儿外周血Treg细胞比例显著下降(P <0.001);AA患儿血浆中促炎细胞因子IL-2、IL-6、IFN-γ水平显著升高(P=0.033,P=0.031,P=0.006),IL-17A水平亦升高但不显著(P=0.052),而抑炎细胞因子IL-10和TGF-β水平明显降低(P=0.048,P=0.002);AA患儿FOXP3和PRDM1 mRNA的相对表达量显著低于对照组(P=0.037,P=0.016);AA患儿Treg细胞的BLIMP-1蛋白表达显著低于对照组(P<0.001)。Treg细胞中BLIMP-1蛋白的表达水平与Treg细胞占淋巴细胞百分比呈正相关(r=0.671,P=0.001),与血浆中IL-10和TGF-β水平亦呈正相关(r=0.500,P=0.029;r=0.486,P=0.030)。结论:AA患儿Treg细胞中BLIMP-1表达受损,且BLIMP-1表达低下与Treg细胞数量减少和IL-10、TGF-β水平减少具有相关性。

药物性肝损伤后肝炎相关再生障碍性贫血1例报告

肝炎相关再生障碍性贫血(hepatitis-associated aplastic anemia,HAAA)是指发生于急性或慢性肝炎后期,以外周血全血细胞减少和骨髓三系细胞增生低下为特征的骨髓衰竭综合征(bone marrow failure,BMF)[1]。这一概念由Lorenz和Quaiser于1955年首次提出[2]。HAAA发病率较低,在西方国家占再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)的2%~5%,在东方国家占4%~10%[3-5],而尚无确切数据显示其在肝炎患者中的发病率。药物性肝损伤(drug-induced liver injury,DILI)后HAAA更是少见,目前仅有少数个例报道。现报道1例DILI后发生HAAA,呼吁临床医师提高对该类疾病的认识。

再生障碍性贫血患儿骨髓T-bet、GATA3蛋白和外周血细胞因子表达及意义

目的检测调节Th1/Th2细胞分化的T-bet,GATA3蛋白在不同程度获得性再生障碍性贫血患儿骨髓中的表达,同时比较其治疗前外周血IL-2、IL-4、IFN-γ细胞因子水平,探讨获得性再生障碍性贫血的免疫病理机制。方法将49例获得性再生障碍性贫血患儿根据临床表现分为非重型组和重型与极重型组。利用免疫组织化学方法检测骨髓病理切片中T-bet,GATA3蛋白表达。酶联免疫吸附法比较细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ水平。结果T-bet在重型与极重型组AOD值0.0170(0.0140~0.0210)显著高于非重型组0.0060(0.0051~0.0064),P=0.000。GATA3在重型与极重型组和非重型组表达差异无统计学意义(0.0053±0.0010,0.0052±0.0009,P=0.846)。IL-2及IFN-γ在重型与极重型组显著高于非重型组(P=0.000,P=0.007),IL-4两组比较差异无统计学意义(P=0.289)。结论骨髓衰竭重的获得性再生障碍性贫血患儿其骨髓T-bet蛋白表达明显增高,外周血TH1细胞相关因子水平增高,调节Th1的T-bet蛋白在再生障碍性贫血的免疫病理机制中可能起着一定作用。

重型再生障碍性贫血转化为伴遗传学异常急性髓细胞白血病M41例并文献复习

再生障碍性贫血（aplastic anemia,AA）是指以造血干细胞数量减少和质的缺陷为主所致的骨髓造血功能衰竭综合征,骨髓中造血组织被脂肪组织替换,无恶性细胞浸润,无广泛网硬蛋白纤维增生,病因不明,主要表现为骨髓造血功能低下、全血细胞减少以及贫血、出血、感染。少部分患者病程中可发生恶性克隆性转变,即MDS和（或）AML（MDS/AML）,查阅国内外文献,

再生障碍性贫血中VEGF和MVD的相关性研究

目的:研究再生障碍性贫血患者血管内皮生长因子(VEGF)的表达,微血管的生成与疾病病理临床改变的关系。方法:用免疫组织化学染色方法检测35例再生障碍性贫血患者和35例正常人的骨髓蜡块的VEGF表达情况,并用CD34标记血管内皮细胞,对VEGF和微血管密度(MVD)的表达进行平均光密度测定。结果:再生障碍性贫血骨髓的VEGF表达低下,MVD也降低,与正常对照组比较有显著差异(P<0.05)。VEGF和MVD的表达呈显著正相关(r=0.988,P<0.01)。结论:VEGF在再生障碍性贫血中的下调可能和MVD的改变有着密切的关系,针对血管生成的治疗可成为再生障碍性贫血治疗的另一新途径。

基于HIF-1α/NF-κB通路探究三黄三仙汤联合常规西药治疗非重型再生障碍性贫血临床效果

目的基于缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/核因子-κB(NF-κB)通路探究三黄三仙汤联合常规西药治疗非重型再生障碍性贫血临床效果。方法选取2017年5月—2022年2月收治的非重型再生障碍性贫血92例,依据治疗方案不同分为观察组和对照组2组各46例。观察组采用三黄三仙汤联合常规西药治疗,对照组仅采用常规西药治疗。比较2组治疗6个月后临床效果,治疗前和治疗3、6个月后中医证候积分、血常规及HIF-1α/NF-κB通路相关mRNA、细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)],以及治疗期间不良反应发生情况。结果治疗6个月后,总有效率观察组为84.78%高于对照组60.87%(P<0.05)。治疗3和6个月后,观察组中医证候积分、HIF-1αmRNA、NF-κB mRNA及血清TNF-α低于对照组,血白细胞、血小板、血红蛋白及血清IL-1β高于对照组(P<0.05,P<0.01)。治疗期间,2组总不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论三黄三仙汤联合常规西药治疗非重型再生障碍性贫血患者可明显提高临床效果,缓解临床症状,改善血常规。其机制可能为三黄三仙汤通过下调HIF-1α/NF-κB通路上HIF-1α和NF-κB表达,减少TNF-α分泌,加速IL-1β释放,促使机体免疫及造血功能恢复,进而对疾病产生积极作用。

胸腺瘤并发纯红细胞再生障碍性贫血1例报告

患者,女,42岁,（住院号139435）因进行性头昏乏力二月余,伴胸闷、气急一月,于1989年11月28日入院治疗。体检:重度贫血貌,皮肤巩膜无黄染。全身浅表及锁骨上淋巴结未触及,左前胸饱满,左第2—5前肋间隙增宽,心率102次/分,心尖区可闻及Ⅱ级吹风样收缩期杂音。两肺（-）,肝脾肋下未及。既往健康,无月经过多及各种出血症状。无特殊药物及化学物质接触史,家族史无殊。实验室检查;Hb37g/L,Rbc1.18×1012/L。

化学诱导再生障碍性贫血模型建立研究进展

再生障碍性贫血（aplastic anemia,AA）通常指原发性骨髓造血功能衰竭综合征,主要表现为骨髓造血功能低下、全血细胞减少和贫血、出血、感染。现代医学依靠免疫抑制剂、雄激素、造血生长因子等获得一定疗效。其病因尚未明确,发病机制主要与造血干祖细胞缺陷、造血微环境异常、免疫异常等相关。