关键环境因子对嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)在嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)细胞内增殖的影响

嗜肺军团菌是一种生活在人工水环境中的条件性致病菌,环境条件对该菌的存活和胞内增殖具有重要的影响.本文用作者建立的军团菌-四膜虫模型,研究了空调水池水、Fe3+和感染温度3种关键性环境因子对嗜肺军团菌在嗜热四膜虫宿主细胞内增殖的影响.结果发现,尽管空调水中Fe3+浓度大大低于培养基中的Fe3+浓度,但适合嗜肺军团菌在嗜热四膜虫宿主胞内的存活和增殖;感染缓冲液中的Fe3+能够被嗜热四膜虫富集,并被胞内的军团菌加以利用,缓冲液中浓度0.05×10-6的Fe3+即可显著促进胞内军团菌的增殖,但0.1×10-6和0.5×10-6的Fe3+促进军团菌胞内增殖的效果差异不显著;较高的温度对军团菌的胞内增殖也有明显促进作用,35℃时,即使感染复数等于10,军团菌也可进行胞内复制扩增,并最终裂解宿主细胞.

脂多糖生物探针法与传统培养法检测水中嗜肺军团菌的比较

目的比较脂多糖生物探针法和传统培养法(包括ISO 11731-2017法即“ISO法”、GB/T 18204.5-2013法即“国标法”)对水中嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)的检测能力。方法分别采用脂多糖生物探针法和传统培养法对58份加标水样(其中50份为实际水样加标用于以上两类方法比对测试,8份为纯水加标用于脂多糖生物探针法的方法学性能测试)和50份实际水样进行检测,确定脂多糖生物探针法的检出限、准确度、精密度、特异性和灵敏度,并比较两类方法对50份实际水样加标前的定性结果和50份实际水样加标前后的定量结果。结果脂多糖生物探针法检出限为1.55 CFU/L,准确度为102.10%~139.29%,精密度为0.14%~1.78%,特异性为95.12%,灵敏度为88.89%。50份实际水样加标前脂多糖生物探针法和国标法两种方法(检出或未检出)的定性结果无统计学差异(P>0.05);50份实际水样加标前后脂多糖生物探针法定量结果的中位数(M)高于ISO法测定结果,差异具有统计学差异(P<0.001),两类方法测定结果存在相关(r=0.981)。脂多糖生物探针法检出限(1.55 CFU/L)低于ISO法的(15.74 CFU/L),检测时间(2 d)短于ISO法(10 d)。结论与传统培养法相比,脂多糖生物探针法耗时短,检测性能更优。

关注军团菌肺炎诊治中易被忽视的临床问题

军团菌肺炎常快速进展,病死率高。随着检测技术的进步,近年来军团菌的检出率较前有所增高,但仍有漏诊的病例,延误治疗是患者死亡的原因之一。因此,早期识别军团菌肺炎的临床特点、及时进行恰当的治疗至关重要。虽然军团菌肺炎某些特征已被临床所认知,但仍存在诸多被忽视的问题。本文旨在全面回顾军团菌肺炎的临床表现、辅助检查和治疗策略,提高临床医师对该病诊治的认识,以改善患者预后。

2023年中南某市夏季公共场所嗜肺军团菌污染状况

目的了解2023年中南某市三类公共场所嗜肺军团菌污染状况,分析健康风险。方法于2023年7月采取非随机抽样方法在在中南某市三类公共场所采集集中空调水样、室内空气样本,以及公共设施物体表面样本进行检测和分析。采用培养法对集中空调冷却水和冷凝水嗜肺军团菌进行检测;采用荧光定量PCR对室内空气以及物体表面嗜肺军团菌进行检测。利用Fisher确切概率法用于评估水样类型、场所类型与健康风险等级的相关性。结果调查中共采集集中空调水样24份、室内空气样本213份以及公共设施物体表面样本282份。培养法检测结果显示,集中空调水样的总体阳性率为37.5%,其中冷却水的阳性率为55.6%(5/9),冷凝水的阳性率为26.7%(4/15)。其中,地铁站的集中空调水样阳性率为27.3%(3/11),宾馆的阳性率为66.7%(6/9),火车站水样中未检测出嗜肺军团菌(0/4)。风险分析发现,冷却水的高风险率为55.6%(5/9),冷凝水的高风险率为20.0%(3/15);地铁和宾馆水样的高风险率分别为27.3%(3/11)和55.6%(5/9)。荧光定量PCR结果显示,公共场所的室内空气和物体表面的检测结果均为阴性,中高风险率为0%。结论三类公共场所中,地铁和宾馆嗜肺军团菌阳性率较高,冷却水和冷凝水中均有较高检出率。

新生儿嗜肺军团菌肺炎2例

患儿1,女,12 d,因发热、咳嗽、呼吸困难、感染指标增高就诊,需呼吸支持治疗,血液及肺泡灌洗液宏基因组二代测序(metagenomic next-generation sequencing,mNGS)示嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,LP),诊断为LP肺炎、LP败血症,予红霉素15 d、阿奇霉素5 d治疗痊愈出院。患儿2,女,11 d,因呼吸困难、发热、感染指标增高伴多器官功能损伤就诊,需机械通气,血及脑脊液mNGS示LP,诊断为LP肺炎、LP败血症、LP颅内感染,予红霉素19 d治疗痊愈出院。新生儿LP肺炎无特异临床症状,首选抗菌药物为阿奇霉素,对不明原因新生儿重症肺炎使用mNGS可早期明确诊断。

嗜肺军团菌效应蛋白Lpg1972与CNOT7相互作用研究

嗜肺军团菌是一种寄生在真核细胞内的革兰氏阴性致病菌,其致病性主要是依靠IVB型分泌系统分泌的330多种效应蛋白,效应蛋白之间彼此协作共同干扰真核宿主细胞的各种细胞活动.嗜肺军团菌效应蛋白Lpg1972与真核细胞Ccr4-Not复合物中的CNOT7亚基存在相互作用,而Ccr4-Not复合物是真核细胞中调控mRNA降解的关键蛋白。基于此通过分子生物学的手段验证了它们之间的相互作用,设计共表达载体纯化了复合物蛋白,并利用AlphaFold2对复合物的结构和相互作用进行了预测分析,为后续研究奠定了基础。

以阵发性交感神经过度兴奋综合征为主要表现的嗜肺军团菌相关脑病一例报告

患者男,35岁,因“发热,精神行为异常8 d”于2024年2月21日就诊于首都医科大学附属北京同仁医院急诊科。8 d前出现发热,与家人及同事无法正常交流;3 d前意识模糊、问答不切题,答非所问。不能行走,伴有二便失禁,抽搐史不详;体温最高40℃,入院诊断“肺部感染、颅内感染待除外”,患者高热、躁动、大汗,阵发性浅快呼吸(12~50次/min)及HR波动(窦性节律、110~140次/min),间断肌注赖氨匹林(国药准字:H34022437,规格:0.9 g)0.9 g,体温39~40℃。给予抗感染、高流量吸氧及物理降温治疗后症状无缓解。给予丙泊酚等药物镇静,气管插管呼吸机辅助通气治疗。

阿奇霉素对军团菌肺炎患儿疗效、IgM抗体阳性率、肺功能及免疫功能的影响

目的:探究阿奇霉素应用于军团菌肺炎患儿对免疫球蛋白M(IgM)抗体阳性率、肺功能及免疫功能的影响。方法:选取江西省妇幼保健院2021年10月—2022年12月收治的100例军团菌肺炎患儿作为研究对象,采用随机数字表法将其分为阿奇霉素组和红霉素组,每组50例。对阿奇霉素组患儿给予阿奇霉素,对红霉素组患儿给予红霉素。观察并比较两组临床疗效、IgM抗体阳性率、肺功能指标[呼吸频率(RR)、最大呼气流量(PEF)、用力呼出25%肺活量时的平均呼气流速(FEF25)、用力呼出50%肺活量时的平均呼气流速(FEF50)]、免疫功能指标[T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+))]。结果:用药后,阿奇霉素组总有效率明显低于红霉素组,差异有统计学意义(P<0.05)。用药后1个月,阿奇霉素组IgM抗体阳性率明显低于红霉素组,差异有统计学意义(P<0.05)。用药后,阿奇霉素组FEF25、FEF50及CD3^(+)、CD4^(+)均高于红霉素组,RR及CD8^(+)均低于红霉素组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组PEF水平相近,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:军团菌肺炎患儿应用阿奇霉素治疗效果显著,改善感染症状、呼气功能及免疫功能效果较好,可替代红霉素作为首选药物。

辛辛那提军团菌致坏死性筋膜炎1例

军团菌是一种需氧革兰阴性杆菌,其感染以下呼吸道为主[1],皮肤软组织感染较少见。坏死性筋膜炎是一种罕见但可危及生命的软组织感染[2]。目前为止,仅有1例军团菌致坏死性筋膜炎的病例报道[3],尚无辛辛那提军团菌导致坏死性筋膜炎的报告。本文报告1例由辛辛那提军团菌引起坏死性筋膜炎的病例,以探讨此少见疾病的临床及治疗特点。

靶向二代基因测序协助诊治军团菌肺炎1例

报道来自天津医科大学朱宪彝纪念医院重症医学科的1例老年男性患者,既往有慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)、冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)、陈旧性心肌梗死及心功能不全病史,本次主因“咳嗽喘憋2 d”于2023年8月26日入院。入院初步诊断考虑重症肺炎等,入院伊始予以经验性抗感染治疗,但效果欠佳,患者病情恶化,需气管插管和机械通气。完善常规相关微生物化验,无明显阳性结果,因此笔者及时进行肺泡灌洗液的靶向二代测序(targeted next-generation gene sequencing,tNGS),并在第一时间确诊为嗜肺军团菌肺炎,随后采用莫西沙星进行抗军团菌针对性治疗,患者最终痊愈。目前军团菌的分离培养阳性结果仍是诊断军团菌感染的金标准,但军团菌的生长条件苛刻,且培养步骤烦琐、周期长,往往难以获得阳性结果。在本例中,常规病原学检测未能提供关键线索,笔者依据经验性判断,并及时运用tNGS技术,最终得以明确诊断,使患者得到及时、准确、有效的诊治,最终病情转危为安。tNGS技术是临床医生诊断治疗感染性疾病的又一有效利器。

高级氧化AOP在水景喷泉中控制军团菌的研究

在人体可接触或部分接触的水景景观这些娱乐性景观用水中,包括军团菌在内的致病菌可以通过水体和胶溶体传播给人体,健康危害的风险很大,本研究通过对高级氧化AOP的研究及其在控制包括军团菌在内的致病菌的测试,提供了在水景喷泉中应用的依据。

军团菌:潜伏在现代生活中的“杀手”

随着现代科技的飞速发展,空调、热水器、冷却塔等家用电器和公共设施已成为人们日常生活中不可或缺的一部分。然而,这些看似便利的设备背后却隐藏着一种潜在的健康威胁—军团菌。军团菌及其形态、传播途径1976年7月,在美国费城召开的一次退伍军人大会上突然暴发了一种急性发热性呼吸道疾病。疫情迅速蔓延,大量人员感染,其中大部分是退伍军人,因此这种疾病最初被称为“退伍军人症”。1977年1月,导致“退伍军人症”的病原体被成功分离并鉴定,1979年被正式命名为“军团菌”。

上海部分地铁站空调冷却塔水军团菌污染状况调查

[目的 ]了解上海部分地铁站军团菌污染状况。 [方法 ]应用优化检验技术对 2 0 0 1年 3～ 11月上海部分地铁站的 10 2件空调冷却塔水样进行军团菌的分离培养与鉴定。 [结果 ] 10 2件样品中分离出 46株军团菌 ,污染率为45 10 %。 [结论 ]上海部分地铁站军团菌污染情况较为严重 。

广东地区环境水源和临床标本嗜肺军团菌培养与基因快速鉴定

目的建立嗜肺军团菌培养与基因快速鉴定方法,探讨广东地区环境水源和非典型肺炎患者嗜肺军团菌感染状况。方法对广东地区采集的57份中央空调冷凝塔水、30份湖泊水和53份临床标本,用本室改良BCYE-α培养基作培养和PCR试验。结果57份中央空调冷凝塔水培养检出嗜肺军团菌20株(35.1%),PCR检测LP-DNA阳性38份(66.7%);30份湖泊水细菌培养均阴性,PCR阳性4份(13.3%);53例非典型肺炎患者支气管洗液和痰液细菌培养均阴性,PCR阳性5例(9.4%);本实验设计的PCR扩增引物,只和标准嗜肺军团菌和本地分离株产生反应;不与其他病原菌扩增,而显示其良好特异性;本PCR敏感性可检出检体中0.6个细菌DNA含量。结论广东地区环境水源中普遍存在嗜肺军团菌,是引起非典型肺炎的重要病源之一。

医院军团菌污染状况及其防制对策

目的了解医院军团菌的污染状况,以找出相应防制对策。方法选取12家医院,分别对医院空调冷却塔水、二次供水和管网末梢水(出厂水)进行军团菌检测。结果48份冷却塔水样品中分离出22株军团菌,军团菌阳性检出率为45.83﹪,二次供水军团菌检出率为9.09﹪,管网末梢水未检出军团菌。结论医院空调冷却塔水军团菌污染状况较为严重,对其危险性应引起高度重视,二次供水的军团菌污染也不容忽视,应进行有效控制,以防止军团病的暴发流行。

中央空调冷却水和冷冻水系统军团菌的污染

目的探讨中央空调系统中冷却水系统与冷冻水系统军团菌的污染情况。方法于2005年6—9月,对马鞍山市所有商场、宾馆、办公楼、医院的中央空调系统的冷却水系统(冷却塔和冷凝器)和冷冻水系统(蒸发器和膨胀水箱)水样进行采集,并检测军团菌的含量及其血清型。结果共采集26个单位的中央空调系统的冷却水、冷冻水系统各环节水样100件,64件检出军团菌,检出率为64.0%,仅2个单位空调系统的所有水样均未检出军团菌,合格率为7.7%。两系统中分离到71株嗜肺军团菌菌种,Lp1型46株,Lp10型25株。冷却水系统水样的军团菌检出率为75%(39/52),高于冷冻水系统[52.1%(25/48)],差异有统计学意义(χ2=5.6894,P=0.017)。商场、宾馆、办公楼、医院的中央空调冷却水、冷冻水系统水样中军团菌检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。冷凝器水(冷却水)、冷却塔水、膨胀水箱水、蒸发器水(冷冻水)中军团菌检出率分别高达93.8%(15/16),66.7%(24/36),60.7%(17/28),40.0%(8/20),各环节水样中军团菌检出率比较,差异有统计学意义(χ2=11.3886,P=0.010)。冷却水系统水样中,检出Lp1型、Lp10型分别占64.4%(29/45),35.6%(16/45);冷冻水系统水样中,检出Lp1型、Lp10型分别占65.4%(17/26),34.6%(9/26)。两系统中,Lp1型和Lp10型分布构成比比较,差异无统计学意义(χ2=0.0064,P=0.936)。冷却水、冷冻水系统不同军团菌含量水样的分布比较,差异有统计学意义(P=0.042)。不同使用年限的冷却水系统水样中军团菌检出率间比较,差异有统计学意义(P=0.035);且使用年限>10a的冷却水系统水样中均检出军团菌。不同使用年限的冷冻水系统水样中军团菌检出率间比较,差异无统计学意义(P=0.106);且使用年限在5～10a的冷冻水系统水样中军团菌检出率最高,达75.0%。不同使用年限的冷却塔水、膨胀水箱水中军团菌检出率间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同使用年限的冷凝器水、蒸发器水的军团菌检出率间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论本次调查的马鞍山市中央空调冷冻水系统中军团菌污染情况值得关注,冷却塔和膨胀水箱是清洗消毒的重点对象。

空调冷却水军团菌微生态环境与繁殖传播研究

目的 研究含氯消毒剂不能持久控制空调冷却塔水中军团菌繁殖、传播的原因 ,为寻找持久、稳固控制军团菌的方法提供依据。方法 定期跟踪调查 7个大型中央空调冷却塔水中军团菌消长情况及其有机物、细菌、藻类构成 ;模拟空调冷却塔环境条件 ,构建藻类减少和藻类增加 2种不同的军团菌生态模型 ,观察军团菌在不同微生态环境中的繁殖速率 ,同时检测空气中的军团菌。结果 空调冷却塔水中军团菌数与水中总有机碳、硝酸盐氮及藻体数(主要是绿藻门中的盘星藻、四棘藻和蓝藻门中的地中尖头藻这类体积较大的藻类 )成正比 ,含氯消毒剂不能持久杀灭军团菌。军团菌在模拟的最佳空调冷却塔水环境 (藻类增加模型 )中 ,繁殖速率可达 1h增加 1倍 ,并随藻体数增加维持指数生长状态 ;在模拟藻类减少空调冷却塔水环境中 ,加入军团菌液 1h后 ,军团菌数也可增加 1倍 ,但以后繁殖速率越来越低 ,3d后军团菌数为藻类增加生态模型的 1/ 16 0。当水中军团菌数达 4 2× 10 4/ml时 ,在空气中可检测到军团菌。结论 军团菌在 2 0℃以下的空调冷却水中不是处于休眠状态 ,而是处于失活状态。军团菌的繁殖速率和持续时间主要与空调冷却水中的藻体种类及数量密切相关 ,其次与总有机碳、硝酸盐氮有关。改变军团菌的微生态环境 ,去除冷却?

水中嗜肺军团菌分布规律研究

目的 探讨水环境中嗜肺军团菌分布规律及分型特征。方法 采集自然环境及生活环境中各主要水体样品 ,浓缩后经常规细菌培养后的疑似菌株 ,用血清学鉴定与 1 6SrRNA半套式PCR技术双重鉴定进行军团菌和嗜肺军团菌的分型。结果 全部 1 2 6个监测点水样有 2 8个出现军团菌阳性 (其中嗜肺军团菌 2 1个 ) ;自然环境及生活环境监测点军团菌阳性率分别为 32 1 %、2 2 2 % (其中嗜肺军团菌阳性率分别为2 1 4 %、1 6 7% ) ;全年 4 30份水样有 36份军团菌阳性 (其中 2 3份为嗜肺军团菌 ) ,夏、秋季检出率较高 ,春、冬季也有检出 ;空调冷却塔水、淋浴喷头水、公园湖水检出率较高。结论 嗜肺军团菌在自然环境及生活环境各水体中分布广泛。环境温度是军团菌污染的重要因素 ,夏、秋季是军团菌污染和军团病传播的高发季节 ,春、冬季也可发生。公园娱乐水体、空调冷却水、淋浴喷头水等与人群密切接触水体是军团菌污染和军团病传播的高危水体。

军团菌选择性分离培养基及其实用性比较研究

目的探讨与改进嗜肺军团菌选择性分离培养基及其临床实用性评价。方法在BCYEα基础培养基中添加3种不同抗生素组合：CCCV、DGVP（含自配特种染料）和GVPC，以不含抗生素的BCYEα平板作对照，采用菌落计数法比较添加3种不同抗生素和染料的选择性分离平板对嗜肺军团菌生长的影响，同时比较3种选择性分离平板对空调冷凝塔水中嗜肺军团菌的分离率。结果在BCYEα＋DGVP和BCYEα＋GVPC平板上菌落计数（菌液稀释度在10^5～10^7之间）和BCYEα平板结果相类似，差异无统计学意义（P〉0．05）。在BCYEα＋CCCV平板上生长菌落数只有前3种平板的1／2，差异有统计学意义（P〈．05）。从9个中央空调冷凝塔水中分离嗜肺军团菌，用BCYEα＋DGVP和BCYEα＋GVPC平板分离出5株嗜肺军团菌，而BCYEα＋CCCV平板仅分离出2株，不加抗生素的BCYEα平板未分离出军团菌。结论常规用BCYEα＋CCCV平皿对杂菌有较强的抑制作用，但对嗜肺军团菌亦有一定抑制作用，因而在实际应用中降低了嗜肺军团菌的分离率；BCYEα＋DGVP和BCYEα＋GVPC平皿（自制）对嗜肺军团菌的抑制作用微弱，而对杂菌有较强的抑制作用，提高了嗜肺军团菌的分离率。

广州地区水体环境军团菌污染分布调查

目的 调查广州地区水体环境军团菌污染分布状况。 方法 采取分层抽样方法分别对冷却塔水、二次供水、管网水(出厂水)、地表自然水进行军团菌检测。 结果 冷却塔水军团菌检出率为42.86％,其他水体未检出军团菌。 结论 冷却塔水的军团菌污染严重,应加强监测管理。