军曹鱼NHE3和NKAα1a基因克隆、表达模式及相关miRNA的靶向调控

为了解军曹鱼NHE3与NKAα1a的序列特征、盐度胁迫下的基因表达模式以及相关miRNA的靶向调控作用,实验应用cDNA末端快速扩增技术克隆了NHE3与NKAα1a的全长cDNA序列;应用实时定量PCR(qPCR)技术分析了NHE3和NKAα1a的组织特异性和盐度适应性表达模式;采用双荧光素酶报告实验检测了NHE3和NKAα1a与相关miRNA的靶向调控关系。结果显示,军曹鱼NHE3与NKAα1a基因的开放阅读框长度分别为2718和3075 bp,分别编码905和1024个氨基酸;NHE3、NKAα1a在鳃、肠、心脏等9种组织中均有表达,其中以鳃组织中的表达丰度最高。随着盐度升高,NHE3在鳃中表达量下降,低盐和高盐适应后均呈显著差异。NKAα1a基因表达量随着盐度升高出现不同趋势,在鳃和肠中受低盐和高盐影响后均显著上调,而高盐环境下其在体肾中的表达水平显著下调。在不同盐度适应过程中,NHE3、NKAα1a均以鳃组织中的表达水平最高。NHE3-pmir-GLO-WT与miR-1335-3p共转染时,较对照组相对荧光素酶活性下降,并存在极显著差异;NKAα1a-pmirGLO-WT分别与miR-1788-3p和mimic NC(对照组)的共转染结果与上述结果类似。研究表明,miR-1335-3p和miR-1788-3p可分别与NHE3和NKAα1a 3′-UTR序列结合,并下调其mRNA表达水平。NHE3和NKAα1a在物种间高度保守;NHE3主要参与低盐适应,而NKAα1a在低盐和高盐适应中均发挥作用;miR-1335-3p和miR-1788-3p可分别负向调控其靶基因NHE3与NKAα1a,从而参与军曹鱼渗透压调节。以上研究结果为进一步研究军曹鱼miRNA-mRNA渗透压调控网络提供了理论基础。

军曹鱼仔稚鱼脊柱和附肢骨骼的发育特征

为探明军曹鱼仔稚鱼早期脊柱及附肢骨骼的发育特征,本研究采用软骨-硬骨双染色技术,分别利用阿利新兰、茜素红对软骨、硬骨以及1~33日龄军曹鱼仔稚鱼全骨骼进行染色,系统观察并描述其脊柱和附肢骨骼的发育特征。结果显示,军曹鱼脊柱开始发育的标志为7日龄仔鱼中脉弓和神经弓的出现;13日龄稚鱼椎骨、神经弓和脉弓开始骨化;背肋、腹肋分别于17、20日龄开始骨化;29日龄稚鱼脊柱骨化完成。附肢骨骼骨化起始顺序依次为胸鳍、尾鳍、腹鳍、背鳍和臀鳍。胸鳍匙骨于4日龄出现,肩胛骨孔于12日龄出现,同时上匙骨开始骨化;乌喙骨与肩胛骨于20日龄开始骨化;第1尾下骨于5日龄出现,15日龄稚鱼尾杆骨、侧尾下骨和尾鳍鳍条开始骨化,18日龄稚鱼尾下骨开始骨化;腹鳍支鳍骨于17日龄延伸至匙骨,同时腹鳍开始骨化;臀鳍和背鳍于17日龄由前向后开始骨化。研究表明,军曹鱼在13日龄进入稚鱼期,早期发育阶段的骨骼发育特征与其功能性适应密切相关。本研究结果对研究军曹鱼早期骨骼发育与功能适应、优化养殖条件有重要作用。

L-丙氨酰-L-谷氨酰胺对低氧胁迫后军曹鱼幼鱼生长性能、血清生化与抗氧化指标的影响

本试验旨在为探究L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Ala-Gln)对低氧胁迫后军曹鱼幼鱼生长性能、血清生化与抗氧化指标的影响。以低氧胁迫14 d后的军曹鱼幼鱼[(105.16±6.01)g]为研究对象,随机分为4组,每组3个重复,每个重复30尾。4组试验鱼分别投喂Ala-Gln添加量为0(对照组)、0.5%、1.0%、1.5%配制4种等氮等脂的试验饲料,并分别于试验第7、14、28天采集血清进行指标测定。结果显示:1)与对照组相比,在饲喂14与28 d时,1.0%组和1.5%组的增重率和特定生长率显著升高(P<0.05),饲料系数显著降低(P<0.05)。2)与对照组相比,在饲喂28 d时,1.0%组和1.5%组血清中甘油三酯和总胆固醇含量显著降低(P<0.05),所有添加Ala-Gln组血清中葡萄糖、总蛋白和白蛋白含量显著升高(P<0.05),1.5%组血清中谷草转氨酶与谷丙转氨酶活性显著升高(P<0.05)。3)与对照组相比,在饲喂28 d时,1.0%组和1.5%组血清中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著升高(P<0.05),血清丙二醛含量显著降低(P<0.05)。以上结果表明,饲料中添加1.0%Ala-Gln可提高军曹鱼幼鱼血清中TP和ALB的含量以及减少血清中TC和TG的堆积,提高生长性能与抗氧化能力,改善低氧胁迫所带来的氧化损伤。

低温胁迫对军曹鱼幼鱼鳃组织抗氧化能力、细胞凋亡和组织结构的影响

军曹鱼(Rachycentron canadum)鳃组织对水温变化敏感。为探究低温胁迫对军曹鱼幼鱼鳃组织的影响,揭示该鱼应对低温胁迫的响应机制,实验设置2个低温胁迫组(18℃、21℃)和1个对照组(28℃),比较分析鳃组织在胁迫后第0、第4和第7天的氧化应激状态、细胞凋亡和组织结构情况。结果显示,低温胁迫下鳃组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著低于对照组(P<0.05),丙二醛(MDA)浓度显著高于对照组(P<0.05);低温胁迫组鳃组织凋亡相关基因bax、caspase-9、caspase-3、p53和mdm2表达量在第4和第7天时相较于对照组显著升高(P<0.05),bcl-2基因表达量显著降低(P<0.05);TUNEL检测显示低温组鳃组织细胞凋亡率升高;组织学分析表明低温胁迫下鳃组织出现了不同程度的鳃小片排列紊乱、基部增生、融合,上皮细胞和泌氯细胞空泡化等现象。研究表明,低温胁迫抑制了军曹鱼幼鱼的鳃组织抗氧化酶活性,造成氧化损伤,进一步诱导细胞凋亡,破坏鳃组织结构完整性。

军曹鱼全基因组微卫星特征分析与多态性标记的筛选及应用

为更好地开发军曹鱼(Rachycentron canadum)高多态性微卫星分子标记,本研究基于军曹鱼全基因组测序结果,利用MISA1.0软件对其简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)的位点信息进行检索及分析。结果显示,基因组中共筛选出1~6个核苷酸为重复单元的SSR位点344820个,其中,以单核苷酸重复序列最多(174146个),占SSR总数的50.50%;其次为二核苷酸重复和三核苷酸重复序列,分别占SSR总数的30.23%和14.02%。在SSR包含的重复单元中,单核苷酸重复以A/T类型为主,AC/GT是二核苷酸的优势重复单元类型。军曹鱼基因组SSR核心序列重复次数在4~275次范围内波动,单核苷酸SSR重复数为10的最多,二核苷酸SSR重复次数为6的最多。本研究设置长度≥12 bp为筛选高多态性SSR位点的标准,共获得361684个位点。在上述位点中随机选取100个候选位点进行基因分型检测,利用从中筛选到多态性较高的10个SSR标记分别对北海、陵水、硇洲、徐闻和三亚5个养殖群体进行遗传多样性分析,145尾个体中共检测到69个等位基因,观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)和多态信息含量(PIC)平均值分别为0.628、0.706和0.653。相关研究表明,军曹鱼基因组中SSR位点类型较为丰富、多态性潜能较高,从中筛选获得的多态性SSR标记可为军曹鱼分子标记辅助育种、群体遗传多样性评价等研究提供有力支持。

军曹鱼寄生线虫物种鉴定与形态学观察

寄生线虫是鱼类的重要病原,会严重影响鱼类健康.采用形态分类学方法对采自美国南卡罗来纳州海域军曹鱼Rachycentron canadum(Linnaeus)(Perciformes:Rachycentridae)肠内的寄生线虫进行了准确的物种鉴定.研究发现,该线虫体表具有发达的环带,唇前缘无角质齿,间唇较小,排泄孔位于神经环略后端,胃盲囊明显长于肠盲囊,左交合刺长3.05~4.17mm,右交合刺长3.50~4.43mm,尾乳突37~38对,阴门距头端7.71~13.2mm,尾具指状尾突等特征,根据形态特征将其鉴定为军曹带蛔线虫Iheringascaris inquies(Linton,1901).此外,通过与采自我国福建厦门海域军曹鱼体内的长刺海豹蛔线虫Phocascaris longispiculum Wang&Wu,1991进行形态特征比较,发现二者非常相似,研究认为长刺海豹蛔线虫P.longispiculum应是军曹带蛔线虫I.inquies的同物异名.

盐度变化对军曹鱼稚鱼相关免疫因子及其生长的影响

研究了盐度（5、10、20、30及对照37）对军曹鱼（Rachycentron canadum）稚鱼生长及其血清溶菌酶、碱性磷酸酶（ALP）、旁路途径补体（ACP）溶血活性（ACH50）和总免疫球蛋白（T-Ig）含量等免疫因子的影响。实验周期为14d。结果表明，在逐渐达到设定盐度后养殖14d，盐度30组稚鱼特定生长率（SGR）最高（5．77％／d），而盐度5和10组的SGR（分别为4．24％／d和4．38％／d）显著低于其他组（P〈0．05）。在低盐度环境中血清溶菌酶活性在第7天各组都有不同程度升高，其中以盐度20组升高最为显著，其次为盐度10和30组，但第14天各组溶菌酶活性又都回落至对照组水平；而稚鱼在低盐度环境中血清ALP活性受到明显抑制，且活性与盐度呈一定正相关；各组问ACP活性在第7天各盐度组间无明显差异，但实验结束时盐度5和10两组出现显著升高；而T-Ig含量在盐度10组中始终明显高于其他组。研究显示，军曹鱼稚鱼在盐度20-37范围内都可正常生长，尽管稚鱼有较强的低盐度耐受能力，但过低盐度明显影响其生长率并导致体色变黑、蛀鳍和应激增强等异常表现。此外，盐度变化还影响稚鱼多种免疫相关因子。

饲料中不同水平n-3 HUFA对军曹鱼生长及脂肪酸组成的影响

以鱼粉、豆粕和酪蛋白为蛋白源,通过调节饲料中的牛油和鱼油水平,使饲料中高度不饱和脂肪酸(n-3 HU-FA)的含量分别达到0.60、0.96、1.24、1.56、1.77和2.11%,配制出6种等氮等能的实验饲料,并以此饲料投喂军曹鱼幼鱼(8.3±0.5g)8周。实验结果显示饲料中n-3 HUFA水平对实验鱼成活率没有显著影响,但却显著影响了军曹鱼的特定生长率(SGR)。随着饲料中n-3 HUFA水平的升高,SGR相应提高,但当饲料中n-3 HUFA水平高于1.24%时,各处理之间的生长没有出现显著差异。随着饲料中n-3 HUFA水平的升高,肌肉和肝脏中18∶1n-9的含量逐渐下降,而22∶6n-3的水平相应升高。根据实验结果,当以特定生长率为评价指标时,用折线模型估计出军曹鱼对饲料中n-3 HUFA的需求量约为1.49%。

军曹鱼血液指标及血细胞发生的观察

测定军曹鱼的血液指标,红细胞密度为2．69±0．86×106个/mm3,白细胞密度为1．50±0．09×104个/mm3;血 红蛋白含量为7．42±0．22g/L,红细胞渗透脆性为0．43±0．07g％,红细胞沉降速率为1．18±0．46mm/h。观察军曹鱼 外周血液涂片,可区分出红细胞、血栓细胞、淋巴细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞,但没有发现嗜酸性粒细胞和嗜碱 性粒细胞。在外周血液涂片观察中还发现了较多未成熟的红细胞和嗜中性粒细胞以及少量正在分裂的红细胞。 血栓细胞、淋巴细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞在白细胞中所占比例分别为61．20±6．30％,16．60±3．28％,16．00± 3．61％和6．20±3．90％。对肝脏、脾脏、头肾和中肾等四种造血组织进行了涂片观察,军曹鱼的血细胞主要在头肾 和肾脏产生;脾脏是军曹鱼粒细胞发生的另一个场所,而肝脏也具有产生粒细胞和淋巴细胞的作用。

急性盐度胁迫下军曹鱼稚鱼应激反应的血清学指标

军曹鱼Rachycentron canadum稚鱼[体质量（25．6±4．9）g]从盐度37‰的自然海水中直接转移至盐度为0、5‰、15‰、25‰、37‰（对照）和45‰的水体中进行盐度急性胁迫试验，转移前及转移后0．5、1、2、3、6和12h分别检测血清中皮质醇、血糖、乳酸和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）等应激指标变化．结果显示，试验期间对照组各指标在基础值附近变幅平稳；盐度0组在6—12h内出现100％死亡，且死亡前稚鱼皮质醇（256．7ng·mL^-1）和血糖（11．95mmol·L^-1）都显示显著高水平（P〈0．05），而乳酸和AST水平则较低；其他4个胁迫组在最初3h内皮质醇、血糖和乳酸水平都出现不同程度升高，其中盐度25‰组变幅显著高于其他组，除盐度5‰组皮质醇和乳酸水平在后期有升高趋势外，各组3h后都逐渐回落至基础值或对照组附近．血清AST水平前期变化较复杂，试验后期盐度5‰和25‰组水平显著高于其他3组．除在淡水中导致稚鱼死亡外，以皮质醇水平为主要应激指标，综合分析显示，稚鱼对盐度胁迫反应初期强弱依次为盐度25‰、5‰、15‰和45‰，而后期在盐度5‰下的应激强度又逐渐增强．

益生菌对军曹鱼幼鱼生长性能、消化酶和免疫酶活性的影响

本试验旨在研究枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌单独或混合添加于饲料中对军曹鱼幼鱼生长性能、消化酶和免疫酶活性的影响。选取平均体重为(22.00±0.15)g的健康军曹鱼幼鱼840尾,随机分成7组(T0、T1、T2、T3、T4、T5、T6组),每组3个重复,每个重复40尾鱼。T0组为对照组,投喂基础饲料50 d;T1、T2和T3组前30天分别投喂含1×107CFU/g枯草芽孢杆菌、1×107CFU/g嗜酸乳杆菌、2×107CFU/g枯草芽孢杆菌与嗜酸乳杆菌混合物(枯草芽孢杆菌∶嗜酸乳杆菌=1∶1,质量比)的饲料,后20天投喂基础饲料;T4、T5和T6组分别投喂含1×107CFU/g枯草芽孢杆菌、1×107CFU/g嗜酸乳杆菌、2×107CFU/g枯草芽孢杆菌与嗜酸乳杆菌混合物的饲料50 d。结果显示:与对照组相比,T1、T2组的增重率(WGR)无显著差异(P>0.05),T3、T4、T5、T6组的W GR则显著升高(P<0.05),最大值出现在T6组,且显著高于其他各组(P<0.05)。特定生长率(SGR)的变化趋势与W GR类似。T2、T3、T4、T5、T6组的饲料系数(FCR)显著低于对照组(P<0.05),同时T4和T6组还显著低于其他益生菌添加组(P<0.05)。饲料中添加益生菌能显著提高肝脏淀粉酶及肝脏和肠道蛋白酶活性(P<0.05);对照组及T3和T4组肠道淀粉酶活性显著低于T5和T6组(P<0.05),显著高于T1和T2组(P<0.05)。各益生菌添加组血清溶菌酶活性均显著高于对照组(P<0.05)。持续投喂益生菌组(T4、T5、T6组)血清总超氧化物歧化酶活性显著高于对照组(P<0.05),且T6组还显著高于T4和T5组(P<0.05),非持续投喂益生菌组(T1、T2、T3组)中除T1组外均显著低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,饲料中添加益生菌显著降低血清碱性磷酸酶活性(P<0.05);血清酸性磷酸酶活性除T2和T3组显著高于对照组(P<0.05)、T6与对照组无显著差异(P>0.05)外,其余各组均显著低于对照组(P<0.05)。本试验条件下,饲料中添加枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌或二者的混合物(质量比1∶1)均能够促进军曹鱼幼鱼的生长,提高免疫酶和消化酶活性,持续投喂效果优于非持续投喂,以持续投喂2种益生菌混合物的效果最佳。

温度和盐度对军曹鱼幼鱼生长与抗氧化酶活性的影响

在实验室条件下,采用两因素交叉分组的方法,初步研究了环境因子(温度和盐度)对军曹鱼幼鱼肌肉抗氧化酶比活力的影响。温度设3个水平(26、29、32),盐度设4个水平(11、19、27、35),两个因素按其各自水平共产生12种组合。军曹鱼幼鱼在玻璃钢水槽内养殖20d后取样测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的比活力。结果表明:盐度因子诱导了军曹鱼的抗氧化应激反应,抗氧化酶活力随盐度降低而升高,SOD、CAT和GPX比活力分别从35时的17.74±3.38、19.44±2.66和13.70±2.99U/mg上升到11时的30.14±1.76、35.63±10.59和17.44±4.32U/mg;温度、盐度及因素间的交互作用对SOD和CAT比活力有显著影响(P<0.05);温度对GPX比活力无显著影响(P>0.05),而盐度及因素间的交互作用对GPX比活力影响显著(P<0.05)。

饲料中添加牛磺酸和胆固醇对军曹鱼生长、体组成和血液指标的影响

以军曹鱼(Rachycentron canadum)为实验对象,探讨饲料中添加牛磺酸和胆固醇对军曹鱼生长、体组成及相关生理指标的影响。以玉米蛋白粉含量40%、鱼粉含量16.8%的饲料作为基础饲料(对照组),在基础饲料中分别添加1.0%的牛磺酸(T-1%)、1.0%的胆固醇(C-1%)及同时添加1.0%的牛磺酸和1.0%的胆固醇(TC),得到4组实验饲料。实验鱼初始体重(108.2±3.0)g,养殖7周。相比对照组,饲料中添加1.0%的牛磺酸显著提高了军曹鱼的存活率、摄食率、特定生长率、饲料效率和蛋白储积率(P<0.05);添加1.0%的胆固醇对上述指标均无显著影响(P>0.05)。添加1.0%牛磺酸组全鱼粗蛋白和粗脂肪水平显著高于对照组,鱼体水分含量显著低于对照组(P<0.05);添加1.0%胆固醇组全鱼粗脂肪水平显著高于对照组(P<0.05),水分、粗蛋白和灰分的含量无显著变化。添加1.0%牛磺酸组血浆总蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),添加1.0%胆固醇组血浆胆固醇水平显著上升(P<0.05)。饲料中添加牛磺酸和胆固醇对军曹鱼的肠道消化酶、肝脏转氨酶活力均无显著影响(P>0.05)。同时添加1.0%牛磺酸和1.0%胆固醇无叠加效应。

军曹鱼营养成分的分析及评价

对军曹鱼RachycentroncanadumLinnaeus进行解剖比较、营养分析和评价 ,结果显示 ,军曹鱼的含肉率为 6 8.7%,肌肉蛋白质含量为 2 1 .2 %,氨基酸总量为 6 5 .0 5 %,蛋氨酸为第一限制氨基酸 ,其中赖氨酸含量高达 5 91mg·gN- 1 ,军曹鱼的不饱和脂肪酸含量为 6 5 .2 %,其中二十碳五烯酸 (eicosapentaenoicacid ,简称EPA)和二十二碳六烯酸 (docosahexenoicacid简称DHA)的含量分别为 4.5 %和 1 2 .0 %。研究结果表明 ,军曹鱼含肉率高 ,营养质量好 ,有较高的营养价值和药用价值。

盐度对军曹鱼稚鱼血液生理生化及鳃Na^+-K^+ ATPase活性的影响

军曹鱼稚鱼[体重(6.52±0.71)g]在适应不同盐度(5、10、20、30和37)14 d后盐度5和10处理组特定生长率(SGR)显著低于其它组(P(0.05),且该两组血红蛋白、血细胞比容和红细胞数也显著低于盐度30和37组,而血清皮质醇和乳酸含量则明显高于盐度30和37组。此外,低盐度组中稚鱼血糖有升高趋势,门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量随盐度降低而升高,但碱性磷酸酯酶(ALP)变化则相反。血清渗透压、Na+和C l-离子浓度与盐度呈正相关,而K+浓度呈负相关。鳃NKA活性在盐度20组中最低,在盐度10组中最高。研究显示军曹鱼稚鱼有较强的盐度适应能力,适度降低盐度并不影响其生长,但在过低盐度中仍呈应激反应,且盐度变化还可影响多项血液生理生化指标。

海水网箱养殖军曹鱼弧菌病病原的分离及其特性

从海水网箱养殖的患病军曹鱼 (Rachycentron canadum)的肾脏、肝脏等实质器官及腹水中分离出 1株致病菌即JA- 4 6菌。其特点如下 :革兰氏阴性短杆菌 ,极端单鞭毛 ,大小为 (1～ 2 )μm× (0 .5～ 1)μm,氧化酶和过氧化氢酶阳性 ,有运动性 ,最适温度 2 8～ 30℃ ,需盐生长 ,未见发光 ,对弧菌抑制剂 0 / 12 9敏感 (15 0 mg/ L) ,发酵葡萄糖不产气 ,在TCBS上菌落呈黄色。经 API- 2 0 E系统试剂盒检测和 ATB自动鉴定系统鉴定 ,该菌为创伤弧菌 (Vibrio vulnificus) ;其半数致死量 (L D50 )为 4 .1× 10 4 个细菌。药敏试验结果表明 ,氯霉素、复方新诺明、庆大霉素、环丙沙星、红霉素、氟哌酸、先锋霉素和丁胺卡那霉素等 8种药物对该菌株有抑制作用 。

微胶囊蛋氨酸或晶体蛋氨酸对军曹鱼幼鱼相关酶活性的影响

比较研究了低鱼粉饲料中添加微胶囊蛋氨酸或晶体蛋氨酸对军曹鱼（Rachycentron canadum）消化酶和蛋白质代谢酶活性的影响。将鱼粉组和减少鱼粉后蛋氨酸缺乏组分别设为正、负对照组,试验组饲料在负对照组的基础上分别添加晶体蛋氨酸（MET）、羟基蛋氨酸（MHA）、邻苯二甲酸醋酸纤维素微胶囊蛋氨酸（CAP）、丙烯酸树脂微胶囊蛋氨酸（RES）和棕榈酸甘油酯微胶囊蛋氨酸（TPA）,共7组等氮等脂饲料。每个处理设3个重复,每个重复放养20尾鱼,初始体质量（5.40±0.07）g,流水养殖8周,水温29~31℃。结果显示微胶囊蛋氨酸组的军曹鱼肠道胰蛋白酶活性显著高于正对照组和MET组（P〈0.05）,MET和TPA组肝脏谷草转氨酶（GOT）活性显著高于正负对照组（P〈0.05）;MET组军曹鱼幼鱼摄食后0.5 h肠道Na＋、K＋-ATP酶活性显著高于其他各组（P〈0.05）,摄食3 h后正对照组和RES组Na＋、K＋-ATP酶活性上升,显著高于CAP和MHA组（P〈0.05）,摄食8 h后正对照组和微胶囊蛋氨酸组显著高于MHA和MET组（P〈0.05）。以上结果表明,军曹鱼低鱼粉饲料中添加晶体蛋氨酸即可增进氨基酸的代谢和蛋白质的合成,微胶囊有助于蛋氨酸在肠道中的缓慢释放,提高肠道内胰蛋白酶活性。

摄食水平和饵料种类对军曹鱼幼鱼生长及氮收支的影响

研究了不同饵料种类(小沙丁鱼肉—NSF,鳗鱼配合饲料—CEFF,海水鱼配合饲料—CMFF)和摄食水平(从饥饿至饱食)对军曹鱼Rachycentron canadum幼鱼(平均初始体重约28g)生长和氮收支的影响,并建立了不同饵料种类时的生长—摄食关系和氮排泄—摄食关系。结果表明,投喂3种不同饵料的军曹鱼幼鱼湿重、干重和氮特定生长率均随摄食水平的增加呈显著增长趋势,其中,投喂NSF和CEFF组的特定生长率与摄食水平之间表现为减速增长曲线,投喂CMFF组的表现为直线;饱食时,投喂NSF和CEFF组的特定生长率接近而明显高于投喂CMFF组。投喂NSF和CEFF组的食物转化效率随摄食水平的增加而增长或呈先增长后下降的趋势,在饱食或次饱食(约为饱食量的70%)摄食水平组有最大值,而投喂CMFF组的食物转化效率随摄食水平的增加而持续增长,在饱食摄食水平时有最大值;除食物湿重转化效率外,投喂NSF组的食物转化效率最高,其次为投喂CEFF组,而两者均明显高于投喂CMFF组。3个饵料组的军曹鱼幼鱼摄食氮、排粪氮、生长氮和排泄氮均随摄食水平的增加呈显著增长趋势;投喂NSF和CEFF组的摄食氮、生长氮和排泄氮明显高于投喂CMFF组,而投喂CMFF组的排粪氮最高,其次为投喂CEFF组,且两者明显高于投喂NSF组。军曹鱼幼鱼投喂NSF、CEFF和CMFF时饱食和次饱食摄食水平的氮收支方程分别为:100CN=1.1(0.9)FN+27.0(29.3)GN+71.9(69.8)UN、100CN=5.2(4.3)FN+27.0(28.7)GN+67.8(67.0)UN和100CN=9.9(8.4)FN+21.6(10.1)GN+68.5(81.5)UN(氮收支方程括号中的为次饱食数据);3个饵料组军曹鱼幼鱼饱时和次饱食时摄食氮中用于排粪的比例较小且变化不大,投喂NSF和CEFF组次饱食时摄食氮中用于生长的比例较饱食时略大而用于排泄的比例较饱食时略小,但投喂CMFF组饱食时摄食氮中用于生长的比例明显高于而用于排泄的比例明显低于次饱食摄食水平时。因此,军曹鱼幼鱼的氮排泄和氮收支方程受摄食水平和饵料种类双重因素的影响,但不管投喂何种饵料,摄食氮增大是导致鱼类氮排泄增加的主要原因。综合考虑生长、食物转化效率、氮排泄和氮收支方程各因素,军曹鱼由幼鱼优先选择投喂的饵料为NSF,其次为CEFF,在本实验的生长阶段,两者的适宜投喂水平以占饱食量的70%—100%为佳。

饲料中添加甜菜碱对军曹鱼生长、体营养成分和血清生化指标的影响

通过8周的养殖试验,评估了饲料中添加甜菜碱对军曹鱼(Rachycentron canadum)生长、体营养成分、血清生化指标和肝脏中酶活性的影响。共设计6种饲料,甜菜碱添加水平分别为0、0.05%、0.10%、0.20%、0.30%和0.40%。结果显示,添加水平为0.05%时增重率(WG)和特定生长率(SGR)最高,肝脏组织状况最好,全鱼和肌肉中蛋白质质量分数最高;添加水平超过0.20%时肥满度(CF)随甜菜碱添加量的上升而下降。各添加组的肝体比(HSI)均显著低于对照组且全鱼和肝脏中(0.10%添加组除外)的脂肪质量分数均低于对照组;血清指标中各添加组的血清甘油三酯(TG)浓度均高于对照组,但随着添加量的提高有先升后降的趋势;肝脏中谷丙转氨酶(GPT)的活性显著低于对照组。由此可见,饲料中添加适量的甜菜碱可以促进军曹鱼的生长,具有一定的降脂作用,利于脂肪代谢。

军曹鱼幼鱼对饲料中精氨酸的需要量

选择初始平均质量为(14.70±0.30)g的军曹鱼幼鱼,在56 d的饲养期中分别饲喂含精氨酸质量分数为1.84%、2.07%、2.30%、2.53%和2.76%(或饲料蛋白中精氨酸质量分数为4.0%、4.5%、5.0%、5.5%、6.0%)的等氮等能精制饲料,观察精氨酸对军曹鱼生长和全鱼组成成分的影响.结果表明,当饲料中精氨酸质量分数为2.30%时,军曹鱼的特定生长率、增质量率及存活率达到最高值.饲料中精氨酸质量分数为2.30%时,全鱼粗蛋白和精氨酸水平达到最高;精氨酸质量分数为2.76%时,全鱼粗脂肪水平达到最高.以增质量率为指标,一元二次回归分析表明,军曹鱼对饲料中精氨酸的适宜需要量为2.38%(占饲料蛋白质量分数的5.17%).