农杆菌介导大豆子叶节遗传转化体系的优化

利用农杆菌菌株EHAl05，对17个栽培大豆品种的大豆子叶节进行了侵染，从大豆基因型、氯气灭菌时间、外植体状态、菌株活力、侵染浓度、侵染时间、共培养时间等方面进行了优化。结果表明：氯气灭菌14～18h，可在不影响大豆种子活力的同时最大限度的减少污染；暗处理1d的外植体活力高于光照处理5～7d的外植体；菌液浓度（OD600nm）在0．8～1．0且侵染浓度OD600nm）为0．6～0．8时GUS瞬时表达率最高；适宜的侵染时间和共培养天数分圳为30min和4d。在上述优化研究基础上，形成一套综合的转基因体系，该体系的最高转化率可达3．33％。不同处理下的GUS瞬时表达率以及17个大豆品种的丛生芽诱导率综合评价显示，适宜转化的基因型为TL-1、HC-3、HC-6、Wil-liams82。