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农杆菌子房注射法对金钗石斛的活体转化研究
被引量:
6
1
作者
刘其府
董会
+4 位作者
曾宋君
陈之林
吴坤林
张建霞
段俊
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期378-382,共5页
对金钗石斛Dendrobium nobile进行人工自花授粉,在授粉之后10、20、30、40、45、50和60 d分别将工程化根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens EHA105(pCAMBIA1301)直接注射入子房内部.150 d后,金钗石斛蒴果成熟,摘取果实,进行种子β-葡...
对金钗石斛Dendrobium nobile进行人工自花授粉,在授粉之后10、20、30、40、45、50和60 d分别将工程化根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens EHA105(pCAMBIA1301)直接注射入子房内部.150 d后,金钗石斛蒴果成熟,摘取果实,进行种子β-葡萄糖苷酸酶(GUS)染色、无菌播种、潮霉素筛选以及PCR检测试验.结果表明:子房注射对果实发育具有较大影响,在授粉后10~30 d进行子房注射后,果实脱落;在授粉后45 d进行子房注射,成熟果实注射部位的种子GUS染色率最高,可达18%;无菌播种之后,经潮霉素筛选,获得11株幼苗,每株植株均表现出GUS染色反应;随机挑选4株幼苗进行PCR检测,发现均能扩增出预期条带,说明外源基因已经整合到植株基因组内.农杆菌子房注射法在兰科植物转基因的成功应用,可以为兰科植物育种提供一种简单高效的方法.
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关键词
金钗石斛
农杆菌子房注射法
GUS组织化学染色
活体转化
PCR检测
下载PDF
职称材料
题名
农杆菌子房注射法对金钗石斛的活体转化研究
被引量:
6
1
作者
刘其府
董会
曾宋君
陈之林
吴坤林
张建霞
段俊
机构
中国科学院华南植物园
中国科学院大学
华南农业大学生命科学学院
贵州园艺研究所
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期378-382,共5页
基金
国家自然科学基金(31160400)
文摘
对金钗石斛Dendrobium nobile进行人工自花授粉,在授粉之后10、20、30、40、45、50和60 d分别将工程化根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens EHA105(pCAMBIA1301)直接注射入子房内部.150 d后,金钗石斛蒴果成熟,摘取果实,进行种子β-葡萄糖苷酸酶(GUS)染色、无菌播种、潮霉素筛选以及PCR检测试验.结果表明:子房注射对果实发育具有较大影响,在授粉后10~30 d进行子房注射后,果实脱落;在授粉后45 d进行子房注射,成熟果实注射部位的种子GUS染色率最高,可达18%;无菌播种之后,经潮霉素筛选,获得11株幼苗,每株植株均表现出GUS染色反应;随机挑选4株幼苗进行PCR检测,发现均能扩增出预期条带,说明外源基因已经整合到植株基因组内.农杆菌子房注射法在兰科植物转基因的成功应用,可以为兰科植物育种提供一种简单高效的方法.
关键词
金钗石斛
农杆菌子房注射法
GUS组织化学染色
活体转化
PCR检测
Keywords
Dendrobium nobile
ovary-injection of Agrobacterium
GUS assay
in planta transformation
detection of polymerase chainreaction
分类号
S682 [农业科学—观赏园艺]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
农杆菌子房注射法对金钗石斛的活体转化研究
刘其府
董会
曾宋君
陈之林
吴坤林
张建霞
段俊
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
6
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