降香及其替代药材改善急性心肌缺血所致的心肌损伤及冠脉微循环障碍

目的探讨降香及替代药材交趾黄檀对急性心肌缺血所致的心肌损伤及冠脉微循环障碍的保护作用。方法采用左前降支冠脉结扎法对大鼠进行造模,造模后的大鼠随机分到模型组(MI)、尼可地尔组(3 mg·kg^(-1))、血塞通组(30 mg·kg^(-1))、降香水提物组(1.5,3和6 g·kg^(-1))、交趾水提物组(1.5,3和6 g·kg^(-1))及假手术组,造模24 h后给药,每天给药1次,连续给药10 d,末次给药1 h后进行观察及取材,假手术和MI组给予相应剂量的蒸馏水。RGB色度分析检测耳廓,足底部“血瘀证”;插管检测大鼠血流动力学指标动脉收缩压(SBP)、动脉舒张压(DBP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末期压(LVEDP)和等容收缩期左室内压力的上升/下降的最大速率(±dp/dt_(max));试剂盒检测血清中谷草转氨酶(GOT)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和一氧化氮(NO)含量;HE染色进行组织病理学分析;ELISA检测血浆内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)和血友病因子(vWF)含量;1,1′-双十二烷基-3,3,3′,3′-四甲基吲哚菁高氯酸盐〔DiI(C12)〕灌注检测梗死边界及梗死远端区微血管面积、密度、空隙度,并根据泊肃叶公式计算出微血管血流阻力;免疫组化法检测心肌组织中CD31的表达;RT-PCR检测一氧化氮合酶(eNOS)、血管生成素2(Angpt-2)、碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)、血小板衍生生长因子B(PDGF-B)、内皮生长因子(VEGF)和内皮生长因子受体2(VEGFR2)mRNA的表达。结果降香、交趾水提物可改善冠脉结扎所引起耳廓和足底RGB色度;提高大鼠SBP,DBP,LVSP和±dp/dt max,改善心功能;可减轻梗死区心肌细胞萎缩,减小细胞间隙,减少炎症细胞浸润,减轻肌丝溶解;降香、交趾水提物能降低急性心肌梗死大鼠血清中GOT,CK和CK-MB及血浆中sEPCR和vWF的含量,可减轻心肌和内皮损伤,提高血浆NO浓度,改善内皮功能;降香、交趾水提物可显著增加梗死边界及远端区微血血管面积和密度;降低梗死边界和远端区微血管空隙度及血流阻力,可显著增加梗死边界CD31的表达;可增加促血管生成因子b-FGF,PDGF-B,Angpt-2,VEGF和VEGFR2 mRNA的表达。结论降香、交趾水提物均可改善急性心肌梗死引起的心功能及微血管障碍,可能是通过促进冠脉微血管再生发挥作用,说明降香和交趾黄檀在心肌缺血方面具有一定的替代性。

交趾黄檀心材改善大鼠急性心肌缺血的UPLC-Q-TOF-MS代谢组学研究

研究交趾黄檀心材对冠脉左前降支结扎大鼠血浆内源性代谢物的影响,分析交趾黄檀心材改善急性心肌缺血损伤的作用机制。通过指纹图谱的建立验证交趾黄檀心材成分的稳定一致后,将雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、交趾黄檀心材组(6 g·kg^(-1)),每组10只。假手术组只开胸穿线不结扎,其余组构建冠脉左前降支结扎大鼠模型。给药10 d后取材取血,进行心脏HE染色;检测血浆中心肌损伤指标肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的含量,能量代谢相关指标葡萄糖(glucose,Glu)以及血管内皮功能指标一氧化氮(nitric oxide,NO)的含量;并采用高效液相-飞行时间-质谱联用技术检测血浆内源性代谢物。结果表明,交趾黄檀心材能降低模型大鼠血浆中CK-MB及LDH含量,减轻心肌损伤;血浆中Glu含量降低,提示心肌能量代谢的改善;NO含量升高,血管内皮损伤改善,促进血管扩张。交趾黄檀心材可以改善大鼠冠脉左前降支结扎导致的细胞间隙增大、心肌炎性细胞浸润及肌丝断裂现象。代谢组学研究显示,模型组大鼠血浆中26种代谢产物含量显著上升,27种代谢产物含量显著下降;给予交趾黄檀心材后能明显回调其中20种代谢产物含量。交趾黄檀心材能够显著回调因冠脉左前降支结扎的大鼠代谢异常,其机制可能是调节心脏能量代谢、NO生成以及炎症等途径。该结果可为进一步解释交趾黄檀改善急性心肌损伤作用提供相应依据。