丹参素对猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道的作用

目的观察丹参素(DS-182)对原代培养猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道(KCa)的作用,从单个钾通道水平揭示其扩冠机制.方法采用膜片钳单通道电流记录技术.结果①猪冠脉平滑肌细胞KCa的单通道电导值高,为(291.74±4.89)pS;对膜电位变化及细胞内钙离子浓度变化敏感,能被5～20 mmol/L膜内侧四乙基铵(TEA)所阻断.②在细胞贴附式膜片方式下,细胞外应用10～20μmol/L的DS-182对通道具明显的激活效应;而在内面向外式膜片方式下,细胞内应用5～30μmol/L的DS-182对通道均无明显作用.结论DS-182对通道的激活作用是非直接的,需要一系列的胞内过程.

Mg^(2+)对猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道的激活作用的初步研究

目的：研究Mg2+对猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道的作用，以揭示Mg2+扩血管作用的电生理机制。方法：应用膜片钳制技术inside－out方式记录冠脉平滑肌上的单通道活动，经PCLAMP软件进行微机采样储存数据和数据的分析处理。结果：Mg2+对猪冠脉平滑肌钙激活钾通道具有明显激活作用：增强通道开放概率P0，增加膜片通道开放数目。结论：Mg2+对钙激活钾通道的激活作用可能为Mg2+调节心血管活动的重要机制之一。

原代培养猪冠脉平滑肌细胞的电压依赖和钙激活的钾通道

作者应用改良的细胞膜片钳制技术对原代培养的猪冠状动脉平滑肌细胞的电压依赖性和钙激活的钾通道的特性进行了研究。整个实验均在计算机的控制下进行,各种膜片中引导出的电流,通过膜片钳制放大器后,均输入至计算机进行采样、存贮和分析。结果显示:①这种通道活动呈明显的电压依赖性,随膜的去极化而激活。

机械敏感性离子通道Piezo1介导高静水压诱导大鼠冠脉平滑肌细胞表型改变

目的探究Piezo1在高静水压诱导的冠脉平滑肌细胞(CASMCs)表型改变中的作用机制。方法分别于0、120和180 mmHg压力下干预原代Wistar大鼠CASMCs 24 h,Western blot检测Piezo1、收缩表型相关蛋白Cav1.2、SM-MHC、α-SMA和合成表型相关蛋白OPN、MMP-2、Col1a1的表达,激光共聚焦检测压力对Piezo1介导的钙离子内流的影响;分别用Piezo1激动剂Yoda1、抑制剂GsMTx4处理CASMCs以及siRNA敲低Piezo1,Western blot检测收缩表型及合成表型相关蛋白的表达。结果与0 mmHg相比,120和180 mmHg干预CASMCs后,Piezo1、OPN、MMP-2、Col1a1表达增加,Cav1.2、SM-MHC、α-SMA表达减少。180 mmHg高压干预后,Piezo1介导的钙离子内流强于常压对照组,但敲低Piezo1后有所下降。在常压下,用Yoda1处理CASMCs后,收缩表型相关蛋白表达减少,合成表型相关蛋白表达增加。与对照组相比,180 mmHg下分别用GsMTx4抑制和siRNA敲低Piezo1后,收缩表型相关蛋白表达增加,合成表型相关蛋白表达减少。结论Piezo1在高静水压诱导CASMCs由收缩表型向合成表型转变中起促进作用。

丹参酮ⅡA磺酸钠对原代培养猪冠脉平滑肌钙激活钾通道的影响(英文)

目的 :研究丹参酮ⅡA磺酸钠 (DS 2 0 1)对培养猪冠脉平滑肌细胞上钙激活性钾通道的作用。方法 :采用膜片钳单通道记录技术 ,观察给药前后通道特性变化。结果 :证实 :①猪冠脉平滑肌钙激活钾通道的单通道电导值高 ,为 2 91 74± 17 6 3pS。对膜电位变化及胞内钙离子浓度变化敏感。能被 5～ 2 0mmol/LTEA所阻断。②在细胞贴附式膜片方式下 ,5～ 30 μmol/L的DS 2 0 1对通道均无明显作用 ;而在内面向外式膜片方式下 ,5～ 2 0 μmol/L的DS 2 0 1对通道表现出明显的激活效应。结论 :DS 2 0

神经调节蛋白1对冠状动脉平滑肌细胞表达血管生成因子的影响

目的:探讨神经调节蛋白1(neuregulin-1,NRG-1)对人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMCs)表达血管生成因子的影响。方法:培养HCASMCs,实验使用第3代细胞。用Western blot法检测细胞Erb B的表达和磷酸化。在正常、缺氧缺血清或NRG-1(100μg/L)处理条件下,用Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素1(Ang-1)和血管生成素2(Ang-2)表达的改变。结果:Erb B2、Erb B3和Erb B4均能在HCASMCs中表达,加入NRG-1后,这3种Erb B的磷酸化水平均增加。与对照组比较,在缺氧缺血清组HCASMCs中VEGF和Ang-1的表达明显增加(P<0.05),而Ang-2的表达差异无统计学显著性。与缺氧缺血清组比较,NRG-1处理组的HCASMCs表达VEGF和Ang-1进一步显著增加(P<0.05),而Ang-2的表达差异无统计学显著性。结论:HCASMCs能表达Erb B2、Erb B3和Erb B4,加入NRG-1增强Erb B2、Erb B3和Erb B4的磷酸化。缺氧缺血清和NRG-1处理均能增加VEGF和Ang-1在HCASMCs中的表达。