冬青卫矛白粉病的发生与综合防治

冬青卫矛俗称大叶黄杨,是常见绿篱植物,观赏价值高。由大叶黄杨白粉菌导致的冬青卫矛白粉病是冬青卫矛生长期一种重要病害。本文总结了该病的症状和发病规律,分析了常见的诱病因子,系统地总结了关键防治技术。冬青卫矛(Euonymus japonicus Thunb.)为卫矛科卫矛属多年生灌木,俗称大叶黄杨,原产于日本南部,现在中国浙江、广东、湖南、福建、江西、陕西等地均有分布。其花期6~7月,果期为8~10月,叶片四季常青,具有较好的观赏价值。其具有耐寒、耐旱、耐修剪、易养护、易繁殖等优秀品质,常作为绿篱植物的组成部分。除观赏价值外,冬青卫矛还具有吸收烟尘、净化空气的生态价值,是理想的污染区绿化树种。

冬青卫矛叶片质外体适应冬季胁迫的蛋白质组学分析

植物的质外体在感知外界信号和胁迫应答中起重要作用。该研究采用生理生化和蛋白质组学方法,对秋季和冬季冬青卫矛叶片的理化指标、微观结构以及叶片质外体液体中的蛋白变化进行比较分析,探索冬青卫矛叶片质外体响应冻胁迫的分子机制,以期为植物抗冻分子机制研究提供依据。结果表明:(1)冬季冬青卫矛叶片中MDA、可溶性糖含量以及SOD、POD活性均显著升高,气孔张开度减小,叶片厚度变小。(2)冬季冬青卫矛质外体液体中的蛋白质种类和含量显著高于秋季。(3)冬青卫矛叶片质外体液体中共鉴定到838个肽段和194个蛋白质;与秋季相比,冬季冬青卫矛叶片质外体液体中共筛选到43种差异积累蛋白(DAPs),其中26个蛋白质显著上调,17个蛋白质显著下调;蛋白表达模式显示,胚胎发育晚期丰富蛋白质、铁超氧化物歧化酶、过氧化物酶、丝氨酸羧肽酶等在冬季表达量较高,推测它们可能是冬季胁迫响应敏感的蛋白质。(4)KEGG富集分析显示,差异蛋白主要与应激防御、细胞壁修饰、抗病、自由基清除、甘油脂类代谢、淀粉和蔗糖代谢、次生代谢物的生物合成等生物学过程相关。(5)验证实验结果表明,冬季冬青卫矛8个差异积累蛋白与其对应的基因的表达趋势一致。研究认为,冬季冬青卫矛质外体液体中积累的蛋白可通过清除活性氧、促进单糖、寡糖和游离氨基酸等渗透调节物的生成而增强对环境的适应;推测冬青卫矛质外体中积累的单糖和寡糖可能通过增加质外体液体的浓度从而降低冰点,进而提高冬青卫矛对冬季胁迫的耐受性。

冬青卫矛扦插苗响应低温胁迫的生理分析

【目的】探明冬青卫矛响应低温的生理机制,为其引种和培育提供参考。【方法】以冬青卫矛(Euonymus japonicus)一年生扦插苗为材料,经不同人工低温胁迫24 h后,测定叶片的叶绿素含量及荧光参数、相对含水量、相对电导率、渗透调节物质含量、抗氧化酶活性等,复温处理后观测生长表现。【结果】随温度降低,叶绿素含量、PSⅡ最大光化学量子产量和相对含水量呈下降趋势;相对电导率、可溶性糖和可溶性蛋白含量、过氧化物酶活性呈上升趋势;光化学猝灭系数、脯氨酸含量、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性先上升后降低;非光化学猝灭系数为“降-升-降”变化趋势;温度与各生理指标之间及绝大多数生理指标之间显著相关。多项生理指标在0℃和-4℃处理期间变化幅度小或不显著,植株能恢复生长,而在-8℃和-12℃处理下变化幅度大甚至出现转折,植株不能恢复生长。【结论】人工低温胁迫下,冬青卫矛一年生扦插苗的抗寒反应是不同生理过程综合作用的结果,其可以较好地耐受-4℃以上的低温胁迫,但无法抵御-8℃以下低温。

冬青卫矛的大环生物碱分离鉴定及其杀虫活性研究

用柱层析和高效液相色谱等方法从卫矛科卫矛属植物冬青卫矛(Euonymus japonicusThunb.)的根皮乙酸乙酯提取物中分离到4个β-二氢沉香呋喃大环生物碱,它们的结构经核磁共振波谱分析和熔点测定鉴定为卫矛羰碱(evonine)(A),1-脱乙酰-1-苯甲酰卫矛羰碱(B),ebenifoline E-IV(C)和mayteine(D)。生物活性追踪试验表明,化合物A、B、C、D对粘虫(Mythimna separata)幼虫的毒力LC50分别为23.23、5.44、5.25和4.66 mg.mL-1。

冬青卫矛内生真菌2QR1菌株代谢产物的杀菌活性

为寻找天然植物源新的具有农药活性的先导化合物,从冬青卫矛根皮中分离到1株内生真菌,编号为2QR1,初步鉴定其为半知菌亚门,曲霉属(Aspergillus)。室内活性测定结果表明,2QR1菌株发酵液的杀菌活性远高于菌丝体的杀菌活性。该菌株发酵液乙酸乙酯萃取物对小麦根腐病菌、小麦赤霉病菌、苹果炭疽病菌、玉米大斑病菌、番茄叶霉病菌、烟草赤星病菌和马铃薯干腐病菌菌丝生长抑制的有效中质量浓度EC50值分别为53.6,63.1,63.3,98.2,106.5,115.9和166.3μg/mL;对玉米大斑病菌、小麦根腐病菌、烟草赤星病菌和马铃薯干腐病菌抑制孢子萌发的有效中质量浓度EC50值分别为94.8,139.1,146.6和180.1μg/mL;在质量浓度为500μg/mL时,对枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径在16 mm以上。盆栽试验结果表明,2QR1菌株发酵液乙酸乙酯萃取物在质量浓度为2 000μg/mL时,对小麦白粉病的保护作用和治疗作用分别为61.9%和81.6%。选用硅胶柱层析,以杀菌活性追踪为指导,对该菌株发酵液乙酸乙酯萃取物进行了杀菌活性成分的分离,得到化合物B9。化合物B9对玉米大斑病菌、烟草赤星病菌、小麦根腐病菌和马铃薯干腐病菌抑制孢子萌发的有效中质量浓度EC50值分别为0.8,1.4,3.3和5.0μg/mL。

冬青卫矛内生放线菌YDG17菌株发酵液抑菌活性研究

从冬青卫矛植株中筛选得到一株内生链霉菌YDG17,其发酵液对多种植物病原真菌有较强的抑制作用。室内生物测定结果表明,YDG17菌株发酵液对供试的11种植物病原真菌菌丝生长均有一定的抑制作用,其中对小麦赤霉病菌Fusarium gram inearum、番茄灰霉病菌Fulvia fulvum和番茄早疫病菌Alternaria solani的抑制作用最强,EC50值分别为259.98、336.13和100.72mg/L;对供试的3种植物病原真菌孢子萌发也均有一定的抑制作用,其中对番茄灰霉病菌孢子萌发的抑制作用最强,EC50值为87.84mg/L。离体子叶法测定结果表明,发酵液原液对番茄灰霉病的保护效果为97.62%,治疗效果为79.63%。盆栽试验结果表明,发酵液原液对番茄灰霉病的保护效果为71.34%,治疗效果为64.23%。捷克八溶剂系统纸色谱测定结果表明,该发酵液的主要活性物质为碱性水溶性抗生素。选用弱酸性离子交换树脂吸附法对YDG17发酵液活性成分进行了初步分离,并对其活性馏分进行ESI-M S/M S分析,表明其活性物质主要为链丝菌素类化合物,该类化合物为首次从植物内生菌中分离得到。

脱水胁迫对连翘和冬青卫矛叶片细胞质外体和微环境的影响

用压力室、电导法和原子吸收分光光度分析法综合分析测定了连翘[Forsythiasuspensa (Thunb.) Vahl]和冬青卫矛(Euonymus japonicus Thunb.)在不同程度脱水胁迫时细胞外部微环境的变化.结果表明:(1)在脱水胁迫条件下,叶片细胞随着脱水胁迫强度的加大,细胞内离子外渗的累计量不断加大,但细胞内离子外渗的速度在不同的区间内并无明显的改变,即细胞膜的透性在所测范围内没有明显变化.(2)脱水胁迫同时造成了叶片质外体和共质体溶液中钠、钾离子浓度的增加,但质外体比共质体溶液中钠、钾离子浓度的增加幅度更高,导致细胞内、外离子浓度梯度的改变和离子平衡膜电位的改变,这些改变有可能引起细胞的次生生理变化,并有可能与植物的伤害反应和抗性有关.

冬青卫矛茎内寄生链格孢属真菌生物学特性分析

对从新鲜冬青卫矛茎内分离得到的链格孢属真菌菌株进行培养。结果表明:(1)菌落在PDA培养基和改良KB培养基上舒展,白色、垫状,后期菌落变暗褐色,孢子黑色,基质呈黑色;(2)菌株在25℃培养14 d后,在白色菌落表面形成暗褐色菌落,为菌株分生孢子所形成,并有黑色色素分泌;(3)菌株属于丝孢纲丝孢目链格孢属的一种;(4)对菌株孢子观察后,发现多型现象,即发现了有性与无性生殖过程,将其有性态定为子囊菌的李维菌属。

冬青卫矛的性状与显微鉴别

目的:研究冬青卫矛药用部位根、茎皮、叶的生药学特征,为其鉴别和应用提供参考依据。方法:采用性状鉴别与显微鉴别。结果:冬青卫矛根和茎皮横切面与粉末中均可见白色胶丝分布,茎皮与叶的粉末都可见众多草酸钙簇晶,多为钝角。结论:冬青卫矛显微结构特征明显,可为其生药鉴别及进一步开发利用提供参考依据。

高质量冬青卫矛DNA提取方法

为了从富含多酚和多糖的冬青卫矛叶片中分离高质量基因组DNA,比较了SDS法、CTAB法、高盐低pH值法及改良的CTAB法等提取DNA的方法,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。结果表明,使用该方法从冬青卫矛叶片中分离得到高纯度、高产量的DNA,A260/A280为1.84,1 g鲜叶的DNA产量为213.5μg,表明该方法可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中提取高质量DNA。

冬青卫矛种子色素的提取及性质研究

研究了冬青卫矛种子色素的提取条件和理化性质。结果表明,丙酮是冬青卫矛种子色素较好的浸提剂;其最佳提取条件为:料液比1∶10(g∶mL),浸提温度35℃,浸提时间40min,提取率为6.8%。对色素理化性质研究表明:该色素是脂溶性的,对热、添加物、金属离子、还原剂稳定,对酸碱均有较好的稳定性,但耐阳光性、耐氧化性较差;它为类胡萝卜素的天然色素。

冬青卫矛的研究

本文介绍了冬青卫矛的形态特征、品种资源、地理分布、优良特性及繁殖技术 ,为我国华北平原中原地区快速繁殖和推广其乔木新品种———“粗枝”冬青卫矛等提供了新的依据。

冬青卫矛巢蛾在丽水的发生情况调查

[目的]查明在丽水危害大叶黄杨及其变种的巢蛾种类,了解其在丽水的生活史。[方法]通过生活史及习性观察、形态观察及虫种鉴定对该虫在丽水的发生情况进行了调查。[结果]冬青卫矛巢蛾(Yponomeuta griseatus)在浙江丽水1年发生6代,以幼虫或蛹在叶背越冬;幼虫分别在4月中旬、6月上旬、7月上旬、7月下旬、9月中旬、11月中旬出现,危害大叶黄杨及其变种,在枝叶间结网取食叶片;成虫白天隐蔽晚上活动,产卵于叶背。[结论]为冬青卫矛巢蛾的防治提供了参考。

两种景观灯光源对冬青卫矛生长及光合特性的影响

采用MHL (金属卤化物灯)和LED (发光二极管)模拟景观灯夜间照射4小时,以不照光为空白对照,研究两种景观灯光源对冬青卫矛生长及光合特性的影响。结果表明:MHL为热光源,光谱能量主要集中在绿光和黄光两处,LED为冷光源,光谱能量主要集中在红橙光和蓝光两处。MHL夜间照射能显著提高冬青卫矛的叶面温度2˚C (P 【0.05),LED照射仅高出对照组0.3˚C;两种景观灯夜间照射均显著降低了冬青卫矛的株高、叶面积、叶绿素和类胡萝卜素含量以及叶绿素a/b (P 【0.05),并显著提高了相对电导率和表观量子效率(P 【0.05),其中MHL照射还会使其叶片形状趋于圆形。除此之外,MHL和LED夜间照射能显著提高可溶性糖含量、比叶重和最大净光合速率(P 【0.05),其中LED相比MHL效果显著;MHL和LED夜间照射能显著降低光补偿点和光饱和点(P 【0.05),其中MHL相比LED效果显著。

冬青卫矛内生放线菌Streptomyces flavofuscus G1发酵液中抑菌活性成分研究

从冬青卫矛内生放线菌Streptomyces flavofuscus G1的发酵液中分离得到化合物G13和G19。经核磁共振波谱及质谱分析,并结合相关文献,两个化合物分别被鉴定为phencomycin(G13)和4'-deacetyl-(-)-griseusin A(G19)。抑菌活性测定结果表明:G19对水稻白叶枯病菌Xanthomonas oryzae pv.oryzae、铜绿假单孢菌Pseudomonas aeruginosa(1.203 1)、蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus(1.184 6)及金黄色葡萄球菌Staphyloccocus aureus(1.008 9)等供试病原细菌具有强烈的抑制作用,其最低抑菌浓度(MIC)值均为1.56μg/m L;对苹果树腐烂病菌Valsa mali和小麦赤霉病菌Fusarium graminearum菌丝生长亦有明显的抑制作用,其IC50值分别为14.70和24.35μg/m L。而G13对植物病原真菌油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum和苹果树腐烂病菌V.mali菌丝生长有强烈的抑制作用,其IC50值分别为5.21和4.82μg/m L。

冬青卫矛内生真菌代谢产物农用杀菌活性筛选

从冬青卫矛(Euonymus japonicus)中分离到59株植物内生真菌,农用杀菌活性测定表明,M-1菌株发酵液对番茄早疫病菌(Alernaria solani)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium)和苹果炭疽病菌(Colleto-trichum gloesporioides)菌丝生长抑制率达到80.3%、78.5%和87.8%。M-1发酵液对枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈直径分别为23.0 mm、20.0 mm、16.0 mm和20.0 mm。M-1发酵液的乙酸乙酯萃取物对苹果炭疽病菌的毒力最高,IC50为63.6μg/mL。Doskochilova溶剂系统鉴定表明,M-1的发酵液中含有硫藤黄菌素类抗生素。

山西临汾市苗圃冬青卫矛抽条原因及防治对策研究

对山西临汾市区2008～2009年冬青卫矛的抽条现象进行调查,分析了引起抽条的原因,并提出防治对策,以为冬青卫矛的管理提供参考。

冬青卫矛叶部病害调查研究

冬青卫矛(Euonymus japonicus Thunb.)叶部病害在我国普遍发生且严重影响其观赏价值和绿化效果,发病严重时可导致整株枯死。系统调查了冬青卫矛叶部病害发生及危害情况,并对冬青卫矛主要病害病原菌进行了鉴定。结果表明:冬青卫矛叶部病害的症状表现主要有4种:Ⅰ型病害侵染时间早,6~7月为发病盛期;Ⅱ型和Ⅲ型病害常常混合发生,同一叶片可有2种病斑,8~10月为发病盛期;Ⅳ型病害只能从伤口侵入,该病原菌对营养的要求不严格,具有较强的适应能力,且在高温高湿条件下,易造成病害的迅速流行和爆发。结合形态学观察及ITS序列分子鉴定分析,将Ⅳ型病害病原菌鉴定为Neopestalotiopsis foedans。