烟草RNA提取方法的优化及冰盒储存时间的探讨

烟草作为一个模式植物在分子生物学研究中发挥着重要的作用，其总RNA的提取是后续分子生物学研究的前提和关键之一。针对过柱型的RNA提取试剂盒在有效的清除烟草中糖类、蛋白质及次生代谢物的同时，影响了RNA产量和浓度，以及远距离携带液氮取材困难的问题，设置不同提取方法和冰盒不同储运时间处理，对天根RNA simple总RNA提取试剂盒进行了优化，并对冰盒贮存烟叶时间与RNA提取质量的关系进行了探讨。结果表明：优化试剂盒法获得了高浓度高质量的烟草总RNA。经琼脂糖电泳检测，利用该方法提取的烟草总RNA，条带清晰、无拖尾现象，28S与18S 的比例约为2∶1。紫外吸收值的测定表明，所提取的烟草总RNA的A 260/A 280的值在1．8～1．9，浓度显著高于原方法；而冰盒能在5 h内保证所取样品RNA 的完整性，适宜于短途运输储存。

不同取样方法对苜蓿雄性不育系Ms-4RNA质量的影响

本文利用试剂盒法研究了冰盒保存不同时间对苜蓿雄性不育系MS-4花蕾和小花的RNA质量影响,拟筛选出适宜苜蓿雄性不育系MS-4 RNA研究的有效取样方法,解决远距离携带液氮取材困难的问题。结果表明:苜蓿雄性不育系MS-4花蕾的和小花RNA取样后冰盒保存6h内,琼脂糖凝胶电泳检测苜蓿雄性不育系MS-4总RNA,条带清晰,无拖尾现象,28s与18s的比例约为2:1,A_(260)/A_(280)的值在1.90-2.15,能保证提取的RNA的完整性,可作为苜蓿雄性不育系MS-4分子生物学研究的有效材料。因此,苜蓿雄性不育系MS-4花蕾和小花冰盒保存6h是基地取样短途运输的允许时间。