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血清金属蛋白酶组织抑制剂3和性别决定区Y框蛋白2在2型糖尿病肾损伤早期诊断中的临床应用
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作者 张洪利 王海成 +2 位作者 李华 未瑞超 曾玲 《临床肾脏病杂志》 2024年第7期529-535,共7页
目的探究血清金属蛋白酶组织抑制剂3(tissue inhibitors of metalloproteinases 3,TIMP3)和性别决定区Y框蛋白2(transcription factor determining region Y box protein 2,SOX2)对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)肾损伤的早... 目的探究血清金属蛋白酶组织抑制剂3(tissue inhibitors of metalloproteinases 3,TIMP3)和性别决定区Y框蛋白2(transcription factor determining region Y box protein 2,SOX2)对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)肾损伤的早期诊断。方法选取2022年4月至2023年4月在华北石油管理局总医院就诊的102例T2DM患者为研究对象,根据24 h尿蛋白排泄率(uri-nary albumin excretion rate,UAER)将T2DM患者分为肾损伤组(n=40)和无肾损伤组(n=62),另选取同期在华北石油管理局总医院行体检的健康者50名为对照组。酶联免疫吸附法测定所有受试者血清TIMP3、SOX2水平;比较3组受试者一般资料、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)、UAER、血肌酐(serum creatinine,Scr)、估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)、血清TIMP3、SOX2水平;Pearson相关性分析血清TIMP3与SOX2及两者与HbA1c、UAER、Scr、eGFR之间的关系;受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析血清TIMP3、SOX2对T2DM患者肾损伤的诊断价值。结果T2DM患者血清TIMP3[(0.68±0.17)μg/L比(1.35±0.35)μg/L]及eGFR[(105.99±20.56)mL·min^(-1)·(1.73 m^(2))比(133.15±26.18)mL·min^(-1)·(1.73 m^(2))^(-1)]显著低于对照组(P<0.05),且肾损伤患者血清TIMP3[(0.47±0.11)μg/L比(0.82±0.21)^(-1)μg/L]及eGFR[(74.69±10.22)mL·min^(-1)·(1.73 m^(2))比(126.18±27.23)mL·min^(-1)·(1.73 m^(2))^(-1)]显著低于无肾损伤患者(P<0.05);血清SOX2[(8.91±1.82)kU/L比(5.15±1.31)kU/L]及HbA1c[(8.80±1.55)%比(5.52±0.83)%]、UAER[(70.13±18.06)mg/24 h比(13.22±3.61)mg/24 h]、Scr[(82.14±15.23)µmol/L比(53.19±5.62)µmol/L]显著高于对照组(P<0.05),且肾损伤患者血清SOX2[(10.81±2.13)kU/L比(5.15±1.31)kU/L]及UAER[(156.83±40.29)mg/24 h比(13.22±3.61)mg/24 h]、Scr[(113.77±13.58)µmol/L比(53.19±5.62)µmol/L]显著高于无肾损伤患者(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,TIMP3与UAER、Scr、HbA1c呈显著负相关(P<0.05),与eGFR呈显著正相关(P<0.05);SOX2与UAER、Scr、HbA1c呈显著正相关(P<0.05),与eGFR呈显著负相关(P<0.05);血清TIMP3与SOX2呈显著负相关(r=-0.590,P<0.05)。ROC结果显示,血清TIMP3联合SOX2诊断T2DM患者肾损伤的敏感度和特异度分别为95.0%、85.3%,显著高于TIMP3、SOX2单独测定。结论T2DM肾损伤患者血清TIMP3水平显著降低,SOX2水平显著升高,且两者与T2DM患者肾损伤密切相关,可用于T2DM患者肾损伤早期诊断。 展开更多
关键词 金属蛋白酶组织抑制剂3 性别决定区框蛋白2 2型糖尿病 肾损伤 早期诊断
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Y染色体性别决定区相关高速泳动族框因子9和周期素依赖性激酶4在结直肠息肉、结直肠癌中的表达及意义 被引量:3
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作者 赵玉红 张磊 +2 位作者 古彩喆 张东姣 杨卫振 《安徽医药》 CAS 2023年第6期1170-1174,共5页
目的 探究Y染色体性别决定区相关高速泳动族框因子9(SOX9)和周期素依赖性激酶4(CDK4)在结直肠息肉、结直肠癌中的表达及意义。方法 选取中国人民解放军第八十二集团军医院2015年1月至2017年6月收治的结直肠癌病人病理组织标本(结直肠癌... 目的 探究Y染色体性别决定区相关高速泳动族框因子9(SOX9)和周期素依赖性激酶4(CDK4)在结直肠息肉、结直肠癌中的表达及意义。方法 选取中国人民解放军第八十二集团军医院2015年1月至2017年6月收治的结直肠癌病人病理组织标本(结直肠癌组)94例及癌旁正常结直肠组织(正常结直肠组)39例,另取同时期结直肠息肉病人结直肠息肉组织(结直肠息肉组)51例。采用免疫组织化学SP染色法检测SOX9、CDK4的表达情况,分析SOX9、CDK4表达与结直肠癌病人临床病理参数之间的关系;对结直肠癌病人进行术后复查随访,分析结直肠癌病人生存情况。结果 SOX9在正常结直肠组织、结直肠息肉组织和结直肠癌组织中的阳性表达率分别为10.26%(4/39)、27.45%(14/51)、76.59%(72/94),差异有统计学意义(P<0.05);CDK4在正常结直肠组织、结直肠息肉组织和结直肠癌组织中的阳性表达率分别为7.69%(3/39)、21.57%(11/51)、54.84%(51/94),差异有统计学意义(P<0.05);正常结直肠组织中SOX9、CDK4蛋白表达水平低于结直肠息肉组织、结直肠癌组织(P<0.05),结直肠息肉组织中SOX9、CDK4蛋白表达水平低于结直肠癌组织(P<0.05)。结直肠癌病人病理组织SOX9、CDK4表达与肿瘤分化程度、临床分期、是否合并淋巴结转移有关(P<0.05);结直肠癌组织SOX9与CDK4表达呈正相关(r=0.58,P<0.001),由TCGA数据库检索结直肠癌组织SOX9、CDK4基因表达相关性显示,二者之间亦呈正相关(r=0.40,P<0.001);SOX9高表达、低表达病人术后3年累积生存率分别为44.6%、72.4%,两组比较Log-rank检验差异有统计学意义(χ^(2)=8.31,P=0.004);CDK4高表达、低表达病人术后3年累积生存率分别为25.6%、76.5%,两组比较Log-rank检验差异有统计学意义(χ^(2)=36.36,P<0.001)。结论 SOX9和CDK4在结直肠癌组织、结直肠息肉组织、正常结直肠组织中的阳性表达率逐渐降低,与结直肠癌肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移情况及预后有关,可能参与结直肠癌的发生发展过程。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 Y染色体性别决定区相关高速泳动族框因子9 周期素依赖性激酶4 基因表达 细胞分化 淋巴转移
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大鼠肝再生的肝细胞干性变化中性别决定区转录因子2 mRNA和其他非编码RNA的表达变化与作用
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作者 王子慧 郭建林 +6 位作者 臧夏炎 薛奇杰 林凯琳 张春博 韩璐 林俊堂 徐存拴 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期202-207,共6页
目的了解大鼠肝再生(LR)0 h和2 h时性别决定区转录因子2(SOX2)基因及其mRNA相互作用的微小RNA(miRNA,miR)和环状RNA(circRNA)的表达变化、相互作用和调节肝细胞干性变化的途径与方式。方法按Higgins等方法制备大鼠2/3肝切除(partial hep... 目的了解大鼠肝再生(LR)0 h和2 h时性别决定区转录因子2(SOX2)基因及其mRNA相互作用的微小RNA(miRNA,miR)和环状RNA(circRNA)的表达变化、相互作用和调节肝细胞干性变化的途径与方式。方法按Higgins等方法制备大鼠2/3肝切除(partial hepatectomy,PH)模型,按Smedsrod等方法分离肝细胞,用大规模定量检测技术测定大鼠肝再生中肝细胞的mRNA、miRNA合称内源竞争RNA(ceRNA)的表达变化,用Cytoscape 3.2软件构建ceRNA的相互作用网,用ceRNA综合分析等方法解析它们的表达相关性和作用相关性。结果PH后0 h和2 h时,SOX2 mRNA的比值为1.00±0.09和2.15±0.48,miR-3558-3p为4.53±0.10和0.81±0.16,circRNA_18404为1.24±0.04和11.10±0.57,circRNA_18045为1.97±0.47和4.44±0.23。同时,PH后0 h时,SOX2促进的富含AT的交互域5A(ARID5A)、激活转录因子3(ATF3)、BTG抗增殖因子2(BTG2)等8个细胞去分化相关基因表达下调,抑制的细胞分化相关基因干扰素调节因子6(IRF6)和生长抑素(SST)表达上调。PH后2 h时,SOX2促进的ARID5A、ATF3、BTG2等8个细胞去分化相关基因表达上调,抑制的细胞分化相关基因SST表达下调、IRF6未发生有意义表达变化。结论上述circRNA抑制的miRNA、miRNA抑制的SOX2 mRNA以及SOX2调节的细胞干性相关基因的表达相关性和作用相关性有利于PH后0 h时肝细胞处于分化状态和PH后2 h时肝细胞处于干性状态。 展开更多
关键词 肝再生 肝细胞干性 性别决定区转录因子2 生物高通量检测 内源竞争RNA综合分析 大鼠
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性别决定区盒基因10在黑素瘤中的研究现状及进展
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作者 张乐 郭书萍 《安徽医药》 CAS 2023年第5期880-883,共4页
研究表明调节发育过程的基因与通过增殖、侵袭和转移介导肿瘤进展的基因之间存在越来越多的相关性,而针对这些基因的靶向治疗成为当前研究的热点。性别决定区盒基因10(SOX10)是发育生物学中的一个重要转录因子,不仅对黑素细胞的发育及... 研究表明调节发育过程的基因与通过增殖、侵袭和转移介导肿瘤进展的基因之间存在越来越多的相关性,而针对这些基因的靶向治疗成为当前研究的热点。性别决定区盒基因10(SOX10)是发育生物学中的一个重要转录因子,不仅对黑素细胞的发育及分化产生影响,在黑素瘤的存活、增殖和侵袭中也发挥着重要的作用。现就SOX10在黑素细胞发育和黑素瘤中的作用进行综述,并探讨SOX10在黑素瘤治疗中的潜在方向和前景。 展开更多
关键词 黑素瘤 黑素细胞 性别决定区盒基因10 调控 治疗
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我国利福平敏感结核杆菌rpoB基因利福平耐药决定区序列循证分析 被引量:11
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作者 孟繁荣 刘志辉 +2 位作者 谢贝 张言斌 谭守勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第21期3601-3604,共4页
目的:了解我国利福平敏感结核杆菌rpoB基因利福平耐药决定区(rifampicin resistancedetermining region,RRDR)序列的多态性特征。方法:采用"rpoB AND Mycobacterium tuberculosis AND(China OR Hong Kong OR Macon OR Taiwan)"... 目的:了解我国利福平敏感结核杆菌rpoB基因利福平耐药决定区(rifampicin resistancedetermining region,RRDR)序列的多态性特征。方法:采用"rpoB AND Mycobacterium tuberculosis AND(China OR Hong Kong OR Macon OR Taiwan)"检索策略在Pubmed数据库中检索文献,循证分析Pubmed数据库中截止至2013年4月30日有关我国结核杆菌rpoB基因突变分子特征的研究文献。结果:36篇文献纳入研究,5 136株利福平敏感结核杆菌rpoB基因RRDR序列信息得以分析,38株(0.74%)rpoB基因RRDR序列呈现基因突变,涉及8个位点,分别为511(11株)、533(7株)、531(6株)、526(5株)、516(4株)、518(2株)、519(2株)、521(2株)等,其中1株涉及511/526双位点。结论:我国结核杆菌rpoB基因RRDR序列存在沉默突变现象,并非所有RRDR序列改变均与结核杆菌利福平药物敏感性有关。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 利福平 RPOB基因 利福平耐药决定区(RRDR) 沉默突变
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下调性别决定区Y框蛋白9对口腔鳞癌细胞上皮间质转化及克隆能力的影响 被引量:7
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作者 杨文丽 孙明磊 +3 位作者 张朋 余炜伟 周海霞 孙强 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期13-18,共6页
目的探讨下调性别决定区Y框蛋白9(SOX9)对口腔鳞癌(OSCC)细胞上皮间质转化(EMT)及克隆能力的影响。方法 OSCC BcaCD885细胞中转染si RNA control、SOX9 siRNA,同时以不做任何转染的细胞作为control组。实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)... 目的探讨下调性别决定区Y框蛋白9(SOX9)对口腔鳞癌(OSCC)细胞上皮间质转化(EMT)及克隆能力的影响。方法 OSCC BcaCD885细胞中转染si RNA control、SOX9 siRNA,同时以不做任何转染的细胞作为control组。实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和Western blot筛选干扰效果较好的SOX9 siRNA1做后续研究。细胞克隆实验测定细胞克隆形成能力,免疫荧光检测上皮钙黏附素(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达,Western blot检测E-cadherin、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、Vimentin、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移。结果 SOX9 siRNA组细胞中SOX9 mRNA和蛋白水平均明显低于control组(P<0.05)。SOX9siRNA1细胞克隆形成数目、细胞侵袭和迁移数目明显降低,并且细胞中MMP-2、MMP-9蛋白水平也明显降低,与control组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。SOX9 siRNA1组细胞中Vimentin表达水平降低,而E-cadherin表达水平升高,细胞EMT受到抑制,与control组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论下调SOX9可抑制OSCC细胞EMT和克隆形成,以及细胞侵袭和迁移。 展开更多
关键词 性别决定区Y框蛋白9 口腔鳞癌 上皮间质转化 细胞克隆
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上海地区肺炎链球菌对氟喹诺酮类的敏感性及其喹诺酮耐药决定区突变研究 被引量:6
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作者 杨敏婕 杨帆 +3 位作者 徐晓刚 胡付品 叶信予 张婴元 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2008年第1期56-60,共5页
目的了解上海地区临床分离肺炎链球菌对氟喹诺酮类等抗菌药物的敏感性,并对氟喹诺酮类敏感菌株的喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变进行初步研究。方法收集上海地区部分医院2004-2005年共176株肺炎链球菌临床分离株,用琼脂稀释法测定环丙... 目的了解上海地区临床分离肺炎链球菌对氟喹诺酮类等抗菌药物的敏感性,并对氟喹诺酮类敏感菌株的喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变进行初步研究。方法收集上海地区部分医院2004-2005年共176株肺炎链球菌临床分离株,用琼脂稀释法测定环丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星和莫西沙星等15种抗菌药物的抗菌活性,并选取部分左氧氟沙星敏感肺炎链球菌菌株进行QRDRPCR扩增、测序。结果176株受试菌株中.PSSP、PISP和PRSP各占48.9%、47.1%和4.0%,受试菌株对环丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星和莫西沙星敏感率均为100%。QRDR的扩增测序结果发现,20株左氧氟沙星MIC1~2mg/L的敏感菌株中,19株的parC、parE基因上已存在不同程度的氨基酸突变.包括ParC:Phe 105→Leu/Asp136→Tyr,Pare:Asp435→AsnjIle460→ValjAsn477→Lys.而在gyrA、gyrB基因上仅发现点突变,未导致相关氨基酸突变。结论上海地区未发现氟喹诺酮类耐药肺炎链球菌临床分离株,但左氧氟沙星MIC1~2mg/L的敏感株中已发现QRDR一级突变现象,突变的基因位点均见于parC、pare基因。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 氟喹诺酮类 喹诺酮耐药决定区 一级突变
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嗜水气单胞菌gyrA氟喹诺酮抗性决定区的克隆与分析 被引量:4
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作者 郑伟 卢强 +2 位作者 韩文瑜 张雅斌 刘艳辉 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2003年第3期8-15,共8页
研究了从病鱼体内分离的嗜水气单胞菌对氟喹诺酮类药物耐药性的分子机理。以 4株对诺氟沙星等氟喹诺酮类药物耐药菌株及 2株敏感菌株为模板 ,参照杀鲑气单胞菌gyrA基因序列 ,设计了 1对引物 ,进行 gyrA基因氟喹诺酮抗性决定区PCR扩增 ,... 研究了从病鱼体内分离的嗜水气单胞菌对氟喹诺酮类药物耐药性的分子机理。以 4株对诺氟沙星等氟喹诺酮类药物耐药菌株及 2株敏感菌株为模板 ,参照杀鲑气单胞菌gyrA基因序列 ,设计了 1对引物 ,进行 gyrA基因氟喹诺酮抗性决定区PCR扩增 ,将扩增产物克隆入pMD1 8 T载体 ,转化入大肠埃希氏菌DH5α中 ,小提质粒 ,酶切鉴定 ,测序并分析比较耐药菌和敏感菌的氨基酸残基序列 ,发现耐药菌有 5个氨基酸突变位点 ,分别是 83位点的Ser→Ile,92位点的Leu→Met,1 74位点的Ile→Phe,2 0 2位点的Asn→Asp ,2 0 3位点的Leu→Arg ,耐药菌突变后的氨基酸残基均比敏感菌正常的相对应氨基酸残基分子量大。 83位点的突变与大肠埃希氏菌的耐药性突变一致 ,1 2 2位点具有保守的Try。 展开更多
关键词 GYRA基因 耐药性突变 嗜水气单胞菌 氟喹诺酮 抗性决定区 克隆
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胎鼠性别决定区蛋白基因快速检测(英文) 被引量:7
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作者 刘革修 张洹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期622-626,T003,共6页
目的 :为了将雄性胎鼠组织细胞移植进入雌性受体鼠 ,Y染色体特异的性别决定区蛋白基因 (sexde terminingregionprotein ,Sry)作为常用的遗传标志需要在细胞分离前快速检测 ;为了检测孕 14d胎鼠的Sry基因 ,我们建立了一种快速的PCR方法... 目的 :为了将雄性胎鼠组织细胞移植进入雌性受体鼠 ,Y染色体特异的性别决定区蛋白基因 (sexde terminingregionprotein ,Sry)作为常用的遗传标志需要在细胞分离前快速检测 ;为了检测孕 14d胎鼠的Sry基因 ,我们建立了一种快速的PCR方法。基于C5 7BL/ 6J小鼠Sry基因序列 ,我们设计了特异检测引物 ,并优化了PCR的反应条件包括引物和循环参数等。方法和结果 :模板的制备时间约 30min。取约 1mg胚胎组织 ,以 10mmol/LTris10mmol/LEDTApH 8 0缓冲液洗涤 2次 ,然后以 2 0 0 μL裂解液 ( 2 0mg/LproteinaseK ,0 5 %NP - 4 0 ,and 0 0 5 %Tween 4 0 )悬浮 ,再在 6 0℃孵育 15min以消化蛋白 ,95℃以上 5min灭活蛋白酶K。取 5 - 10 μL作为模板。PCR反应总体积为 5 0μL ,使用两套引物同时扩增 ,一套扩增Sry目的基因片段 ,另一套扩增IL - 3基因片段作为内对照。扩增时间为 1 5h。扩增产物 10 - 15 μL采用 2 5 % - 3%的琼脂糖凝胶在 12 - 15V/cm的电压下电泳。 10min即可观察电泳结果。根据引物设计判断结果 ,Sry目的基因片段为 4 4 4bp、IL - 3基因片段为 6 4 9bp。操作约 10个胚胎总时间小于 3 5h。PCR扩增的特异性与特异探针荧光原位杂交结果一致。结论 :该PCR方法为检测胎鼠性别决定区蛋白基因的快速、简单? 展开更多
关键词 胎鼠 性别决定区蛋白基因 快速检测 小鼠 胚胎 聚合酶链反应
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基于生物信息学研究性别决定区Y框4在肝细胞癌中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 汪宇 谢燕婷 +1 位作者 王毅州 夏勇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期975-980,共6页
目的研究性别决定区Y框4(SOX4)在肝细胞癌组织中的表达及其与肝细胞癌临床病理特征和预后的关系。方法采用生物信息学方法分析、挖掘肿瘤基因公共数据库,研究SOX4基因在肝细胞癌中的差异表达,分析SOX4基因表达与肝细胞癌临床病理特征的... 目的研究性别决定区Y框4(SOX4)在肝细胞癌组织中的表达及其与肝细胞癌临床病理特征和预后的关系。方法采用生物信息学方法分析、挖掘肿瘤基因公共数据库,研究SOX4基因在肝细胞癌中的差异表达,分析SOX4基因表达与肝细胞癌临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法分析SOX4基因表达与肝细胞癌患者预后的关系;通过基因集富集分析(GSEA)探索肝细胞癌中SOX4基因相关的生物学过程和信号通路。结果SOX4 mRNA在肝细胞癌组织中的表达水平高于癌旁组织(P<0.01),且与肝细胞癌的肿瘤分期和肿瘤大小有关(P<0.01,P<0.05)。SOX4低表达组肝细胞癌患者的总生存期和无复发生存期均长于SOX4高表达组患者(P均<0.01),且在不同的肝细胞癌分期亚组中均呈现相同的预后趋势。多因素Cox回归分析结果表明SOX4基因表达水平是肝细胞癌患者的独立预后因素(P<0.01)。SOX4基因主要通过调控DNA复制、肌醇需求酶1介导的未折叠蛋白反应、有丝分裂细胞周期阻滞、肿瘤蛋白p53活性和Wnt信号通路等在肝细胞癌中发挥致癌基因作用。结论SOX4基因在肝细胞癌组织中表达增加,与肝细胞癌患者的不良预后有关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 性别决定区Y框4 生物信息学 预后
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IBV单链抗体的筛选及其互补决定区序列变异分析 被引量:2
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作者 林源 赵蕾 +4 位作者 王建敏 李本强 张英 王建华 朱建国 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2011年第2期47-53,共7页
【目的】筛选能表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)单链抗体(scFv)的原核阳性克隆,并分析scFv抗原结合位点的氨基酸变化。【方法】采用RT-PCR,从IBV疫苗免疫的鸡脾脏RNA中扩增出抗体编码基因的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因。利用重... 【目的】筛选能表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)单链抗体(scFv)的原核阳性克隆,并分析scFv抗原结合位点的氨基酸变化。【方法】采用RT-PCR,从IBV疫苗免疫的鸡脾脏RNA中扩增出抗体编码基因的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因。利用重组链延伸反应(SOE-PCR),将linker与VH和VL基因相连构建鸡scFv基因,并将其克隆到原核表达载体pOPE101-XP中,构建重组质粒并转入大肠杆菌表达,间接ELISA筛选原核表达的抗IBVscFv的阳性克隆,对其测序后进行Clustal.W多序列比较,分析scFv骨架区(FR)和互补决定区(CDR)氨基酸序列差异。【结果】筛选到表达IBVscFv的阳性克隆ZL.10和ZL.80;将它们的氨基酸序列与鸡胚系Gemline进行多序列比较,结果显示,ZL.10、ZL.80在CDR中易变异氨基酸占各区氨基酸的比率均在40%以上,其中VH的CDR3达90%,VL的CDR3达60%。此外,ZL.10、ZL.80在VH的CDR3区分别增加5个和7个氨基酸。FR氨基酸变异率较少,且大多均在12%以下,而FR4未发生突变。【结论】通过体外筛选原核表达产物的方法,获得了表达IBVscFv的阳性克隆ZL.10和ZL.80,其VH、VL氨基酸序列中的变异主要发生在各自的CDR,二者VH的CDR3氨基酸序列差异很大,提示这2个scFv阳性克隆针对的是IBV不同的抗原位点。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 单链抗体 筛选 抗原互补决定区 序列分析
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血管内皮生长因子和性别决定区Y框蛋白2在胃癌中的表达及与预后的关系 被引量:16
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作者 赵璐 杜小明 《安徽医药》 CAS 2020年第4期746-750,I0004,共6页
目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和性别决定区Y框蛋白2(SOX2)在胃癌组织中的表达及其与临床病理和预后的意义。方法收集2012年3月至2017年12月皖北煤电集团总医院病理科存档的胃癌手术标本40例,应... 目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和性别决定区Y框蛋白2(SOX2)在胃癌组织中的表达及其与临床病理和预后的意义。方法收集2012年3月至2017年12月皖北煤电集团总医院病理科存档的胃癌手术标本40例,应用免疫组化检测40例胃癌和32例癌旁组织中VEGF和SOX2的表达情况,观察胃癌病人VEGF和SOX2的表达情况并分析与不同病理特征和生存的相关性。结果①胃癌组织中VEGF与SOX2的表达率分别为70.0%及65.0%,癌旁组织中分别是46.4%及37.5%,均差异有统计学意义(P<0.05)。②VEGF的高表达与胃癌病人低分化、局部更深浸润、出现淋巴结转移及高临床分期有关(P<0.05),SOX2的高表达与胃癌病人出现淋巴结转移及高临床分期有关(P<0.05)。③Spearman相关性分析发现,在胃癌中VEGF的表达与SOX2的表达呈正相关关系(r=0.375,P=0.017)。生存分析显示胃癌病人中VEGF及SOX2同时高表达与VEGF或SOX2单独高表达或不表达相比具有较差的预后(P<0.05)。结论VEGF和SOX2的高表达水平可能促进胃癌的发生、发展和侵袭,并且预示着病人有着更差的预后,有望成为胃癌诊断、治疗和预后判断的一个靶标。 展开更多
关键词 胃肿瘤 血管内皮生长因子类 性别决定区Y框蛋白2 预后
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马传贫驴白细胞弱毒疫苗株跨膜蛋白主要免疫决定区基因的克隆与表达 被引量:2
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作者 薛飞 贾斌 +6 位作者 朱远茂 杨建德 王晓钧 相文华 赵立平 吕晓玲 沈荣显 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期321-325,共5页
从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码跨膜蛋白主要免疫决定区 (TMIR)的基因 ,并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的融合蛋白有一部分是可溶的 ,其氨基端带有 6个组氨酸的标签 ,因此可以用固定化金属离子亲和... 从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码跨膜蛋白主要免疫决定区 (TMIR)的基因 ,并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的融合蛋白有一部分是可溶的 ,其氨基端带有 6个组氨酸的标签 ,因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化。在间接酶联免疫吸附试验 (ELISA)和免疫印迹试验中 ,重组的TMIR蛋白可与马传贫阳性血清样品发生反应 ,而与健康马血清无任何反应。这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性 ,可用于马传贫弱毒疫苗株在体内外复制、接种马体内免疫应答及马传贫诊断的研究。 展开更多
关键词 马传染性贫血 跨膜蛋白主要免疫决定区重组蛋白(TMIR) 间接ELISA 免疫印迹试验 马传贫驴 白细胞弱毒疫苗株
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检测马传贫病毒跨膜蛋白主要免疫决定区抗体间接ELISA诊断方法的建立 被引量:1
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作者 朱远茂 王海燕 +5 位作者 郭巍 李兆利 赵立平 薛飞 相文华 沈荣显 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期191-196,共6页
本试验以纯化的重组马传贫病毒跨膜蛋白主要免疫决定区蛋白作为诊断抗原建立了间接ELISA诊断方法,确定其最佳工作条件为每孔包被重组抗原2μg,兔抗马IgG酶标抗体以1∶4000,血清以1∶40倍稀释,底物作用时间为10min;判定标准为P/N值大于2,... 本试验以纯化的重组马传贫病毒跨膜蛋白主要免疫决定区蛋白作为诊断抗原建立了间接ELISA诊断方法,确定其最佳工作条件为每孔包被重组抗原2μg,兔抗马IgG酶标抗体以1∶4000,血清以1∶40倍稀释,底物作用时间为10min;判定标准为P/N值大于2,且OD值大于0.2的血清为阳性,否则判为阴性。本试验所建立的诊断方法与琼扩试验以及以琼扩抗原作为包被抗原的ELISA试验进行了比较,表明该诊断方法敏感性更高。特异性和重复性试验表明该诊断方法具有良好的特异性和重复性。通过对4匹马传贫驴白细胞弱毒疫苗免疫马血清抗体的检测,发现均在接种2周后可产生抗马传贫病毒跨膜蛋白主要免疫决定区相应抗体。此抗体一直持续存在到本试验检测的免疫后17个月,且效价较高。用此方法检测203份马血清样品,其中161份呈抗体阳性,还检测了马传贫自然感染马血清93份,结果全部为阳性。 展开更多
关键词 EIAV跨膜蛋白主要免疫决定区 ELISA 建立
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Y染色体性别决定区(Sry):性别决定关键开关 被引量:4
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作者 裴开颜 王介东 《生殖医学杂志》 CAS 2012年第4期400-405,共6页
性发育异常在人类遗传性疾病中很常见,因此性别决定在临床和生物学研究中非常重要。Y染色体性别决定区(sex-determining region of Y-chromosome,Sry)即哺乳动物Y染色体上的睾丸决定基因片段,与性别决定密切相关。本文对Sry基因的结构... 性发育异常在人类遗传性疾病中很常见,因此性别决定在临床和生物学研究中非常重要。Y染色体性别决定区(sex-determining region of Y-chromosome,Sry)即哺乳动物Y染色体上的睾丸决定基因片段,与性别决定密切相关。本文对Sry基因的结构功能和表达调节及其相关的性别决定分子机制进行了综述。 展开更多
关键词 Y染色体性别决定区 性别决定 SOX9 支持细胞
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利用孕妇外周血浆小片段游离胎儿DNA检测Y染色体性别决定区基因 被引量:2
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作者 龙兴江 林伟雄 龙桂芳 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第17期1335-1337,共3页
目的探索从孕妇外周血浆中提取小片段游离胎儿DNA(cffDNA)提高检测胎儿Y染色体性别决定区(SRY)基因准确率的方法,评估利用小片段cffDNA进行无创性产前诊断可行性。方法收集117例孕妇外周血,利用柱吸收方法提取其血浆cffDNA,经琼脂糖凝... 目的探索从孕妇外周血浆中提取小片段游离胎儿DNA(cffDNA)提高检测胎儿Y染色体性别决定区(SRY)基因准确率的方法,评估利用小片段cffDNA进行无创性产前诊断可行性。方法收集117例孕妇外周血,利用柱吸收方法提取其血浆cffDNA,经琼脂糖凝胶电泳分离富集小片段cffDNA,使用二重PCR反应(dulex-PCR)检测SRY基因和磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因。结果来源于66例孕男胎孕妇血浆标本小片段cffDNA均检出SRY和GAPDH基因,来源于50例孕女胎孕妇血浆标本小片段cffDNA仅检出GAPDH基因。与绒毛/羊水标本检测结果相符。特异性和敏感性均为100%。结论利用琼脂糖凝胶电泳,切胶回收,可选择性富集孕妇外周血小片段cffDNA,相对提高胎儿DNA水平,结合二重PCR扩增SRY基因技术可用于无创性产前性连锁遗传疾病和单基因突变疾病产前诊断。 展开更多
关键词 游离胎儿DNA Y染色体性别决定区基因 二重聚合酶联反应
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B淋巴细胞抗原互补决定区序列分析的应用 被引量:1
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作者 李宁丽 张冬青 周光炎 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期104-105,共2页
关键词 抗原互补决定区 序列分析 克隆性增生 B淋巴细胞
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应用PCR扩增Y染色体性别决定区序列鉴定山羊胚胎性别 被引量:5
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作者 陈美珏 黄英 +7 位作者 叶进培 李碧春 叶蔚 李华 张汤杰 潘瑞荣 张朝昆 曾溢滔 《上海实验动物科学》 1996年第1期5-7,共3页
在对山羊的Y染色体性别决定区(SRY)序列进行分析的基础上,设计出特异于山羊SRY序列的PCR引物,对山羊胚胎的分割胚的SRY序列进行扩增,以鉴定胚胎性别。胚胎移植后的妊娠及产羔情况证实,性别鉴定结果可靠。
关键词 山羊 Y染色体 性别决定区 胚胎 聚合酶链反应
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BECN1、性别决定区Y盒转录因子9表达与甲状腺癌患者临床特征及预后的关系研究 被引量:2
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作者 陈亚柯 徐青青 +3 位作者 孙宁 宋洋 邱新光 陈建民 《癌症进展》 2021年第9期915-918,934,共5页
目的探讨BECN1、性别决定区Y盒转录因子9(SOX9)表达与甲状腺癌患者临床特征及预后的关系。方法取106例甲状腺癌患者的甲状腺癌组织及癌旁组织,比较甲状腺癌组织及癌旁组织中BECN1、SOX9表达情况;比较不同临床特征甲状腺癌患者甲状腺癌... 目的探讨BECN1、性别决定区Y盒转录因子9(SOX9)表达与甲状腺癌患者临床特征及预后的关系。方法取106例甲状腺癌患者的甲状腺癌组织及癌旁组织,比较甲状腺癌组织及癌旁组织中BECN1、SOX9表达情况;比较不同临床特征甲状腺癌患者甲状腺癌组织中BECN1、SOX9表达情况;进行为期3年的随访。结果BECN1、SOX9阳性均主要定位于细胞质中。甲状腺癌组织中SOX9阳性表达率明显高于癌旁组织,BECN1阳性表达率明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Ⅰ~Ⅱ期、高分化、无淋巴结转移的甲状腺癌患者甲状腺癌组织中BECN1阳性表达率分别高于Ⅲ~Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移患者,SOX9阳性表达率分别低于Ⅲ~Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。BECN1阳性表达患者的平均生存时间为(35.26±8.39)个月,明显长于阴性表达患者的(30.16±7.35)个月;SOX9阳性表达患者的平均生存时间为(31.20±8.03)个月,明显短于阴性表达患者的(35.74±6.99)个月,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素Logistic回归模型结果显示,淋巴结转移、分化程度、BECN1及SOX9表达均是甲状腺癌患者预后的影响因素(P﹤0.05)。结论甲状腺癌组织存在BECN1低表达、SOX9高表达,不同临床分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移状态患者BECN1及SOX9表达存在差异,且BECN1及SOX9表达与患者预后密切相关。 展开更多
关键词 BECN1 性别决定区Y盒转录因子9 甲状腺癌 临床特征 预后
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性别决定区Y框蛋白2、含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5在宫颈癌中的表达及与临床病理特征的关系分析 被引量:1
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作者 刘铭 吴坤英 +3 位作者 郭宝芝 宋芷霜 张青 李新敏 《肿瘤基础与临床》 2021年第3期264-267,共4页
目的探讨性别决定区Y框蛋白2(Sox-2)、含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(Lgr5)在宫颈癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法收集2016年3月至2017年9月郑州市妇幼保健收治的经病理检查证实的74例宫颈癌、39例宫颈上皮内瘤变及36例正常... 目的探讨性别决定区Y框蛋白2(Sox-2)、含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(Lgr5)在宫颈癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法收集2016年3月至2017年9月郑州市妇幼保健收治的经病理检查证实的74例宫颈癌、39例宫颈上皮内瘤变及36例正常宫颈组织石蜡包埋标本,应用免疫组化S-P法检测上述组织标本Sox-2、Lgr5蛋白表达情况,并分析Sox-2、Lgr5蛋白表达与宫颈癌患者性别、体质量、病理类型、肿瘤分化程度、临床分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移之间的关系。结果Sox-2、Lgr5蛋白在宫颈癌组织中阳性表达率分别为77.03%、79.73%,均高于宫颈上皮内瘤变组织(38.46%、41.03%)和正常宫颈组织(5.56%、2.78%),差异均有统计学意义(P均<0.05)。Sox-2、Lgr5蛋白在宫颈癌组织中阳性表达率与患者性别、体质量、病理类型均无关(P均>0.05);Sox-2、Lgr5蛋白在宫颈癌组织中阳性表达率与患者的肿瘤分化程度、临床分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关,肿瘤分化程度为低分化、临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤浸润深度为T3~T4、有淋巴结转移患者Sox-2、Lgr5蛋白在宫颈癌组织中阳性表达率高于肿瘤分化程度为高中分化、临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤浸润深度为T1~T2及无淋巴结转移患者(P均<0.05)。结论Sox-2、Lgr5在宫颈癌中均呈高表达,且表达水平与患者疾病进展有着密切关系。 展开更多
关键词 宫颈癌 性别决定区Y框蛋白2 含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5
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