人呼吸道合胞病毒减毒活疫苗培养的初步探索

目的对比人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)经人二倍体KMB17细胞低温传代前后对动物的病理损伤,分析毒力变化情况。方法将HRSVA2株病毒接种到人二倍体KMB17细胞进行低温培养传代,接种原代病毒(5.37LgCCID50/ml)至乳鼠脑内,14d处死解剖,取脑、心、肺作病理切片检查;选择原代、第6代、第11代低温传代病毒接种豚鼠鼻腔,于第7d、第14d分2批分别处死,取心、肝、脾、肺、肾组织作病理切片检查,并取肺组织分离病毒、进行感染性滴度测定、用间接免疫荧光法对其进行鉴定。结果经脑内接种的乳鼠均未死亡,且乳鼠的脑、肺HE染色切片与对照组相比均无明显著差异。豚鼠经鼻腔接种,接种原代病毒组第14d处死时体重明显较对照组轻,6代组和11代组与对照组接近;3组病毒均引发豚鼠间质性肺炎;3组豚鼠肺组织分离的病毒滴度差异不大,平均为4.0Lg。结论乳鼠脑内接种HRSV不能导致死亡,脑组织不是HRSV的病变靶器官;HRSV经鼻腔接种豚鼠能引起强烈的肺部感染,豚鼠可作为HRSV毒力评价的动物模型;HRSV在KMB17细胞上经低温传11代,接种豚鼠仍能引起间质性肺炎,未出现明显的减毒株特征,还需要进一步减毒。