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细菌双杂交系统的优化及其应用
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作者 樊粉霞 赵文轩 阚飙 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期251-258,共8页
细菌双杂交系统是一种用于检测体内蛋白质互作的方法,该方法互补腺苷酸环化酶功能,通过检测细胞表达的β-半乳糖苷酶LacZ的活性,分析蛋白质互作能力。但在应用过程中,发现存在操作繁琐、灵敏度低、难实现高通量操作等缺陷。本研究目的... 细菌双杂交系统是一种用于检测体内蛋白质互作的方法,该方法互补腺苷酸环化酶功能,通过检测细胞表达的β-半乳糖苷酶LacZ的活性,分析蛋白质互作能力。但在应用过程中,发现存在操作繁琐、灵敏度低、难实现高通量操作等缺陷。本研究目的是对原有细菌双杂交进行优化,建立一种操作方便、可批量操作、具有较高灵敏度和能够实现实时监测的细菌双杂交系统,本研究成功构建由lacZ启动子控制的luxCDABE的报告质粒pBBR-lacZ-luxCDABE,引入原有的检测系统,新的判读标准并不影响原有的判读标准,本文通过快速灵敏地冷光观察菌落或测定菌液冷光值即可判读结果,优化后的双杂交系统,阳性对照组冷光值为阴性对照组的几十(霍乱弧菌为宿主)至几百倍(大肠杆菌为宿主),阴阳性结果判读差异明显,不仅节约实验成本,提高工作效率,又实现了连续监测。该系统不仅以大肠杆菌为宿主获得成功应用,宿主范围也扩展到霍乱弧菌。该系统通过质粒将lacZ启动子的拷贝数提高,减弱了非腺苷三磷酸(cAMP)因素引起的lacZ启动子活性的干扰,无需繁琐耗时的实验操作,为大批量的蛋白质互作分析及互作蛋白质的筛选提供了有利工具。 展开更多
关键词 双杂交系统 Β-半乳糖苷酶 冷光值 霍乱弧菌 蛋白质互作
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Effects of rib on cooling performance of photovoltaic modules(PV/PCM-Rib) 被引量:2
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作者 Amir SADEGHIAN Mehran Rajabi ZARGARABADI Maziar DEHGHAN 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS CSCD 2021年第11期3449-3465,共17页
Increasing the temperature of photovoltaic systems reduces electrical efficiency,output power,as well as results in permanent damages in the long-term run.A new hybrid PV/PCM-Rib system with three different rib pitch ... Increasing the temperature of photovoltaic systems reduces electrical efficiency,output power,as well as results in permanent damages in the long-term run.A new hybrid PV/PCM-Rib system with three different rib pitch ratios of Λ =4,Λ =2 and Λ =1 is investigated to reduce PV temperature and achieve uniform temperature distribution.A comprehensive two-dimensional model of the systems is developed and simulated with a fixed inclination angle of 30°.A parametric study is carried out to investigate the impact of ribs on different melting temperatures(50,40 and 30 ℃).According to the numerical results and the parametric analysis,using ribs shows better performance in temperature reduction for PCM with a lower melting temperature.By lowering the melting temperature of PCM from 50 to 30 ℃,the average temperature reduction of PV/PCM-Rib in the case of Λ =1 increases from 1.39% to 5.16% while the average melted PCM decreases from 20.5% to 7.59% after 240 min.It means that using ribs provides more solid PCM.It is also obtained that the electrical efficiency and output power show more increments at lower melting temperatures. 展开更多
关键词 numerical simulation photovoltaic cooling PCM RIB
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噬菌体裂解细菌过程中冷光实时监测活菌方法的建立
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作者 樊粉霞 李旭 阚飙 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1406-1414,共9页
产毒素的霍乱弧菌Vibrio cholerae可导致严重腹泻,已引起7次全球大流行。对于烈性噬菌体清除霍乱弧菌的效果评价上,一般使用传统的活细胞培养计数及噬菌斑进行观察分析,但操作费时耗力,尤其不能实时获得菌株被裂解及残存细胞的数量变化... 产毒素的霍乱弧菌Vibrio cholerae可导致严重腹泻,已引起7次全球大流行。对于烈性噬菌体清除霍乱弧菌的效果评价上,一般使用传统的活细胞培养计数及噬菌斑进行观察分析,但操作费时耗力,尤其不能实时获得菌株被裂解及残存细胞的数量变化。进一步探索简便、能够实时监测噬菌体裂解霍乱弧菌的方法是非常必要的。利用荧光报告质粒的策略、将可在霍乱弧菌中高表达生物冷光的质粒转化至O1血清群霍乱弧菌耐药菌株中,通过测定比较生物冷光以及活菌计数,实时分析了噬菌体对液体培养状态下霍乱弧菌的裂解效果,结果显示:冷光值作为监测指标与传统的活细胞计数方法有很高的相关性,通过测定霍乱弧菌耐药株的冷光值监测霍乱弧菌活细胞的数量,可实时分析噬菌体裂解霍乱弧菌过程中细菌残存数量。这种分析方法与菌落计数和噬斑形成观察相比,能够重复对同一样本进行无干扰的连续多时间点检测,没有经过再培养或噬斑形成的时间迟滞,有利于进行噬菌体与宿主菌相互作用的实时监测分析。 展开更多
关键词 噬菌体 霍乱弧菌 冷光值 实时监测 相关系数
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