电刺激-冷冻固定法研究兴奋收缩偶联时骨骼肌的超微结构形态变化

兴奋－收缩偶联时，肌浆网中的钙离子是通过何种途径被刺激而释放的？偶联发生时其形态变化与其功能变化存在着什么样的关系？这是细胞生物学、生理学几十年来最感兴趣的研究热点之一。由于兴奋－收缩偶联的时间历程极短（以ｍｓ计），现有的化学固定（以ｍｉｎ计）无法保留这瞬间经历时的超微结构形态变化。作者采用计算机控制的超低温快速冷冻固定技术对强直收缩态及完全舒张态的骨骼肌组织进行固定，并采用冷冻置换技术对其处理，因而完全保留了其瞬时变化时的形态结构，对兴奋－收缩偶联发生的瞬间骨骼肌的形态变化进行了探讨。

一种简单的快速冷冻固定和冷冻置换制备生物样品的方法

一种简单的快速冷冻固定和冷冻置换制备生物样品的方法马淑芳，傅宏兰（北京大学生物系北京１００８７１）本文介绍一种简易的快速冷冻固定，冷冻置换制备生物样品的方法，简单易行，效果颇佳。与常规的化学固定方法制备的样品相比较，其组织的超微结构可以得到良好的固定...

五种冷冻固定液的比较

冷冻切片的质量是术中病理正确诊断的保证.冷冻切片质量受多种因素影响,固定是冷冻切片首要而且关键步骤.由于各种固定液的渗透强弱不同,直接影响细胞的固定效果而影响染色效果.笔者用几种冷冻切片固定液进行比较,现将结果报告如下.

活体冷冻固定技术

常规的组织浸润和灌流固定是在中止血液循环的状态下，固定保存组织的。缺血会造成组织超微结构的一定变化。新近发展了一种活体冷冻固定方法，可能在保持正常血液循环的条件下，冷冻固定组织。它是金属接触骤冷和致冷剂骤冷的结合。本文作者应用这一技术作了肾小球超微结构的扫描电镜研究。该技术制备的标本上可见肾小球超微结构完整，足突平滑圆润，红细胞呈多形性。

大鼠肾组织的超低温快速冷冻固定和冷冻置换研究

超低温快速冷冻固定以极高的冷冻速率（１００００Ｋ／ｓ）对生物组织进行物理固定，可使生物组织结构、组织内可溶性离子及游离性物质得到保存，使被固定后的生物组织保持最接近于原自然状态，这种样品制备方法大大优于化学制备法，因而在Ｘ－射线微分析及免疫细胞化学中得到广泛应用。生物样品超低温快速冷冻后，利用冷冻置换法，在低温下将生物组织内的结晶水缓慢置换出来，而后常规包埋切片，可获得理想的组织结构及组织内待分析成分。本文应用超低温快速冷冻固定技术及冷冻置换法对大鼠肾皮质部的快速冷冻固定及损伤进行探讨。

浅谈冷冻技术在临床的应用

随着现代科技的迅速发展,许多先进的科学技术成果应用到医学上。近年来,冷冻技术已发展成为一门新兴的独立学科,并经过临床的不断探索和发展,已逐步深入到脏器的诊断与治疗中。神经外科、心血管外科、显微外科以及断肢再移植和脏器移植需要供给血液及各种血制品。

透射电镜生物样品冷冻置换技术的方法

本文介绍了制备透射电镜生物样品冷冻置换技术的基本方法及其优点。

骨骼肌兴奋收缩偶联时肌浆网内Ca^(2+)释放的形态-功能变化研究

采用双向红外线探测器 计算机控制的电刺激 超低温快速冷冻固定同步技术、透射电子显微镜、X 射线能量色散谱及Ca2 +细胞化学技术 ,从超微结构形态学角度 ,实时研究并获取骨骼肌兴奋 收缩偶联时 ,肌浆网内Ca2 +释放及肌浆网的形态改变。研究表明 :1 骨骼肌组织在收缩潜伏期内 ,肌浆网膜与T 管膜接触。 2 在潜伏期 ( <10ms)内 ,肌浆网内的钙离子浓度随时间经历的延长而减少。 3 骨骼肌组织在收缩潜伏期开始 0 8ms时 ,在T 管外周围 (纳米处 ) ,有Ca2 +分布 ,可以认为骨骼肌兴奋收缩偶联时 ,T 管外存在Ca2

骨骼肌肌浆网在收缩潜伏期内的超微结构形态变化

采用双向红外线探测器－计算机控制的电刺激与超低温快速冷冻固定同步技术对被电刺激后的骨骼肌作快速冷冻固定，采用透射电镜对电刺激后０．８ｍｓ，５．６ｍｓ，８．４ｍｓ及完全舒张时的蟾蜍腓肠肌超微结构变化进行了对比研究。骨骼肌组织在电刺激后０．８ｍｓ，５．６ｍｓ及８．４ｍｓ时发现肌浆网的前端，膜产生两个圆孔，而在骨骼肌处于全舒张时，肌浆网膜并无此形态结构。骨骼肌兴奋－收缩偶联发生时，发现肌浆网近Ｔ－管端的膜产生两个圆孔，而骨骼肌处于全舒张时，肌浆网膜也无此形态结构；骨骼肌收缩时出现的肌浆网膜小孔是否与肌浆网内某种物质（引起钙离子释放的某种未知物质？钙流？）在肌组织收缩时的转运或释放有关？

骨骼肌兴奋收缩偶联潜伏期肌浆网内Ca^(2+)变化的研究——细胞化学法及X-射线能量色散谱微区分析

报道了采用红外探测－计算机控制的超低温快速冷冻固定技术、Ｘ－射线能量色散谱微区定量分析及Ｃａ２＋细胞化学技术对骨骼肌收缩潜伏期时肌浆网内的Ｃａ２＋进行了分析，从超微结构形态学的角度对骨骼肌兴奋－收缩偶联发生时，肌浆网内Ｃａ２＋的作用进行了研究，这对揭示骨骼肌兴奋－收缩偶联时，肌浆网内Ｃａ２＋的释放机理研究有重要意义。

肌组织兴奋收缩偶联变化时计算机毫秒级实时控制与测定

本文报道了以红外线技术和计算机技术控制的电刺激－超低温快速冷冻固定同步技术，有骨骼肌兴奋一收缩偶联变化的瞬间，实时测定电刺激发生生物功能变化至超低温快速冷冻的精确时间，并同步获取骨骼肌微秒级超微形态变化。

KF-80快速冷冻技术制备生物样品用于电镜X射线元素分析

新鲜生物样品经快速冷冻固定、冷冻超薄切片后进行电镜下形态观察和在位元素分析 ,以研究细胞生命活动某个瞬间的形态及元素组成和分布 .KF 80快速冷冻仪用液氮使氟里昂 - 2 2保持在 - 16 0℃ ,将生物样品快速射入其中以达到快速冷冻固定的目的 .在组织样品———大鼠胸主动脉平滑肌细胞和悬滴样品———兔红细胞的观察中证实两者的超微结构保存较好 ,虽有直径约 0 1μm的小冰晶存在 ,但不影响形态观察和元素分析 .平滑肌细胞X射线元素分析结果显示 ,胞质中钾含量高 ,钠含量低 ;核中磷含量高而硫含量低 ,说明此项技术能保持胞质与胞核间元素分布的差异 .