多参数功能MRI评价冷缺血再灌注肾损伤大鼠肾脏血流及氧合水平的价值

目的探讨动脉自旋标记(ASL)和血氧水平依赖(BOLD)技术评估冷缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠肾脏血流和血氧微观改变的价值。方法将100只健康雄性SD大鼠随机分为4组,分别为肾脏冷缺血1 h组(CIRI 1 h)、冷缺血2 h组(CIRI 2 h)、冷缺血4 h组(CIRI 4 h)组及假手术组(CIRI 0 h),每组25只。每组随机选取5只分别在术前、术后(1 h、1 d、2 d、5 d)进行ASL及BOLD MRI,测量肾皮质的血流量(RBFCo)值及T_(2)^(*)值(T_(2)^(*)Co)、肾外的髓外带T_(2)^(*)值(T_(2)^(*)OSOM)和肾外髓内带T^(2*)值(T^(2*)ISOM)。随后切除大鼠左肾进行病理学分析并对肾小管损伤程度评分。采用单因素方差分析比较各组间及组内的不同时间点之间MRI参数和大鼠肾小管损伤程度评分之间的差异;采用Pearson相关分析MRI参数间及MRI参数与肾小管损伤程度评分的相关性。结果术后1 h,冷缺血组大鼠肾脏RBFCo、T_(2)^(*)_(Co)、T_(2)^(*)_(OSOM)值均较术前减低(均P<0.05);术后5 d,CIRI 0 h、CIRI 1 h组的RBFCo、T_(2)^(*)_(Co)、T_(2)^(*)_(OSOM)、T^(2*)_(ISOM)值恢复至其术前水平(均P>0.05),CIRI 4 h组上述指标仍低于术前水平(均P<0.05)。术后1 h、1 d、2 d,CIRI 4 h组T_(2)^(*)OSOM值均较其他各组低;术后5 d,CIRI 4 h组RBFCo、T^(2*)_(Co)、T^(2*)_(OSOM)、T^(2*)_(ISOM)值均低于CIRI 0 h组(均P<0.05)。CIRI 2 h组、CIRI 4 h组的术后各时间点的肾小管损伤程度评分均高于其术前(均P<0.05),术后随时间延长,评分呈减低趋势;术后各时间点,CIRI 4 h组评分均较CIRI 0 h、CIRI 1 h组高;术后1 h、2 d、5 d,CIRI 2 h组的评分均较CIRI 0 h、CIRI 1 h组的要高(均P<0.05)。RBF_(Co)、T_(2)^(*)Co、T_(2)^(*)_(OSOM)、T^(2*)_(ISOM)值与肾小管损伤评分均呈中度负相关(r=-0.714、-0.689、-0.518、-0.579,均P<0.001);RBFCo值与T_(2)^(*)_(Co)、T^(2*)_(OSOM)、T^(2*)_(ISOM)值呈中度正相关(r=0.704、0.525、0.612,均P<0.001);T_(2)^(*)_(Co)值与T_(2)^(*)_(OSOM)、T_(2)^(*)_(ISOM)值呈中度正相关(r=0.685、0.572,均P<0.001);T_(2)^(*)_(OSOM)值与T_(2)^(*)_(ISOM)值呈中度正相关(r=0.606,P<0.001)。结论ASL和BOLD成像可动态评估肾CIRI后组织血流及氧合水平的微观变化,为早期发现肾CIRI提供影像学依据。

莱菔硫烷预处理对大鼠移植心脏冷缺血再灌注损伤的影响

目的:观察莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对大鼠移植心脏冷缺血再灌注损伤的影响。方法:健康雄性Lewis大鼠60只随机分成3组,每组20只。对照组:受体大鼠于移植前24 h经鼠尾静脉注射等量的生理盐水;NAC组:受体大鼠于移植前半小时经下腔静脉注射N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)300 mg/kg;SFN组:受体大鼠于移植前24 h经尾静脉注射SFN 2.5 mg/kg。其中供心冷藏于4℃HTK液18 h,建立大鼠心脏移植模型。采用半定量法评价心脏功能,再灌注后6、24 h分别从受体鼠内眦静脉和下腔静脉取血,检测血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶同工酶(creatinekinase-MB,CK-MB)、肌钙蛋白(troponin T,TnT)的水平;移植后24 h摘取供心,观察心肌组织学及超微结构的变化,检测心肌组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性及脂质过氧化物(lipid hydroperoxide,LPO)含量。结果:心脏功能评分SFN组、NAC组较对照组均明显提高(P<0.05);再灌注6 h,与对照组相比,NAC组血清中LDH、CK-MB和TnT的活性均降低(P<0.05)。SFN组血清中LDH、CK-MB和TnT的活性均降低(P<0.05);再灌注24 h,NAC组LDH和TnT的活性亦均降低(P<0.05),CK-MB的活性未见明显变化,SFN组血清中CK-MB和TnT的活性亦均降低(P<0.05);NAC组和SFN组心肌组织学及超微结构的损伤程度均较对照组明显减轻;与对照组相比,NAC组心肌组织SOD活性及SOD/LPO比值明显升高(P<0.05),LPO含量未见明显变化(P>0.05);SFN组供心心肌组织LPO含量显著降低(P<0.05),SOD活性未见明显变化,SOD/LPO明显提高(P<0.01)。结论:SFN能保护移植心脏,其机制可能与其诱导Ⅱ期酶产生,提高心肌细胞对氧化应激的防御能力,减少自由基对心肌的氧化损伤有关。

大黄素对模拟冷缺血再灌注后肝细胞内钙离子浓度及细胞凋亡的影响

目的研究中药大黄素对模拟冷缺血再灌注后肝细胞内钙离子浓度及细胞凋亡的影响。方法体外培养肝细胞株HL-7702,随机分为对照组和大黄素处理组。对照组未予大黄素处理,大黄素处理组按100、10、1μmol/L分为高、中、低3个浓度组,建立模拟冷缺血再灌注模型,流式细胞技术检测各组细胞内钙离子浓度及细胞凋亡水平,分别检测各组细胞培养上清液乳酸脱氢酶水平。结果冷缺血8 h再灌注6 h后,高、中、低浓度大黄素处理组钙离子荧光强度分别为(24.12±0.51)(、26.35±1.34)、(39.12±1.94),均显著低于对照组的105.29±1.01(P<0.01)。高、中、低浓度大黄素处理组细胞凋亡率分别为(5.46±0.41)%、(10.64±0.64)%、(11.90±0.50)%,均显著低于对照组的(25.40±1.41)%(P<0.01)。高、中浓度大黄素处理组上清液LDH含量分别为(179.67±18.57)u/L(、198.83±14.22)u/L,显著低于对照组的(351.33±34.16)u/L(P<0.01)。结论大黄素可降低模拟冷缺血再灌注后的肝细胞内钙离子浓度,抑制细胞凋亡,减轻肝细胞损伤。

大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤时姜黄素后处理对肝细胞凋亡的影响

背景:姜黄素预处理可减轻肢体缺血再灌注对肝脏的损伤,但姜黄素后处理对肝脏冷缺血再灌注损伤是否有保护作用及其机制目前研究甚少。目的:探讨大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤时姜黄素后处理对肝细胞凋亡的影响。方法:选取成年雄性SD大鼠80只,采用随机数字表法将其分成4组(n=20):假手术组、冷缺血再灌注组、姜黄素后处理组、地塞米松组。使肝脏血流处于完全阻断状态,随后以脾静脉作为流入道和右肾上腺静脉作为流出道注入0℃复方乳酸林格液,冷灌注30min;停止冷灌注后,结扎近端脾静脉和右肾上腺静脉,切除脾脏,随即恢复肝脏血流,完成制作冷缺血再灌注模型。在大鼠冷缺血30min后,姜黄素后处理组经尾静脉注射姜黄素60 mg/kg,地塞米松组尾静脉注射地塞米松0.5 mg/kg,其他组以等量的生理盐水替代。再灌注6 h时经下腔静脉取血,检测血清天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转移酶水平,随后处死大鼠,取肝组织检测丙二醛水平;采用苏木精-伊红染色观察肝脏病理变化;Hoechst33258染色法检测肝细胞凋亡指数;Westernblot检测肝组织Bcl-2和Bax蛋白表达;RT-PCR检测肝组织促细胞凋亡基因Caspase-9m RNA表达;ELISA检测肝组织肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β水平。结果与结论:①与假手术组比较,冷缺血再灌注组天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转移酶、丙二醛和凋亡指数明显升高(P<0.05);苏木精-伊红染色切片可见肝血窦内有大量炎性细胞浸润,肝细胞嗜酸性变,胞浆内疏松化,肝细胞呈气球样变,偶可见斑片状坏死,散在点状坏死灶;Bcl-2表达下降,Bax表达明显升高(P<0.05);Caspase-9 mRNA表达、肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β水平明显升高(P<0.05);②与冷缺血再灌注组比较,姜黄素后处理组天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转移酶、丙二醛和凋亡指数明显下降(P<0.05);苏木精-伊红染色可见肝血窦内炎性浸润明显减轻,胞浆嗜酸性变和气球样变的肝细胞明显减少,但偶可见少量散在的点状坏死;Bcl-2表达升高,Bax表达明显下降(P<0.05);Caspase-9 mRNA表达、肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β水平明显下降(P<0.05);③姜黄素后处理组上述各指标与地塞米松组比较差异无显著性意义(P>0.05);④综上所述,姜黄素后处理可减轻大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤,其作用机制可能通过上调Bcl-2/Bax比值,抑制凋亡启动子Caspase-9mRNA的表达,减少炎性因子肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β的释放,发挥抗凋亡的肝保护作用。

DBcAMP对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨DBcAMP对大鼠移植肝脏在冷缺血再灌注损伤的保护作用。方法:应用SD大鼠原位肝移植(OLT)动物模型,根据保存液的不同,80只大鼠随机分为3个组:HC-A液对照组(A组,n=30);DBcAMP+HC-A液实验组(B组,n=30);UW液对照组(C组,n=20)。所有组在单纯低温保存8h再行原位肝移植术,测定肝组织ATP含量和肝细胞内游离Ca2+浓度变化情况、血清转氨酶,进行组化染色。结果:B组与A组相比,低温保存8h末ATP含量(μmol/g湿重)较高,分别为0.53±0.10,0.48±0.08组间有显著性差异(P<0.05)。B组与A组相比,门静脉开放6h后肝细胞内游离Ca2+浓度(nmol/L)低,分别为419.30±51.12,472.20±57.93,组间有显著性差异(P<0.05);血清ALT、AST(U/L)均较低,分别为3153±741.79,2208±450.34;3790±1029.82,2527±662.20组间有显著性差异(P<0.01)。PAS染色示门静脉开放后,B组较A组肝组织糖原含量少。HE染色及电镜下观察B组较A损伤明显减轻,但是仍比C组重。结论:DBcAMP对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤具有保护作用。

高压干燥保存对小鼠供心冷缺血再灌注损伤的影响

目的观察氧气（oxygen,O2）及一氧化碳（carbon monoxide,CO）混合高压气体干燥保存方法对小鼠离体供心冷缺血再灌注损伤的影响。方法采用C57BL/6雄性小鼠,建立同系小鼠心脏颈部异位移植模型。4~6周龄供体鼠48只,数字表法随机分为4组（n=12）：空白对照组（A组）、即刻移植组（B组）、组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐（histidine-tryptophan-ketoglutarate solution,HTK）液保存组（C组）及高压干燥保存组（D组）。6~8周龄小鼠36只,数字表法随机分为3组,即刻移植受体组、HTK受体组及高压干燥受体组（n=12）。供心处理如下：A组仅取供体心,不做移植;B组供心不经保存取下后即刻移植;C组供心浸泡于HTK液中;D组供心悬挂并置于高压气体罐中（PO2：3.2×101.3 k Pa＋PCO：0.8×101.3 k Pa=4×101.3 k Pa）。C、D两组供心均于4℃冰箱中保存24 h后,分别移植于受体组小鼠颈部。移植后2 h,对比观察B、C、D三组复跳情况及供心功能。移植后24 h,检测受体鼠血清心功酶变化;取各组供心组织,分别采用苏木素-伊红（HE）染色、Tunnel染色及行蛋白免疫印迹（Western-blot,WB）检测,对比观察供心病理学改变、心肌细胞凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-2（B cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2）蛋白表达情况。结果 B组10只供心复跳,C组2只供心复跳,D组9只供心复跳,3组间复跳率比较,差异有统计学意义[83.3%（10/12）vs.16.7%（2/12）vs.75.0%（9/12）,P=0.0015];其中D组复跳率低于B组,但明显高于C组,差异有统计学意义（P〈0.0125）。移植2 h后B、C、D组间供心功能评分比较,差异有统计学意义（5 vs.0 vs.3,P〈0.01）,两两比较差异有统计学意义（P〈0.05）。4组间血清肌钙蛋白I（troponin I,Tn I）浓度比较,差异有统计学意义（P〈0.001）,D组高于A、B两组,但低于C组（P〈0.001）。苏木素伊红染色结果显示D组细胞水肿、炎症细胞浸润等组织变化情况较A、B两组明显,但较C组轻。Tunnel染色结果显示D组心肌细胞凋亡较A、B两组明显,但少于C组,差异有统计学意义（P〈0.01）。Western-blot结果显示D组bcl-2的表达上调,高于其余3组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论高压干燥保存可减轻离体供心冷缺血再灌注损伤,维持供心活力,有效延长供心保存时间。

含饱和氢气HC-A肾保存液减轻大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤的研究

目的:研究含饱和氢气的HC-A肾保存液对大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠24只随机分为3组(n=8)。H1组大鼠仅接受右肾切除;H2组大鼠为冷缺血再灌注模型,以腹主动脉插管和下腔静脉缺口作为灌注和流出通路,用4℃普通HC-A肾保存液对左肾行原位冷灌注,灌注完成后阻断左肾动、静脉,缝合腹主动脉和下腔静脉缺口。阻断45min后移除血管夹,冲洗腹腔后关腹;H3组仅灌注液换用自制的4℃含饱和氢气的HC-A肾保存液,其它处理同H2组。3组大鼠均于24 h后再次手术,取血标本,测定BUN和Cr浓度,评估肾功能。切取左肾,检测肾组织中MDA的水平和SOD、caspase-3的活性,并在光镜下观察肾组织形态学的改变。结果:与H2组相比,H3组BUN、Cr、MDA的水平和caspase-3活性降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05)。光镜下,H3组肾组织病理损伤较H2组减轻。结论:含饱和氢气的肾保存液能减轻大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤。

高压干燥保存对小鼠供心冷缺血再灌注损伤中自噬及凋亡作用的影响

目的心脏移植是治疗终末期心脏病的有效手段,延长供心保存时间有助于解决供心紧缺的问题,文中旨在通过观察一氧化碳和氧气的高压干燥保存是否能够延长供心保存时间及其作用机制。方法选取SPF级C57BL/6雄性小鼠共84只,将4～6周龄48只供鼠随机分成4组（n=12）：对照组（仅取供体心,不做移植）、即刻移植供体组（供心不经保存取下后即刻移植）、组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐液（histidine-tryptophan-ketoglutarate solution,HTK）保存供体组（供心浸泡于HTK液中24 h）及高压干燥保存供体组[供心悬挂并置于高压气体罐中（氧分压：3200 h Pa,一氧化碳分压：800 h Pa）,保存24 h]。将6～8周龄36只受鼠随机分为3组（n=12）：即刻移植受体组、HTK保存受体组及高压干燥保存受体组。将各供体组的供心分别对应移植于各受体组,移植后2 h,对比观察各受体组复跳情况及供心功能。取对照组及各移植受体组供心组织,HE染色观察供心病理学改变,Tunnel染色观察心肌细胞凋亡情况,Western blot检测自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ及Bcl-2蛋白表达情况。结果即刻移植受体组与高压干燥保存受体组复跳率高于HTK保存受体组（P〈0.05）。高压干燥保存受体组、HTK保存受体组、即刻移植受体组移植后2 h供心功能评分分别为[2.5（2.0～2.9）、0.8（0.5～1.0）、4.5（4.0～4.5）分],组间两两比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。高压干燥保存受体组LC3-Ⅱ蛋白及Bcl-2蛋白表达量为（2.06±0.29、0.87±0.18）、即刻移植受体组为（1.24±0.20、2.07±0.32）,均高于对照组（0.13±0.03、0.19±0.02）与HTK保存受体组（0.16±0.06、0.26±0.08）,差异有统计学意义（P〈0.05）。HTK保存受体组Bcl-2蛋白表达量高于对照组（P〈0.05）。高压干燥保存受体组LC3-Ⅱ蛋白低于即刻移植受体组（P〈0.05）。HE染色结果显示：高压干燥保存受体组供心心肌细胞水肿、炎症细胞浸润等组织变化情况较对照组、即刻移植受体组明显,但较HTK保存受体组轻。与对照组、即刻移植受体组凋亡细胞指数[（1.08±0.56）、（2.13±1.71）%]比较,高压干燥保存受体组、HTK保存受体组[（5.04±1.77）、（26.72±5.23）%]升高（P〈0.01）,而高压干燥保存受体组凋亡指数较HTK保存受体组降低（P〈0.01）。结论一氧化碳和氧气的高压干燥环境中可减轻小鼠供心冷缺血再灌注损伤,其机制可能与促进自噬,为细胞提供能量,抑制心肌细胞凋亡有关。

PI3K/Akt信号通路介导莱菔硫烷预处理对大鼠供心冷缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路介导莱菔硫烷(SFN)预处理对大鼠心肌冷缺血再灌注损伤(IRI)的作用,阐明其作用机制。方法:64只健康雄性SD大鼠随机分为冷IRI组、SFN组、LY(PI3K抑制剂)+冷IRI组和LY+SFN组,每组供、受体各8只。将冷藏于组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐液(HTK液)9h供心移植到受体大鼠的腹腔,建立同种大鼠异体异位心脏移植模型,术后24h取供心心肌组织,采用苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织形态表现,免疫组织化学法和Western blotting法检测心肌组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,即蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、Bax、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的蛋白表达水平。结果:心肌组织形态表现,冷IRI组和LY+冷IRI组大鼠心肌组织损伤最严重,SFN组心肌组织损伤最轻,LY+SFN组心肌组织损伤介于冷IRI组和SFN组之间。免疫组织化学法和Western blotting法,与冷IRI组比较,SFN组p-Akt蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05),而Bax蛋白表达水平降低(P<0.05);应用阻滞剂LY294002后,与LY+冷IRI组比较,LY+SFN组p-Akt蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),但Bcl-2蛋白表达水平仍升高(P<0.05),Bax蛋白表达水平仍降低(P<0.05),Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05)。结论:SFN可能通过PI3K/Akt信号通路减轻心脏移植心肌冷IRI。

一氧化氮合酶在N-乙酰半胱氨酸调控大鼠心肌冷缺血-再灌注损伤中的变化

目的:观察一氧化氮合酶(NOS)在N-乙酰半胱氨酸(NAC)调控大鼠心肌冷缺血-再灌注损伤中的变化。方法:将健康雄性Lewis大鼠60只随机分为3组。(1)对照组:摘取供心前30 min,经供体大鼠下腔静脉注射生理盐水0.5 mL;(2)供体预处理组:摘取供心前30 min,经供体大鼠下腔静脉注射NAC300 mg/kg,受体大鼠不作预处理;(3)受体预处理组:移植前30 min,经受体大鼠下腔静脉注射NAC300 mg/kg,供体大鼠不作预处理。将冷藏于4℃HTK液18 h的供心移植至受体大鼠腹腔,建立同种异体心脏移植模型。于再灌注24 h后取供心采用免疫组化方法检测诱导型一氧化氮合酶/内皮型一氧化氮合酶(iNOS/eNOS)蛋白表达水平,以免疫组化评分(IHS)表示。采用Real time-PCR法检测iNOS/eNOS mRNA表达。结果:与对照组相比,供、受体预处理组的iNOS蛋白表达降低,IHS评分分别为3.00±0.15、1.50±0.22、1.63±0.26,P<0.05;而eNOS蛋白表达升高,IHS评分分别为2.00±0.21,3.60±0.16,3.40±0.26,P<0.05。与对照组相比,受体预处理组iNOS mRNA表达降低(0.43±0.17对1.00±0.41,P<0.05),供体预处理组eNOS mRNA表达升高(3.06±1.47对1.00±0.65,P<0.05)。结论:NOS参与了NAC预处理减轻移植大鼠心肌缺血-再灌注损伤的过程。

大鼠肾冷缺血再灌注损伤对肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨大鼠肾冷缺血再灌注损伤对肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法封闭群SD大鼠24随机分为对照组与实验组,每组12只。2组均切除右肾,实验组左肾实施冷缺血再灌注。2组大鼠均在术后24h再次手术切除左肾进行检测。透射电镜检查肾组织形态学,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果①超微结构检查(透射电镜):对照组肾脏组织形态结构正常,实验组呈现损伤,部分细胞核可见凋亡迹象。②细胞凋亡检测:对照组偶见肾小管上皮细胞凋亡,实验组显著增多,细胞凋亡指数实验组均显著大于对照组(P<0.05)。结论大鼠肾脏冷缺血再灌注后肾小管上皮细胞凋亡明显增加。

门体转流大鼠肝冷缺血再灌注模型与肝移植模型的比较

目的 建立一种门体转流下大鼠冷缺血再灌注损伤模型并与肝移植模型进行对比.方法 Wistar大鼠随机分为3组：A组（10只）：对照组,B组（140只）：肝移植组,C组（94只）：脾脏移位肝脏冷缺血再灌注组.并进行门静脉压、肝功能及肝脏病理学变化检测.结果 B组和C组术后1d和7d均表现出特征性的缺血再灌注损伤表现.B组门静脉阻断后1 min和10 min门静脉压明显高于C组[1 min：（29.93±2.42） mm Hg比（22.91 ±4.01） mmHg,P＜0.01；10 min：（57.12±4.44） mm Hg比（18.32±4.42） mm Hg,P＜0.01）.与A组比较,B组和C组术后即刻即出现胆红素（TBIL）、γ-谷氨酰转肽酶（GGT）和碱性磷酸酶（ALP）水平的明显升高（P＜0.05）,B组和C组术后1d出现TBIL、GGT、谷丙转氨酶（ALT）和ALP水平的明显升高（P＜0.05）,且B组改变明显高于C组（P＜0.05）.术后7d,B组GGT仍明显高于A和C组[B组和A组：（2.16 ±0.34） IU/L比（1.39±0.36） IU/L,P＜0.05；B组和C组：（2.16±0.34） IU/L比（1.75±0.32） IU/L,P＜0.05].C组2周生存率高于B组（P＞0.05）.结论 门体转流原位冷缺血再灌注损伤模型是理想的肝脏冷缺血再灌注损伤模型.

自体脂肪间充质干细胞对大鼠肾冷缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察大鼠自体脂肪问充质干细胞（ADSCs）移植对肾冷缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用。方法将24只成年雄性Wistar大鼠随机分为3组：A组（假手术组）、B组（肾冷IRI组）、C组（肾冷IRI＋ADSCs组）：冷IRI即刻肾内注射剂量为2×10^6个的自体ADSCs，冷IRI后6h经阴茎静脉注射相同剂量自体ADSCs。再灌注24h处死大鼠观察。结果C组再灌注24h血清肌酐水平[（112．1±14．1）μmol／L]与B组[（169．5±17．5）μmol／L]比较显著降低，差异有统计学意义（P=0．001）；光镜下观察C组的肾脏组织病理学改变较B组明显减轻；反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析显示C组肾组织FasmRNA表达水平（0．93±0．05）较B组（1．04±0．08）显著降低，差异有统计学意义（P=0．012），C组肾组织血红素氧合酶-1（HO-1）mRNA表达水平（0．35±0．03）较B组（0．244±0．05）显著增高，差异有统计学意义（P=0．001）。结论自体ADSCs移植通过抑制肾细胞凋亡及减轻氧化应激来保护大鼠肾冷IRI。

瘦素预处理对小鼠心肌冷/热缺血再灌注损伤的差异性

目的研究同种小鼠腹部心脏移植模型中,瘦素预处理对心肌冷/热缺血再灌注损伤(IRI)的差异性。方法 30只雄性C57BL/6小鼠被随机分为3组:(1)心肌冷IRI组:瘦素预处理(术前30 min予腹腔注射重组瘦素,剂量为50μg/kg。)后行同种间小鼠腹部心脏移植,供体置于4℃UW液中保存6 h;(2)心肌热IRI组;(3)心肌缺血再灌注模型对照组(MIRI组)。分别于术后6 h收获标本,观察组织形态学变化,检测小鼠移植心脏及血清中性粒细胞活性,炎性细胞因子水平等。结果心肌冷/热IRI两组对照比较,小鼠血清心肌肌钙蛋白(TnI)、心肌髓过氧化物酶(MPO)活性、血清细胞炎性因子肿瘤坏死因子(TNF)-α,白介素(IL)-1β,IL-6水平无明显差异(P>0.05)。结论瘦素预处理虽然可以减轻心肌冷/热IRI,减轻炎症反应,但是小鼠心肌冷/热IRI之间的差异性无统计学意义。

吸入氢气和(或)一氧化碳可改善大鼠心肌冷缺血再灌注损伤

手术中心肌缺血再灌注损伤是心脏移植物失功的关键因素。它不仅能直接损伤心肌细胞,还能使内皮细胞受损,继而加速移植心脏冠状动脉疾病的进展。有关医学气体最近的研究显示氢气、一氧化碳、硫化氢、

肝脏缺血再灌注损伤机制的研究进展

组织经历一定时间的缺血后恢复血流灌注，不仅无法使组织器官功能得以迅速恢复正常，反而加重组织器官炎症反应、结构破坏、甚至出现严重功能障碍，这一过程被称为缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury，IRI）。这种损伤常发生于医疗过程中，如器官移植、溶栓治疗、动脉搭桥术、体外循环心脏手术、低血容量性休克等，进而出现肝、脑、心、肺、肾、肠等多器官功能损伤，成为影响缺血治疗效果的一个重要因素。其中肝脏IRI（HIRI）最为常见和严重，限制了肝切除术的适应症及边缘性肝脏供体的应用，在不同程度上阻碍了肝脏外科及肝移植的发展和普及。HIRI可分为热缺血再灌注损伤及冷缺血再灌注损伤，二者发生的病理生理过程相似，其机制涉及诸多因素，与代谢障碍、氧化应激、细胞活化、炎症反应等有关，各个因素形成相互制约、相互促进的关系。近些年，蛋白酶抑制剂、自由基清除剂、钙通道阻滞剂、某些激素或中药等均已被证实可从多种途径有效抑制HI-RI。目前，新型免疫抑制的应用及基因治疗等也逐渐成为人们研究的焦点。本文综合国内外研究资料就HIRI发生发展的常见机制（见图1）加以综述。

Akt/GSK-3β通路介导调控莱菔硫烷减轻心脏移植缺血再灌注损伤的研究

目的探讨蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号通路对莱菔硫烷(SFN)预处理减轻大鼠心肌冷缺血再灌注损伤(IRI)的作用机制。方法 64例健康雄性SD大鼠随机分为4组:IRI组、SFN组、阻滞剂LY294002+IRI(LY+IRI)组、阻滞剂LY294002+SFN预处理(LY+SFN)组,将冷藏于心肌保护液(组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐液)9 h的供体心脏移植到受体大鼠的腹腔,复制同种大鼠异体异位心脏移植模型,术后24 h取供体心脏心肌组织,采用免疫组织化学法(IHC)和Western blot检测Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、GSK-3β、磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)蛋白的表达。结果 IHC法和Western bolt检测各种蛋白结果显示,与IRI组比较,SFN组p-Akt和p-GSK-3β蛋白表达升高(P<0.05)。应用阻滞剂LY294002后,SFN+LY组与LY+IRI组的p-Akt和p-GSK-3β蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SFN能通过Akt/GSK-3β信号通路减轻心脏移植心肌冷缺血再灌注损伤。

肝脏缺血再灌注损伤机制的研究进展

肝脏缺血再灌注损伤（hepatic ischemia reperfusion in-jury，HIRI）是指肝脏组织缺血一段时间后血流重新恢复，损伤却进一步加重的现象[1]。可分为热缺血再灌注损伤和冷缺血再灌注损伤，其中热缺血再灌注损伤多见于消化道大出血，失血性休克，肝切除手术等，冷缺血再灌注损伤则发生于肝移植过程中。HIRI是导致肝部分切除术后肝功能衰竭及肝移植后供肝功能低下及无功能的重要原因，是肝部分切除及肝移植的主要制约因素之一。本文就近年来有关肝脏缺血再灌注损伤发生机制进的研究进展进行综述。