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兔骨髓基质干细胞的分离生长及冻存技术研究 被引量:12
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作者 张文元 杨亚冬 +2 位作者 房国坚 边敏章 陈勇 《中国卫生检验杂志》 CAS 2005年第6期651-653,共3页
目的:建立兔骨髓基质干细胞(MSC)体外分离、培养、增殖、冻存的方法,以及探讨其生物学特性。方法:抽取兔髂骨及胫骨的骨髓液,采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化出MSC,并增殖。观察MSC的生长特性,测定其贴壁率及第3、8、13、18... 目的:建立兔骨髓基质干细胞(MSC)体外分离、培养、增殖、冻存的方法,以及探讨其生物学特性。方法:抽取兔髂骨及胫骨的骨髓液,采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化出MSC,并增殖。观察MSC的生长特性,测定其贴壁率及第3、8、13、18代的生长曲线,并评价其生物学特性。MSC在12.5%DMSO条件下经液氮或-60℃冻存复苏,测其成活率。结果:MSC为贴壁生长,以均一的梭形的成纤维细胞样生长,贴壁及增殖能力强,所测各代的生长曲线呈相似的S型,倍增时间约为35h。MSC需液氮保存,短期也可-60℃冰箱保存。结论:获得的兔MSC生长旺盛、增殖能力强,其分离、培养、纯化、增殖、冻存方法是可行的,可较长时间稳定地培养增殖、冻存,传代的MSC可保持其原代的生物学特性。MSC将是组织工程理想的种子细胞。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 冻存技术 生物学特性 密度梯度离心法 MSC 生长曲线 增殖能力 体外分离 分离纯化 生长特性 复苏 DMSO 倍增时间 液氮保 冰箱保 方法 培养增殖 种子细胞 组织工程 骨髓液 培养法 贴壁率 成活率
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组织工程学血管构建中脐带内皮细胞分离及冻存技术的初步研究 被引量:1
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作者 蒋红军 贾兵 +1 位作者 陈张根 王克强 《中国心血管病研究》 CAS 2004年第1期57-60,共4页
目的 为制备组织工程学血管随时提供种子细胞,对人脐静脉内皮细胞分离、体外培养、传代及鉴定方法进行研究,并研究其冻存技术,探讨建立脐带血管内皮细胞库的可能性。方法 新鲜脐带49条,脐静脉内灌注消化酶消化,获得内皮细胞,进行体外培... 目的 为制备组织工程学血管随时提供种子细胞,对人脐静脉内皮细胞分离、体外培养、传代及鉴定方法进行研究,并研究其冻存技术,探讨建立脐带血管内皮细胞库的可能性。方法 新鲜脐带49条,脐静脉内灌注消化酶消化,获得内皮细胞,进行体外培养,相差显微镜下观察酶消化结果及所荻内皮细胞贴壁生长规律;采用VⅢ因子免疫荧光染色,鉴定所获内皮细胞及其纯度;加入冻存液,置于液氮进行保存,复苏后,分别进行台酚蓝拒染试验及MTT还原试验,绘制细胞生长曲线。结果 血管内灌注消化液法可获得取高纯度的内皮细胞,胰酶和胶原酶混合灌注法消化结果优于单纯胰酶及胰酶和EDTA组,各组消化时间均以10~15min为佳;混合酶消化组细胞获得率及贴壁结果均较其他二组为优。与未冻存细胞相比,复苏的细胞活力保持在95%以上。复苏后的内皮细胞的生长曲线与未冻存细胞的生长曲线无差异。结论 脐静脉灌注酶消化法可获取足够数量及纯度的内皮细胞,混合酶消化法消化效果最佳,经体外培养扩增后,可提供足够数量及纯度的内皮细胞。冻存的内皮细胞复苏后仍保持较高的活力及体外增殖能力,能及时提供制备组织工程学血管的种子细胞来源。 展开更多
关键词 组织工程学 血管 脐带 内皮细胞 冻存技术 心脏病 心血管
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肿瘤细胞库建立18年及其低温冻存技术 被引量:3
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作者 贾伟 陆信 杨志伟 《云南医药》 CAS 1999年第6期405-405,共1页
Objective In order to establish tumour cell line and screen anticancer drugs. Methods We froze cell line in liquid nitrogen container with 10% glycerin. Some of them were kept more than 15 years. Results Cell livabili... Objective In order to establish tumour cell line and screen anticancer drugs. Methods We froze cell line in liquid nitrogen container with 10% glycerin. Some of them were kept more than 15 years. Results Cell livability rate arrived at 80%~90% after anabiosis. Conclusion Our cell store is suitable to offer cell line for scientific research and for complete task of investigation. 展开更多
关键词 肿瘤细胞库 癌细胞株 低温冻存技术
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细胞的简易冻存技术与冻存液的选择 被引量:2
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作者 刘耳 陆建华 《中国畜禽传染病》 CSCD 1989年第6期45-46,共2页
在组织培养和细胞杂交工作中,培养细胞的保种十分重要。目前保存细胞的唯一途径是液氮冻存。我们试用简易冷冻技术和不同的冻存液,对数种细胞株/系进行了冻存、复苏试验,现报告如下。
关键词 细胞 液氮冷 冻存技术
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动物卵巢组织的冻存技术
5
作者 李娜 张云山 《中国计划生育学杂志》 2015年第6期429-432,共4页
目前,随着放疗和化疗技术不断发展,女性癌症患者存活率大幅度提高。然而,放疗和化疗会对年轻女性患者卵巢功能造成极大损伤,进而使其生育能力显著降低。研究表明,在接受化疗的年轻女性癌症患者中,超过1/3会发展成卵巢早衰[1];使用标准... 目前,随着放疗和化疗技术不断发展,女性癌症患者存活率大幅度提高。然而,放疗和化疗会对年轻女性患者卵巢功能造成极大损伤,进而使其生育能力显著降低。研究表明,在接受化疗的年轻女性癌症患者中,超过1/3会发展成卵巢早衰[1];使用标准盆腔放疗剂量将无一例外导致卵巢早衰。因此,癌症治愈后生育力保存就显得尤为重要。目前,人类卵巢组织冻存技术已取得一定进展,但由于受到伦理等问题限制尚缺乏系统研究。 展开更多
关键词 冻存技术 卵巢组织 动物 化疗技术 癌症患者 女性患者 放疗剂量 卵巢早衰
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卵巢组织冻存与移植,守护女性生育力
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作者 温珍珍 周冰玉 +1 位作者 刘洁 袁慧彬 《健康生活》 2024年第6期18-19,共2页
在人类探索生育奥秘的历程中,卵巢组织冻存与移植技术已成为守护女性生育力的坚实堡垒。正如冰川中的生命在极寒中等待春天的到来,卵巢组织冻存与移植技术为那些因种种原因而丧失生育能力的女性重新点燃了生育的希望。这项技术不仅是对... 在人类探索生育奥秘的历程中,卵巢组织冻存与移植技术已成为守护女性生育力的坚实堡垒。正如冰川中的生命在极寒中等待春天的到来,卵巢组织冻存与移植技术为那些因种种原因而丧失生育能力的女性重新点燃了生育的希望。这项技术不仅是对女性生育力的捍卫,而且是对女性生育力保护的坚定承诺。冻存技术不简单简单来说,卵巢组织冻存与移植就是一场有关人体的“农耕作业”。农耕作业讲究气候、时间等,以便于劳作。人体内的卵巢就好比含有种子的果实,如果能够保存好这个果实,那么果实里的种子在等到合适的时机后被种植回人体内,就会重新生长。 展开更多
关键词 移植技术 卵巢组织 冻存技术 生育力 耕作业 生育能力
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人脐静脉内皮细胞分离与冻存技术及Gore-Tex人工血管内皮化 被引量:6
7
作者 蒋红军 贾兵 +1 位作者 陈张根 王克强 《中华胸心血管外科杂志》 CSCD 北大核心 2005年第5期282-285,共4页
目的体外分离人脐静脉内皮细胞,进行冷冻保存,并采用冻存脐静脉内皮细胞,复融后体外扩增培养,种植于Gore-Tex表面,进行人工血管内皮化。方法脐静脉内灌注消化液分离内皮细胞,所获内皮细胞体外培养,经免疫荧光染色及扫描电镜检查,鉴定所... 目的体外分离人脐静脉内皮细胞,进行冷冻保存,并采用冻存脐静脉内皮细胞,复融后体外扩增培养,种植于Gore-Tex表面,进行人工血管内皮化。方法脐静脉内灌注消化液分离内皮细胞,所获内皮细胞体外培养,经免疫荧光染色及扫描电镜检查,鉴定所获内皮细胞及其纯度;采用梯度降温法,冻存内皮细胞,经复苏后,进行形态学检查,以台酚蓝试验、四氮唑盐(MTT)试验、流式细胞术细胞凋亡检测等方法鉴定细胞生物特性;冻存脐静脉内皮细胞体外培养扩增后,种植于Gore-Tex材料上,并行扫描电镜观察。结果血管内灌注消化液法可获取高纯度的内皮细胞;与新鲜细胞相比,复苏的内皮细胞活力保持在95%以上;复苏后的内皮细胞HE染色及生长曲线与新鲜细胞差异无统计学意义。冻存内皮细胞的凋亡率较新鲜内皮细胞高,但无统计学差异。冻存内皮细胞成功种植于Gore-Tex材料上,细胞生长良好,覆盖于大部分Gore-Tex表面。结论冻存内皮细胞作为种子细胞对人工血管内皮化具有可行性。脐静脉灌注酶消化法可获取足够数量及纯度的内皮细胞。冻存的内皮细胞复苏后无明显形态学改变,并保持较高的活力及体外增殖能力,可作为种子细胞来源。 展开更多
关键词 内皮 血管 细胞培养 聚四氟乙烯 流式细胞术 人脐静脉内皮细胞 GORE-TEX 人工血管内皮化 冻存技术 细胞分离 扫描电镜观察
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生物活性产品玻璃化冷冻保存研究进展 被引量:6
8
作者 秦廷武 莫湘涛 杨志明 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期1070-1074,共5页
综述了有关动物细胞、胚胎、组织、器官和工程化组织的玻璃化冷冻保存问题。对玻璃化冻存技术基本原理及其在生物产品保存中的冷冻、复温方法,玻璃化液的组成、作用及其对保存产品的影响等进行了阐述。指出玻璃化冷冻保存可能是长时间... 综述了有关动物细胞、胚胎、组织、器官和工程化组织的玻璃化冷冻保存问题。对玻璃化冻存技术基本原理及其在生物产品保存中的冷冻、复温方法,玻璃化液的组成、作用及其对保存产品的影响等进行了阐述。指出玻璃化冷冻保存可能是长时间保存有活性的生物产品简单、适用、有效的方法。同时指出玻璃化冷冻保存方法面临的问题及发展的方向。 展开更多
关键词 玻璃化 生物产品 玻璃化冷 生物产品 生物活性 长时间保 动物细胞 冻存技术 复温方法 方法 工程化
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改良外周血造血干细胞冷冻保存剂的临床应用 被引量:2
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作者 应美爱 周明 +2 位作者 陈家萍 潘健 完晓菊 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2013年第20期137-138,共2页
自体外周血造血干细胞移植近年来在国内外得到广泛应用,已成为治疗恶性血液病和多种实体瘤的有效方法。造血干细胞冻存技术的应用,使患者有充裕的时间选择最佳预处理方案进行造血干细胞移植,体外保存过程中有效地保证造血干细胞的活... 自体外周血造血干细胞移植近年来在国内外得到广泛应用,已成为治疗恶性血液病和多种实体瘤的有效方法。造血干细胞冻存技术的应用,使患者有充裕的时间选择最佳预处理方案进行造血干细胞移植,体外保存过程中有效地保证造血干细胞的活力是移植成功的关键,冻存干细胞的效率高低直接影响移植成功率。经典外周血造血干细胞深低温冷冻保护剂多使用10%二甲基亚砜和人血白蛋白,但存在一定风险[JJ,我们改良了细胞冻存保护剂对13例患者进行32次自体外周血造血干细胞采集后冷冻保存,取得较好的临床效果,现总结如下。 展开更多
关键词 自体外周血造血干细胞移植 临床应用 改良 造血干细胞采集 冻存技术 恶性血液病 预处理方案
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冻存脂肪胶在面部自体脂肪移植中的应用 被引量:4
10
作者 任婧 李烨 冯晶玮 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2021年第8期478-481,共4页
目的探讨冻存脂肪胶(stromal vascular fraction-gel,SVF-gel)技术在面部自体脂肪移植中的应用效果。方法自2018年12月至2020年1月,南方医科大学南方医院整形外科回顾了70例应用SVF-gel或补充短期或长期冻存SVF-gel进行面部自体脂肪移... 目的探讨冻存脂肪胶(stromal vascular fraction-gel,SVF-gel)技术在面部自体脂肪移植中的应用效果。方法自2018年12月至2020年1月,南方医科大学南方医院整形外科回顾了70例应用SVF-gel或补充短期或长期冻存SVF-gel进行面部自体脂肪移植的患者,其中17例行短期冻存SVF-gel填充,27例行长期冻存SVF-gel填充。结果70例患者面部接受SVF-gel即刻填充手术(注射量30~55 ml)取得良好效果。短期冻存(1个月之内)与长期冻存(3~6个月)SVF-gel的补充注射都有效弥补即刻SVF-gel注射后的吸收,有效提高术后最终效果。结论冻存SVF-gel技术提供了一种简单、安全的方法,可进行多次填充,免去了患者二次脂肪抽吸术的痛苦,具有良好的临床应用前景。 展开更多
关键词 自体脂肪移植 面部年轻化 冻存技术 脂肪胶
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1990~1992年人类精子库人工授精工作回顾(附101例治疗报告)
11
作者 陈奕权 王建新 +1 位作者 华庆和 周瑞祥 《福建医科大学学报》 1994年第3期279-280,共2页
1990~1992年人类精子库人工授精工作回顾(附101例治疗报告)陈奕权,王建新,华庆和,周瑞祥关键词:人工授精,精子库,精子冻存技术人类精子超低温冻存技术及其临床应用研究在国内已陆续报道。目前已建立的为临床生育治... 1990~1992年人类精子库人工授精工作回顾(附101例治疗报告)陈奕权,王建新,华庆和,周瑞祥关键词:人工授精,精子库,精子冻存技术人类精子超低温冻存技术及其临床应用研究在国内已陆续报道。目前已建立的为临床生育治疗服务的规范化精子库(semenb... 展开更多
关键词 人工授精 精子库 精子冻存技术
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生命之源在这里滴水成河——SCLNOW~圣释脐带多能干细胞的产业化发展
12
作者 闫杰培 《中国科技产业》 2015年第9期71-71,共1页
世界干细胞产业的迅速发展,使得全球干细胞产业市值逐年升高。然而,作为人口众多的亚洲地区,在全球干细胞市场份额中只占17%,仍有巨大的市场空间等待我们去发掘。为此,SCLNOW?圣释脐带多能干细胞在此背景下应运而生。将通常被视为医疗... 世界干细胞产业的迅速发展,使得全球干细胞产业市值逐年升高。然而,作为人口众多的亚洲地区,在全球干细胞市场份额中只占17%,仍有巨大的市场空间等待我们去发掘。为此,SCLNOW?圣释脐带多能干细胞在此背景下应运而生。将通常被视为医疗废弃物的新生儿脐带组织,采用SCLNOW?圣释生物特有的分离、培养和冻存技术,经过43项完善的质量检测,能够得到具有多能性、安全性、基因稳定性、非致瘤性、高纯度、高活力的SCLNOW@圣释脐带多能干细胞。 展开更多
关键词 多能干细胞 SCLNOW 医疗废弃物 冻存技术 质量检测 多能性 体外诱导分化 肝祖细胞 间充质干细胞 贵州省铜仁
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Research Progress on Technique of Frozen Embryo Transfer in Sheep 被引量:1
13
作者 SHE Qiu-sheng HU Jian-ye +2 位作者 LOU Peng-yan TAO Jing XIE Zhao-hui 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第3期397-399,共3页
The paper introduced the research progress on the technique of frozen embryo transfer in sheep,illustrated selection of donors and receptors,superovulation,synchronization of estrus,embryo cryopreservation and embryo ... The paper introduced the research progress on the technique of frozen embryo transfer in sheep,illustrated selection of donors and receptors,superovulation,synchronization of estrus,embryo cryopreservation and embryo transplantation. Frozen embryo transfer in sheep is another breakthrough in the high-quality sheep raising,and this technique in China is in its infancy recommendation stage,but it will be comprehensively popularized in the future. 展开更多
关键词 SHEEP Frozen embryo Research progress
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Fertility preservation in female cancer patients
14
作者 Rumana Jafarey 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2011年第1期1-8,共8页
Cancer is not rare in younger women of reproductive age therefore the preservation of fertility among them has become a significant concern due to aggressive cancer therapy they must undergo.Today different strategies... Cancer is not rare in younger women of reproductive age therefore the preservation of fertility among them has become a significant concern due to aggressive cancer therapy they must undergo.Today different strategies for fertility preservation are available in patients at risk.However,many of these available techniques are still experimental and have limited clinical experience.Under ethical principle,better interdisciplinary cooperation between clinicians and patients,appropriate counseling and further research on cryopreservation and transplantation techniques may enhance their success to preserve fertility of young cancer victims.In this article,the existing and emerging fertility preserving strategies in young cancer female as well as their safety and ethical issues are discussed. 展开更多
关键词 CANCER TRANSPLANTATION CRYOPRESERVATION fertility preservation
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全国人大代表阮祥燕:建立国家级生育力保护中心
15
作者 王迪 《民生周刊》 2023年第7期84-85,共2页
建立中国首个以卵巢组织冻存移植为核心的国家级生育力保护中心,搭建多学科合作诊疗平台,为患者提供全周期管理。“如果将卵细胞比喻成种子,卵巢比喻成土壤,那么卵巢组织冻存技术,相当于把种子和土壤一起保存,等原发疾病治愈后,再把保... 建立中国首个以卵巢组织冻存移植为核心的国家级生育力保护中心,搭建多学科合作诊疗平台,为患者提供全周期管理。“如果将卵细胞比喻成种子,卵巢比喻成土壤,那么卵巢组织冻存技术,相当于把种子和土壤一起保存,等原发疾病治愈后,再把保存完好的包含成千上万颗卵母细胞的卵巢组织移植回体内,以维持正常的卵巢功能。”两会期间,全国人大代表、北京妇产医院内分泌科主任阮祥燕接受《民生周刊》记者专访时说。 展开更多
关键词 北京妇产医院 多学科合作 卵巢组织移植 内分泌科主任 冻存技术 原发疾病 生育力保护 全周期管理
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女性化疗患者卵巢功能保护的研究进展
16
作者 楚培源 吴衡慧 《中国实用医刊》 2020年第8期118-122,共5页
化疗作为恶性肿瘤的有效治疗手段,能改善患者预后,延长生存期,甚至达到临床治愈的效果。化疗能杀灭肿瘤细胞,也会损害育龄期女性患者卵巢功能。卵母细胞冻存、胚胎冻存、卵巢组织冻存、促性腺激素释放激素激动剂、促性腺激素释放激素拮... 化疗作为恶性肿瘤的有效治疗手段,能改善患者预后,延长生存期,甚至达到临床治愈的效果。化疗能杀灭肿瘤细胞,也会损害育龄期女性患者卵巢功能。卵母细胞冻存、胚胎冻存、卵巢组织冻存、促性腺激素释放激素激动剂、促性腺激素释放激素拮抗剂为临床常用的保护卵巢功能的措施,部分药物对卵巢影响的确切机制尚不明确,其疗效尚存争议。 展开更多
关键词 卵巢 生育功能 冻存技术 促性腺激素释放激素类似物
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Cryopreservation of mammalian oocytes and embryos: current problems and future perspectives 被引量:20
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作者 MOUSSA Mahmoud SHU Juan +1 位作者 ZHANG XueHong ZENG FanYi 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2014年第9期903-914,共12页
Cryopreservation techniques for mammalian oocytes and embryos have rapidly progressed during the past two decades,emphasizing their importance in various assisted reproductive technologies.Pregnancies and live births ... Cryopreservation techniques for mammalian oocytes and embryos have rapidly progressed during the past two decades,emphasizing their importance in various assisted reproductive technologies.Pregnancies and live births resulting from cryopreserved oocytes and embryos of several species including humans have provided proof of principle and led to the adoption of cryopreservation as an integral part of clinical in vitro fertilization.Considerable progress has been achieved in the development and application of the cryopreservation of mammalian oocytes and embryos,including preservation of the reproductive potential of patients who may become infertile,establishment of cryopreserved oocyte banks,and transport of oocytes and embryos internationally.However,the success rates are still far lower than those obtained with fresh oocytes and embryos,and there are still obstacles that need to be overcome.In this review,we address the major obstacles in the development of effective cryopreservation techniques.Such knowledge may help to eliminate these hurdles by revealing which aspects need improvement.Furthermore,this information may encourage further research by cryobiologists and increase the practical use of cryopreservation as a major part of assisted reproductive technologies for both humans and animal species. 展开更多
关键词 CRYOPRESERVATION MAMMALS OOCYTES embryos cryoinjuries
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