冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)对大鼠的生殖毒性

目的:观察不同剂量冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)对大鼠的胚胎-胎仔发育毒性,为评价冻干狂犬病疫苗的安全性提供依据。方法:雌性SD大鼠60只,随机分为4组:低剂量疫苗组(1剂/次)、高剂量疫苗组(2剂/次)、阴性对照组和辅料对照组,于交配前第0、3、7、14天免疫,21天合笼交配后,妊娠第7和14天再次免疫,分别观察各项生殖毒性指标。结果:各剂量组孕鼠生殖能力及胎仔生长发育各项指标均未见明显差异。结论:高剂量冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)对大鼠无生殖毒性作用。

地鼠肾细胞狂犬病纯化疫苗临床研究观察

了解地鼠肾细胞狂犬病纯化疫苗接种安全性及有效性。分别以 1.0ml及 0 .5ml的剂量 ,按暴露后及暴露前免疫程序给 313人接种 ,用小鼠中和试验法检测血清中和抗体效价。结果显示 :临床副反应轻微 ,副反应率为0 .89%～ 15 % ;免疫全量疫苗和半量疫苗的人群均获保护力 ,抗体阳转率为 10 0 % ,免后抗体GMT滴度分别为35 .2IU/ml(n =32 )和 31.4IU/ml(n =37) ,经检验两组无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;免疫全量疫苗和半量疫苗两组的免疫前、后相比 ,经检验有显著性差异 (P <0 .0 5 ) 。

无佐剂狂犬病地鼠肾细胞疫苗接种后不良反应观察

目的了解人用无佐剂地鼠肾纯化狂犬疫苗免疫接种后不良反应发生情况,评价其安全性。方法对410例狂犬病毒暴露者全程5针免疫接种后发生的不良反应追踪观察,按局部、全身、胃肠道反应进行记录。结果局部反应、全身反应、胃肠道反应发生率低,依次为8.04%、6.83%、1.21%,反应轻微,以疼痛、全身乏力、局部红肿等轻症症状为多见,且持续时间短。结论人用无佐剂地鼠肾细胞纯化狂犬疫苗安全性高。

柱层析法纯化人用地鼠肾细胞狂犬病疫苗

用Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－６Ｂ凝胶层析法纯化原代地鼠肾细胞狂犬病苗，可去除绝大部分杂蛋白，总蛋白含量减少９９．４％以上，纯化后抗原比活性提高２１０倍，单位疫苗剂量中牛血清含量降低１８．７倍以上。方法简单，价廉。

人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)基质残余蛋白标准品的建立

目的:研制用于人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)中地鼠肾细胞蛋白质残留量检测(ELISA法)的国家标准品。方法:分两步进行协作标定和量值溯源,第一步采用Lowry法对原代地鼠肾细胞蛋白质标准品原液进行赋值,第二步采用ELISA法对原代地鼠肾细胞蛋白质标准品进行赋值。结果:数据经统计学处理结果,最终原代地鼠肾细胞蛋白质标准品量值为4.0μg·mL^(-1),95%可信限为:(4.0±0.5)μg·mL^(-1)。结论:建立了国家原代地鼠肾细胞蛋白质标准品,赋值准确可靠、科学严谨,可用于人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)基质残余蛋白的质量控制。

精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗纯化工艺的建立

分别用Sepharose 4B、Sephacryl 2 0 0HR和Sepharose 6 Fastflow柱色谱进行地鼠肾细胞狂犬病疫苗浓缩原液纯化试验 ,试制精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗。对疫苗的残余牛血清含量、效力、收获率和安全性进行检测 。

精制原代地鼠肾细胞狂犬病疫苗灭活工艺的改进

为了提高精制原代地鼠肾细胞狂犬病疫苗 (PPHKRV)的质量 ,在甲醛浓度 ,温度和时间相同的条件下 ,对静置法和转瓶法灭活狂犬病毒后制成的疫苗进行了效力测定比较 ,结果表明采用转瓶灭活的PPHKRV效力高于静置灭活法。

浓缩地鼠肾细胞狂犬病疫苗与纯化Vero细胞狂犬病疫苗接种人体的血清学效果观察

为了解国产浓缩地鼠肾细胞狂犬病疫苗与法国纯化Vero细胞狂犬病疫苗接种人体后中和抗体产生情况。分别用两种疫苗接种 1 0人 ,用小鼠中和试验方法检测中和抗体滴度。国产疫苗五针全程免疫后 30天 (第一针接种后 6 0天 )可 1 0 0 %达到保护水平 ,法国疫苗在第一针接种后 30天 1 0 0 %达到保护水平。第一针接种后 1 4、30、6 0天时 ,前者抗体平均滴度分别是 0 0 6IU /ml、1 .0 2IU/ml、2 .0 7IU/ml;后者抗体平均滴度分别是 0 2 5IU /ml、3.2 4IU/ml、1 1 .86IU/ml,后者比前者产生抗体的滴度高 ,具有显著性差异 (P <0 0 2 )。

精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗吸附条件的筛选试验

精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗（PPHKRV）中含有一定剂量的佐剂，它可以提高疫苗的免疫原性，现已将AlPO4和Al(OH)3两种佐剂用于PHKRV中，比较不同浓度，不同吸附，pH和不同吸附时间疫苗效价，从中筛选最适宜作为PPHKRV的吸附剂。

地鼠肾细胞培养的CTN株狂犬病新疫苗研究

应用细胞毒种代替豚鼠脑毒种制备狂犬病地鼠肾细胞纯化疫苗。将狂犬病毒CTN株在原代地鼠肾细胞(PHKC)传代适应 ,用病毒培养液上清作为生产用毒种 ,结果通过在PHKC传 10多代 ,适应后病毒滴度达到 7.0LogLD50 /ml,并应用适应株 (CTN LS HK)细胞毒种制备三批疫苗 ,其效力在 6 .11～ 6 .5 5IU/ml,高于用aG株豚鼠脑毒种制备的三批疫苗效力 (3.77～ 5 .85IU/ml)。

广西应用原代地鼠肾细胞人用狂犬病疫苗接种效果的研究

目的评价原代地鼠肾细胞人用狂犬病疫苗的预防接种效果。方法观察性研究。结果广西16年应用原代地鼠肾细胞人用狂犬病疫苗接种狂犬病暴露人群保护率为86．0％，疫苗用量由1982年10万人份增加到1995年的50万人份，使广西狂犬病疫情下降呈剪刀叉的趋势。全国情况也是一样。1987年广西全面建立犬伤门诊后，按照局部伤口清洗，抗血清应用与疫苗免疫“三者并重”原则的处理方法，对狂犬病的预防效果与所产生的社会效果是巨大的。结论原代地鼠肾细胞人用疫苗预防效果良好，价格低廉，比精制鸡胚细胞疫苗与精制录猴肾细胞疫苗等容易在发展中国家中推广使用。

精制人用地鼠肾细胞狂犬病疫苗免疫学效果的研究

国内现行的狂犬病疫苗浓缩倍数大，副反应率高，一部分病例无法完 成全程免疫．精制狂犬病疫苗的研制，提高了疫苗的质量，降低了副反应，抗体阳 转率１００％．

地鼠肾细胞狂犬病疫苗的纯化研究

我们应用凝胶过滤及离子交换柱层板法对地鼠肾细胞狂犬病疫苗进行纯化，结果表明，凝胶柱层析法即可使该疫苗效价达到４．８ＩＵ／ｍｌ，小牛血清残留置小于５０ｎｇ／ｍｌ，符合《中国生物制品规程》要求。并经离子交换柱层板后，效力降低至１．９ＩＵ／ｍｌ，病毒损失较大。故只采用凝胶过滤柱层析法做为该苗的纯化工艺，并为大规模生产提供依据。

国产冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的接种反应及其免疫原性

目的观察国产冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的接种反应及其免疫原性。方法观察组200例和对照组50例暴露后,按照0、3、7、14、28d免疫程序,分别接种国产、进口冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)。观察组接种疫苗后,观察全身和局部反应情况。采用快速荧光灶抑制试验(RFFIT)检测观察组和对照组接种后的血清中和抗体水平。结果观察组疫苗接种后,局部红肿、硬结、疼痛、瘙痒发生率分别1.4%、0.8%、17.1%和2.4%;全身反应发热、皮疹、头痛、疲劳乏力和其他反应发生率分别为1.2%、0.4%、2.4%、4.2%和0.3%,且在第7天完全消失。观察组与对照组疫苗首剂接种后7d,抗体阳转率分别为40.3%和37.0%,14d分别为95.5%和97.7%,差异无统计学意义;且首剂接种后45d,抗体阳转率均为100%。观察组和对照组疫苗首剂接种后7、14、45d,血清中和抗体GMT差异无统计学意义,14、45d血清中和抗体GMT均大于0.5IU/ml。结论国产冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)接种反应轻微,并具有良好的免疫原性。

狂犬病毒地鼠肾细胞适应株的选育

将aG株豚鼠脑组织毒种于原代地鼠肾细胞传代适应后，优选出一株感染地鼠肾细胞增殖滴度高，稳定性好并保持原株抗原性的新的适应株，其生物学性状和免疫原性研究结果表明，将有可能取代豚鼠脑毒种，生产出更为安全、有效的狂犬病疫苗。