PCR反应混合液的冻干处理及其应用

本研究将除模板DNA以外的PCR反应混合液 ,经过真空浓缩冻成干粉状后 ,分别置于室温和 4℃贮存 ,经过一定的贮藏时间后进行PCR反应 ,发现经冻干处理的样品能在较长的贮存时间内保持扩增活性 。

冻干处理犬同种异体下颌骨:满足重建的强度、外形及支持能力

背景:同种异体颞下颌关节具有良好的外形结构、生物学特性,成为解决髁突缺损的有效方法之一,但是免疫排斥和成骨速度缓慢是同种异体骨移植存在的主要问题。目的:对犬下颌骨进行冻干处理,使其满足同种异体骨支架重建下颌骨缺损的需要。方法:获取12只比格犬下颌骨,去除骨膜、软组织、软骨等,用裂钻将颊侧皮质骨制造出直径为1 mm的孔隙,孔隙间距为1.0-2.0 cm。清洗干净后,先放入-4℃的冷库中,12 h后逐渐降至-80℃保存,1周后将冷冻骨放入干燥机内,使骨组织内剩余水分降低到5%以下,然后进行无菌包装,辐射灭菌后,置于无菌真空器中常温保存。冻干处理后进行生物力学检测。结果与结论:压缩实验和弯曲实验的载荷-位移曲线均显示冻干骨的最大位移较小,曲线陡直,塑性区不明显,压力一旦超过弹性区迅速出现骨断裂。冻干骨压缩实验的最大载荷为(5 163.10±730.16)N,最大位移为(0.78±0.19)mm,刚度为(11 069.17±1 758.12)N/mm;弯曲实验的最大载荷为(486.67±134.12)N,最大位移为(0.67±0.15)mm,刚度为(1 151.67±256.46)N/mm。表明经水化处理后冷冻干燥犬下颌骨强度可以保持良好的外形及较好的支持能力,能够满足下颌骨修复重建的力学要求。

气冲式胶塞清洗机用于冻干胶塞处理及与进口设备的比较

通过气冲式胶塞清洗机与意大利进口的胶塞清洗机实际使用情况的综合比较,阐明了气冲式胶塞清洗机对冻干胶塞处理的独特优势。

冻干同种与异种骨移植免疫反应的比较研究

目的: 通过比较冻干同种与异种骨移植免疫反应, 探讨异种骨移植排斥机制。方法: 取C57BL/6小鼠 10只和新西兰兔 1只, 分别为同种和异种骨供体, 通过处理制成冻干骨。取 40只BALB/c小鼠为骨移植受体, 随机分为A、B两组 (每组 20只), 分别在其股后肌袋植入冻干同种和冻干异种骨。分别于术后 1、2、4、6周分批取材检测。通过观察术后受者的淋巴细胞刺激指数、淋巴细胞亚群分析、细胞因子产生及组织学表现, 比较冻干同种与异种骨移植免疫反应。结果: 冻干异种骨移植组的细胞刺激反应在各不同时期均比同种组强 (P<0. 05 ), 而且其CD4+和CD8+T细胞亚群及IL 2分泌均高于同种组 (P<0. 05)。组织学检查也表明其细胞浸润多、成骨少。结论: 冻干同种与异种骨移植排斥机制基本相同, 二者均以Th1反应为主, 但异种骨移植排斥反应较强。

不同方法对鹰嘴豆总黄酮提取含量的影响及鹰嘴豆总黄酮对小鼠的镇痛效果研究

[目的]研究鹰嘴豆总黄酮最佳提取及处理方法,评价鹰嘴豆总黄酮对小鼠的镇痛作用。[方法]以产自新疆维吾尔自治区的鹰嘴豆为试验材料,采用硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定经超声波辅助提取法、索氏回流提取法、微波提取法、超声波辅助提取+旋转蒸发处理法、索氏回流提取+旋转蒸发处理法、超声波辅助提取+冷冻干燥处理法分析获得的鹰嘴豆总黄酮含量,确定鹰嘴豆总黄酮的最佳提取及处理方式。将昆明系小鼠随机分为5组,鹰嘴豆总黄酮高、中、低剂量组分别灌胃鹰嘴豆总黄酮60、30、15 mg/(kg·BW),阳性对照组灌胃阿司匹林80 mg/(kg·BW),空白对照组灌胃生理盐水0.1 mL/(10 g·BW),每日给药1次,连续3 d;按照上述分组及给药方案,采用热板舔足法(n=40,每组8只)、温浴甩尾法(n=40,每组8只)和醋酸扭体法(n=40,每组8只)考查不同剂量鹰嘴豆总黄酮对小鼠的镇痛效果。[结果]不同提取及处理方法获得的鹰嘴豆总黄酮含量为:超声波辅助提取+冷冻干燥处理法(51.18 mg/g)>索氏回流提取法(13.16 mg/g)>超声波辅助提取法(4.86 mg/g)>索氏回流提取+旋转蒸发处理法(4.75 mg/g)>微波提取法(3.03 mg/g)>超声波辅助提取+旋转蒸发处理法(0.57 mg/g)。与空白对照组相比,高剂量和低剂量鹰嘴豆总黄酮分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)延长给药后10、30、60 min小鼠热板舔足反应痛阈,中剂量鹰嘴豆总黄酮可显著(P<0.05)延长给药后10、30 min小鼠热板舔足反应痛阈;中剂量和低剂量鹰嘴豆总黄酮均可极显著(P<0.01)延长给药后2 h小鼠温浴甩尾反应痛阈;高、中、低剂量鹰嘴豆总黄酮均可极显著(P<0.01)减少醋酸致小鼠扭体反应次数,高、中、低剂量组的疼痛抑制率分别为35.44%、35.44%、61.37%,低剂量组的扭体反应次数低于阳性对照组,疼痛抑制率高于阳性对照组。[结论]确定的鹰嘴豆总黄酮最优提取及处理方法是超声波辅助提取+冷冻干燥处理法。不同剂量的鹰嘴豆总黄酮对小鼠均表现出较好的镇痛效果,以低剂量[15 mg/(kg·BW)]鹰嘴豆总黄酮的镇痛效果最好。

前处理对咖啡绿原酸高效液相色谱检测的影响

[目的]比较液氮和不同提取剂处理对绿原酸含量检测的影响,为筛选操作简单且精密度更高的绿原酸提取方法提供参考。[方法]液氮冻干咖啡豆,研究低温研磨对绿原酸含量检测的影响;对比水、40%甲醇和60%乙醇3种提取剂对绿原酸含量检测的影响。[结果]与未冻干样品相比,液氮处理准确度更高。与水提取相比,40%甲醇和60%乙醇提取方法准确度更高,相对误差更小。[结论]综合考虑绿原酸提取效率及安全性,确定液氮冻干研磨-60%乙醇提取为该试验最优的绿原酸提取前处理方法。

冻干后菌数、存活率与浓苗菌数的关系

为了使活菌苗能在常温下得到较长时间的贮存 ,当前在生产上常常采用对这类菌苗进行冷冻干燥处理。在冻干过程中部分细菌将因此而死亡 ,影响菌苗的免疫性能。因此 ,冻干过程中活菌数的稳定与否将是衡量冻干菌苗质量的重要尺度。冻干后的活菌数及存活率的高低可以直接反映菌苗质量和冻干过程质量的好坏。以准确的细菌存活率作为标准来指导生产是极为有益的。关于冻干后菌数及存活率与冻干前浓苗菌数的关系以前未见有报道。本文通过对 1

北虫草粉中有效成分分析

为明确北虫草粉中的有效成分,检测了北虫草粉中虫草素、粗多糖、氨基酸和维生素等含量。结果表明,冻干处理的北虫草粉中粗多糖、虫草素、SOD及维生素E分别为烘干处理的1.20、1.45、1.23、及1.25倍;虫草酸、蛋白质及维生素A的含量分别是烘干处理的0.97、0.97、0.06倍。结论:加工方法对北虫草粉有效成分有较大的影响,在具体应用中应根据针对目的性而选择适当的方法,以最大限度地保留所需要的有效成分。

基于实时荧光定量PCR技术的油气微生物勘探样品保存研究

针对一个油气藏和两个非油气藏上方的土壤剖面,围绕典型油气指示微生物甲烷氧化细菌,采用分子生态学技术比较了新鲜、自然风干和冷冻干燥3种处理下土壤中甲烷氧化细菌标靶基因pmoA的变化规律,研究了自然风干土壤能否用于油气资源微生物勘探。与新鲜土壤相比,自然风干和冷冻干燥显著降低了不同土壤剖面微生物总DNA含量,甲烷氧化细菌pmoA基因数量最多分别下降了90.7%和77.5%;然而,与非油气藏上方土壤剖面相比,自然风干和冷冻干燥处理后,油气藏上方不同土壤剖面依然检测到了大量的甲烷氧化细菌pmoA基因。本研究中,自然风干或冷冻干燥处理后的土壤适合于油气微生物勘探。

冻干前处理对双歧杆菌存活率影响的探讨

目的探索提高双歧杆菌菌体存活率的方法。方法分别考察冻干前处理的三种因素（菌泥暴露于空气中的时间、保护剂的温度以及混合时间）对青春双歧杆菌菌体存活率的影响。结果菌泥直接暴露于空气中,对双歧杆菌的存活有较大的影响,生产过程应尽量缩短暴露于空气中的时间;预先冷却到5-10℃的保护剂比常温的保护剂的保护效果更好;适当延长保护剂的混合时间,让保护剂充分渗入菌体内,能显著提高双歧杆菌的冻干存活率。结论冻干前处理对青春双歧杆菌存活有显著影响,缩短菌泥暴露于空气中的时间、保护剂预先冷却、适当延长混合时间可以有效保持菌体的存活率。

兔毛针织物低温染色预处理技术

分别采用紫外线辐照、超临界CO_(2)流体及冷冻干燥对兔毛针织物进行预处理,并对处理后的织物进行酸性染料的染色试验。测试了织物K/S值和上染百分率,探讨了不同处理方法对兔毛针织物低温染色性能的影响。结果表明,紫外线辐照、超临界CO_(2)流体及冷冻干燥处理都能在一定程度上改善兔毛纤维的低温染色性能,处理后样品的K/S值和上染百分率均高于未处理样品。XRD测试结果显示,冷冻干燥和超临界CO_(2)处理降低了兔毛纤维的结晶度,有利于染料上染。