DNATyper^(TM) 30六色荧光STR复合扩增冻干试剂的验证

本研究旨在测试DNATyper^(TM) 30冻干试剂的技术性能指标,评估其在法医学案件检验中的应用能力。制定测试方案,设置不同的存储条件和时间范围,通过检测标准DNA 9947A对冻干试剂的检出率、灵敏度、稳定性等方面进行测试,并使用案件样本对冻干试剂进行检测,同时将液体试剂和冻干试剂性能进行平行比对。结果显示,DNATyper^(TM) 30冻干试剂分型结果准确,可重复性好,具有较高的灵敏度(0.125 ng),对微量陈旧检材有很好的适应性,可常温状态下保存1个月以上。本研究表明DNATyper^(TM) 30冻干试剂可显著增加上样模板量、可延长试剂在常温下的保存时间、操作简单、灵敏度高,可满足微量DNA检测、试剂长途运输和常温携带的需要。

^(99m)Tc-枸橼酸冻干试剂的制备及药代动力学研究

９９ｍＴｃ枸橼酸冻干试剂的制备及药代动力学研究范成中莫廷树谭天秩近年来，９９ｍＴｃ标记小分子化合物〔１～３〕以其在病变部位聚集早、血清除快、主要经肾脏排泄等优点，成为目前核医学炎症显像研究的方向之一。１９９３年，Ｅｒｃａｎ等〔１〕报告９９ｍＴｃ枸...

囊液抗原间接冻干试剂的研制及应用

由于囊虫寄生在宿主的肌肉、皮下、脑、眼等深层组织内，直接查找病原较为困难。应用ELISA法，间接血凝试验免疫学诊断法诊断囊虫病，具有重要的临床应用价值、据国内报道，间接血凝试验乃具有较高的敏感性及特异性，对囊虫病的检出率为76.7－89.7％[1-4]。但由于间接血凝诊断液不便保存和运输诊断标准又不统一等缺点，限制了该法的推广应用。我们在建立了ELISA法的基上，于1987年研制出囊液抗原间凝冻干试剂（冻干试剂），并应用于临床，结果满意。

全预混冻干PCR试剂检测草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型的研究

草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型是导致草鱼出血病的主要病原体之一,目前在我国广泛流行。本研究根据GenBank中草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型基因序列,设计了草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型特异性探针和PCR引物,通过优化反应条件,建立了草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型一步法TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。试验对反转录和PCR反应体系进行摸索,通过优化的冻干工艺制备出草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型全预混RT-PCR试剂,在荧光定量PCR中,冻干试剂的检测灵敏度可达10个模板,是普通PCR的100倍。批次间变异系数小于4%。特异性试验结果表明,该方法可特异性地检出草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型,而对鲤春病毒血症病毒、传染性造血器官坏死症病毒无检测信号。该冻干试剂4℃保存12个月,室温25℃保存3个月,37℃保存15d,敏感性仍为10个,与第1d相同;利用手持单通道荧光PCR仪,可在42min内完成核酸诊断。本试验基于荧光定量PCR检测方法,结合核酸扩增体系冻干工艺制备的全预混草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型RT-PCR试剂具有耐保存便于运输、准确性高、仪器拓展性好的特点,对草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型快速诊断有重要意义。

猪伪狂犬病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及其冻干检测试剂的制备

猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)感染猪引起的一种传染病,目前在我国广泛流行。本研究针对GenBank中PRV的gE基因序列进行比较分析,在其保守区设计了特异性探针和PCR引物,通过优化反应条件,建立了可以区别野毒株和基因缺失疫苗株的TaqMan荧光定量PCR检测方法。该方法可特异性地检测出野毒感染,而对基因缺失疫苗株、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒无检测信号;对PRV检测的灵敏度可达10个模板拷贝数,是普通PCR的100倍。通过优化的冻干工艺制备出PRV全预混PCR试剂,室温25℃保存3个月或37℃保存15d,敏感性仍为10个拷贝,推测储存于4℃的有效期约为24个月;利用手持单通道荧光PCR仪,可在42 min时间内完成核酸诊断。本研究基于TaqMan荧光定量PCR检测方法,结合核酸扩增体系冻干工艺制备的PRV PCR冻干试剂具有耐保存,便于运输,准确性高等特性,对快速诊断PRV和病毒定量检测具有重要意义。

冰冻干燥G6PD反应试剂的制备及应用

根据葡萄糖一个磷酸脱氢酶（G6PD）荧光斑点试验方法，制备冰冻干燥G6PD反应试剂，观察冰冻干燥试剂在保存中的稳定性，用该试剂定性测定正常人和挑N缺乏者酶活性，并与G6血活性定量测定结果比较。结果冻干G6PD反应试剂在4℃至少能稳定6mo。与G6PD活性直接测速结果比较，检测G6PD活性正常者标本，符合率为92％～96％，男性G6PD缺乏者，符合率为100％。G6PD反应试剂经冰冻干燥后有利于贮存，且不影响试剂的检测效果。有条件的实验室可以批量生产，并可提供给基层医疗单位开展G6PD缺乏症的筛选。

酶法测定血清钾离子试剂改进及评估

目的建立一种酶法测定血清钾离子液体试剂的方法，并评估该液体试剂的重复性（批内精密度）、抗干扰能力、线性、热稳定性，与离子选择电极法fISE）的相关性。方法对原有酶法测定血清钾离子方法进行了改进，并参考临床和实验室标准协会（CLSI）相关文件对试剂进行评估。结果批内精密度0.846％～1．338％；线性范围0.～10mnl01／L（γ=0.999）；干扰物浓度总胆红素（TBil）600mg／L，直接胆红素（DBil）600.mg／L，维生素C（Vc）60.0.mg／L，乳糜15mg／L，血红蛋白10g／L时对试剂干扰不明显（≤±10％），抗钠离子干扰为249；该液体试剂与ISE法的回归方程Y=1．0345X＋0.0753，相关系数1为0.984（P〈0．001），显著相关；试剂热稳定性在37℃下放置7d后初始吸光度值降低15．43％。结论试剂改良后线性、批内精密度、抗干扰能力、热稳定性、与ISE显著相关。

SynthAsil-液体试剂盒检测APTT的结果评价

目的采用SynthAsil-液体试剂盒检测活化部分凝血活酶时间(APTT),并对其结果进行评价。方法使用SynthAsil-液体试剂及冻干粉试剂对224例标本进行APTT检测,对实验结果做相关性分析,以评价不同试剂检测结果的一致性。结果以干粉法为参考,液体法检测APTT试验诊断敏感性为64.15%,特异性为95.91%,准确度为88.39%,Kappa值为0.65。结论干粉法与液体法检测结果取得了可靠的一致性。

基于核酸预混室温储运技术的荧光定量PCR快速检测鼠疫耶尔森氏菌

目的实现荧光定量PCR技术在鼠疫现场和基层的应用。方法本试验将已建立的基于核酸预混室温储运技术的荧光定量PCR方法应用于我国各鼠疫疫源地野生菌株的检测,进行特异性评价。选取分布于我国境内不同鼠疫疫源地野生鼠疫耶尔森氏菌株、鼠疫减毒菌株、耶尔森菌属近缘菌株假结核菌及小肠结肠炎菌进行荧光定量PCR检测。结果55株鼠疫耶尔森氏菌及鼠疫减毒菌株扩增阳性,假结核耶尔森氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌无阳性扩增,冻干试剂在室温25℃和37℃条件下可保存6个月,敏感性与冷冻保存无差异,核酸扩增诊断可在1 h内完成。结论应用基于核酸预混室温储运技术的荧光定量PCR方法对我国各鼠疫疫源地55株鼠疫耶尔森氏菌检测呈现高度特异性,本试验冻干试剂具有可室温保存、便于运输、检测结果精准、快速等特点,具有较好的鼠疫现场应用前景。

西藏拉萨地区汉族人群红细胞免疫功能检测及其意义

近年来国内外陆续报道了肿瘤、乙肝、自身免疫病等多种疾病对红细胞免疫功能的影响。为了解在高辐射、缺氧的高海拔地区(海拔3000m以上)红细胞免疫功能是否有变化,本文对西藏拉萨地区(海拔3658m)的汉族人群进行红细胞免疫功能检测,并与川西平原健康人进行比较,现将结果报告如下。

无症状乙肝e抗原阳性和阴性者红细胞免疫功能探讨

红细胞具有免疫功能的理论是Siegel首先提出来的。近十余年来,国内外学者从不同角度对红细胞免疫功能进行了研究。尤其对肿瘤、自身免疫病、肝炎等疾病的红细胞免疫功能状态的研究取得了很大进展。我们对自贡市卫生防疫站1991年5～6月间乙肝门诊普查的481例群体进行筛选。

直接抗膜球蛋白花环试验检测人B淋巴细胞SIg的探讨及应用

目前公认表面膜免疫球蛋白(SIg)是B淋巴细胞特有的标志,故检测SIg来识别、计数B淋巴细胞最为准确可靠。近年来已建立了一种检测SIg的良好方法,即直接抗膜球蛋白花环反应(DARR)试验。其法是将抗人多价Ig抗体包被的红细胞作为指示细胞,在实验条件下当与SIg阳性B淋巴细胞密切接触时,即围绕之,形成花环。据报道,此法特异性好,灵敏度高,实验条件与操作较为简便。本文探讨了DARR的实验条件、方法及其临床使用价值,并尝试提供一个稳定可靠的检测试剂。结果表明,DARR试验是检测人B淋巴细胞的一个简便可靠的方法,其指示细胞可制成冻干试剂,便于使用和保存。

尿中吗啡检测用HI药盒试剂稳定性观察

本文报告我们试剂的尿中吗啡检测用HI药盒冻干及未冻干试剂保存时稳定性的观察结果。

慢性肾炎患者红细胞免疫功能的初步研究

慢性肾炎患者红细胞免疫功能的初步研究杨晓，张伟卓ＰＲＩＭＡＲＹＳＴＵＤＹＯＮＲＥＤＢＬＯＯＤＣＥＬＬＩＭ－ＭＵＮＥＡＤＨＥＲＥＮＣＥＦＵＮＣＴＩＯＮＩＮＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨＣＨＲＯＮＩＣＧＬＯＭＥＲＵＬＯＮＥＰＨＲＩＴＩＳＹａｎｇＸｉａｏ；Ｚｈａ...