冻干鼻喷流感减毒活疫苗病毒滴度FFA法的建立及验证

目的:建立并验证荧光灶法(FFA)检测冻干鼻喷流感减毒活疫苗病毒滴度的可行性。方法:采用FFA分别检测冻干鼻喷流感减毒活疫苗H1N1型、H3N2型、B型单一病毒收获液病毒滴度,并验证该方法的专属性、准确度、精密度、线性和耐用性。结果:该方法专属性良好;准确度回收率均为80%~115%,病毒滴度的试验内及试验间精密度RSD值均<10%;3个型别样品稀释倍数对数与病毒滴度呈线性关系,相关系数R2均>0.98;不同孵育温度的病毒滴度RSD值均<10%,耐用性良好。结论:建立的FFA具有良好的专属性、准确度、精密度、线性及耐用性,可用于冻干鼻喷流感减毒活疫苗病毒滴度检测。

鼻用流感减毒活疫苗在2～17岁人群中的效力

背景：已有8个随机有对照的临床试验,包括约有26 000名6月龄～17岁的人群,评估了流感减毒活疫苗（LAIV）与安慰剂或3价流感灭活疫苗（TIV）相比,其抗由培养证实的流感的效力。本文分析的目的是将现有LAIV在2～17岁人群中的效力资料结合在一起形成一整体资料,这个年龄段人群已批准使用LAIV。

鼻内基础免疫的流感活疫苗在纵隔淋巴结中诱发局部B细胞应答

大流行性流感减毒活疫苗(pLAIV)常被用于基础免疫以使受试者对后续的流行性流感灭活亚单位疫苗(plSV)产生强烈的中和性抗体应答。然而,在使用pISV加强免疫前曾接受与未接受pLAIV免疫的受试者之间,其外周血中的H5特异性记忆B细胞未检测出不同。为了探究pLAIV基础免疫的机制,研究者分别单独使用H5N1 pISV或pLAIV,或序贯使用H5N1 pLAIV和pISV免疫12只非洲绿猴(AGM)并系统检测其全身和局部引流淋巴结(LN)的免疫力。AGM模型重现了临床研究的血清学观察结果。有趣的是,H5N1 pLAIV在纵膈淋巴结(MLN)中诱导了强烈的生发中心B细胞应答。

经鼻黏膜免疫的双价流感活疫苗的保护效力及保护机制

先前我们报道了新的潜在的减毒流感活疫苗（LAIV）,命名为SIV/606,表达H1和H3血凝素毒株。我们还表明气管内接种SIV/606,可以防止感染H1和H3甲型猪流感病毒亚型。在这里,我们通过鼻内接种SIV/606至猪体,这是一种LAIV更合适的免疫途径,以期评价其疫苗效力。SIV/606鼻内接种,可以诱导血清Ig G抗体,预防H1N1 SIV（猪流感病毒）和H3N2 SIV。

国内外鼻喷流感减毒活疫苗给药装置喷雾特性的对比

目的对国内外鼻喷流感减毒活疫苗(live attenuated influenza vaccine,LAIV)给药装置喷雾特性进行对比。方法采用激光衍射法测定国内外两种鼻喷给药装置雾化颗粒粒径分布(DV10、DV50、DV90)、<10μm雾滴占比、Span跨度,Spray view仪器检测喷雾模式[最大直径(D_(max))、最短直径(D_(min))、椭圆率(ovality,D_(max)/D_(min))]和喷雾几何形态(喷雾角度及宽度),并进行比较分析。结果国内外两种鼻喷给药装置雾化颗粒的DV10、DV50、DV90粒径分布、<10μm雾滴占比及Span跨度差异均无统计学意义[莱文方差等同性检验F分别为0.622、0.135、3.067、0.212、0.058,P分别为0.434、0.714、0.085、0.647、0.810,且假定等方差显著性(双尾)值分别为0.439、0.228、0.281、0.539、0.910];喷雾模式的D_(max)、D_(min)、ovality差异均无统计学意义[莱文方差等同性检验F分别为2.102、2.666、0.514,P分别为0.158、0.114、0.479,且假定等方差显著性(双尾)值分别为0.651、0.407、0.160];喷雾角度及宽度的平均值比值分别为0.92和0.91,均在0.90~1.11范围内。结论国内外鼻喷给药装置均满足鼻喷LAIV的鼻喷给药要求,可用于鼻喷疫苗和药物的递送。

鼻黏膜给药装置中5种抗氧剂提取方法的建立及其在鼻喷流感减毒活疫苗中的迁移

目的通过5种抗氧剂提取和迁移试验,分析鼻喷流感减毒活疫苗与鼻黏膜给药装置之间的相容性,以保证药品的安全性和有效性。方法采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)考察5种抗氧剂(3114、1010、330、1076、168)在鼻黏膜给药装置胶塞和鼻喷装置中的含量,以及在鼻喷流感减毒活疫苗中的迁移量。依据添加剂的人每日允许摄入量(permitted daily exposure,PDE),评估鼻喷流感减毒活疫苗中5种抗氧剂是否存在安全性风险。并对5种抗氧剂的提取方法进行专属性、检测限及定量限、线性及范围、重复性和准确性验证。结果胶塞中检出抗氧剂3114和1076,未检出其他3种抗氧剂;鼻喷装置中检出抗氧剂3114、1010和1076,未检出其他2种抗氧剂,符合《欧洲药典》对5种抗氧剂的限度要求。3批鼻喷流感减毒活疫苗在加速[(25±2)℃放置0、5、10 d]和长期稳定性(2~8℃放置3、6个月)试验条件下,均未检出5种抗氧剂。每日摄入量低于PDE值,方法灵敏度满足分析评价阈值(analysis and evaluation threshold,AET)的测定要求,对患者的安全性风险较小。5种抗氧剂的提取方法专属性、线性、重复性良好,准确性较高。结论鼻喷流感减毒活疫苗与鼻黏膜给药装置相容性良好。

流感的克星

今年冬天，甲型H1N1流感病毒和季节性流感病毒将对数百万人的生命产生威胁。人们用七个月时间研制出了甲型H1N1流感疫苗，此疫苗将开始逐渐登上药房货架。在接下来的几个月疫苗的供给还会有些紧张，灭活疫苗（注射接种）和减毒活疫苗（使用鼻用喷雾接种）将先提供给那些最需要疫苗的人群，包括：儿童、孕妇、护工以及易感染人群，特别是抵抗力较弱的人。奇怪的是，这种新型H1N1流感病毒并不像季节性流感那样对老年人有更多的伤害。

什么是疫苗

疫苗是指用微生物或其毒素、酶,人或动物的血清、细胞等制备的供预防、诊断和治疗用的生物制剂,接种后可以引起肌体对特定疾病产生免疫力的作用。预防接种用的生物制品包括疫苗、菌苗和类毒素。其中,由细菌制成的为菌苗,由病毒、立克次体、螺旋体制成的为疫苗,有时也统称为疫苗。疫苗保留了病原菌刺激动物体免疫系统的特性。

HL60-pNL3.2报告基因热原检查法测定疫苗热原的适用性研究

目的探讨HL60-pNL3.2报告基因热原检查法在水痘减毒活疫苗、流感病毒裂解疫苗、冻干甲型肝炎减毒活疫苗热原测定中的应用。方法参照中国药典“体外热原检查法(报告基因法)”公示稿,计算3种疫苗最大有效稀释倍数(maximum valid dilution,MVD),干扰实验探讨3种疫苗对该方法测定热原是否存在干扰。参照中国药典2020年版通则9101对该方法测定3种疫苗热原进行方法学验证,用经验证的方法测定3种疫苗热原含量。结果水痘减毒活疫苗、流感病毒裂解疫苗、冻干甲型肝炎减毒活疫苗MVD分别为1000,200和1000倍。在MVD范围内,内毒素(endotoxin,LPS)在3种疫苗中的回收率在52.5%~110.1%。方法学验证结果显示该方法可用于3种疫苗热原测定,LPS浓度与其化学光强度(RLU值)相关系数(R^(2))均>0.98;LPS浓度在1~250 EU·mL^(-1),回收率结果在76.4%~192.8%。LPS浓度>5 EU·mL^(-1)时,重复性变异度均<25%;该方法用于3种疫苗热原测定的检测限和定量限在0.05~0.13 EU·mL^(-1)。用建立的HL60-pNL3.2报告基因热原检查法测定3种疫苗热原含量,均低于污染物限值。结论HL60-pNL3.2报告基因热原检查法具有不使用动物、操作简单、快速、检测热原谱广,可对热原进行定量的优点,可用于水痘减毒活疫苗、流感病毒裂解疫苗和冻干甲型肝炎减毒活疫苗热原测定。

关于流感疫苗 你最想了解的都在这

流行性感冒,简称“流感”,目前在全球上市的流感疫苗主要分为三种,即流感灭活疫苗、流感减毒活疫苗、流感重组疫苗,最近一年号称不打针、不吃药就能安全有效抗流感的“网红”--鼻喷流感疫苗就是减毒活疫苗的一种。

国外新近批准主要新药（七十）

美FDA批准第一种四价流感病毒疫苗FluMistQuadrivalent预防季节性流感2012年2月29日，美国FDA批准了Medlmmune公司开发的流感病毒减毒活疫苗（influenzavaccine，live）鼻内喷雾剂FluMist Quadrivalent，用于预防2-49岁幼儿至成人的季节性流感。