愈溃凉血颗粒联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎患者疗效及肠道屏障功能影响

目的愈溃凉血颗粒是姜建国教授治疗溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)临床经验用方,组方精锐,配伍缜密,疗效颇佳,为进一步明确其作用机制,现探讨愈溃凉血颗粒联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎患者的疗效及肠道屏障功能的影响。方法将2017年11月-2018年12月山东中医药大学附属医院溃疡性结肠炎患者80例,随机分为2组,各40例,基础治疗及处理均相同,对照组采用美沙拉嗪肠溶片1.0 g/口服,每天3次;观察组采用美沙拉嗪肠溶片1.0 g/口服,每天3次,联合愈溃凉血颗粒治疗,持续治疗4周为1个疗程。比较两组患者的临床疗效,采血测定血D-乳酸、二胺氧化酶(Diamine oxidase,DAO)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)及Baron内镜分级法、改良Mayo活动指数、炎症性肠病生存质量问卷(Inflammatory bowel disease quality questionnaire,IBDQ),记录不良反应状况。结果对照组有效率80.00%低于观察组95.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后对照组和观察组D-乳酸为(4.60±0.47)、(4.12±0.46)mmol/L,血DAO为(6.70±1.27)、(5.69±1.12)U/L,血IL-6为(39.22±8.65)、(32.81±8.12)ng/L,血TNF-α为(26.30±8.51)、(21.05±7.24)ng/L,Baron评分为(2.26±0.61)、(1.65±0.52)分,Mayo指数为(6.03±1.15)、(5.16±1.08)分,IBDQ量表为(182.91±32.10)、(216.05±35.26)分,对照组和观察组上述指标比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗中均无不良反应出现。结论愈溃凉血颗粒联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎患者的疗效确切,可以改善肠道屏障功能,降低炎症因子,提高生活质量,值得推广。

愈溃凉血颗粒联合美沙拉嗪肠溶片治疗大肠湿热型溃疡性结肠炎临床观察

目的探讨愈溃凉血颗粒联合美沙拉嗪肠溶片治疗大肠湿热型溃疡性结肠炎的临床效果。方法选择大肠湿热型溃疡性结肠炎患者90例,随机分为观察组、对照组各45例。对照组口服美沙拉嗪肠溶片治疗,观察组在对照组基础上给予愈溃凉血颗粒口服。两组均连续治疗8周。治疗前与治疗结束,评估两组DAI评分、Baron评分、大肠湿热证评分。治疗结束,参照《中药新药临床研究指导原则》评价两组中医证候疗效。治疗前和治疗结束6个月,采用炎症性肠病调查问卷(IBDQ)评估两组生活质量。结果两组治疗后DAI评分、Baron评分、大肠湿热证评分均低于治疗前,并且观察组治疗后降低效果更明显(P均<0.05)。观察组治疗有效率为91.1%(41/45),对照组为78.8%(35/45),两组比较P<0.05。两组治疗后IBDQ评分均高于治疗前,且观察组治疗后IBDQ评分高于对照组治疗后(P均<0.05)。结论愈溃凉血颗粒联合美沙拉嗪肠溶片治疗大肠湿热型溃疡性结肠炎的临床效果较好,不仅能提高黏膜愈合质量,加速疾病进入缓解期,还能提高患者生活质量。

四妙凉血颗粒的制备工艺研究

目的:优选四妙凉血颗粒的制备工艺。方法:以盐酸小檗碱转移率和得膏率为指标,采用正交试验法优化处方的水提取工艺;以成型率和溶化性为指标,筛选湿法制粒工艺中辅料种类、用量,优化颗粒剂处方及最佳成型工艺。结果:优化后的制备工艺:取12味处方量组方药材,加水煎煮3次,每次加12倍量水、煎煮0.5 h,滤过,合并滤液,浓缩成干膏,粉碎,加1.5倍糊精,混匀,用95%乙醇制软材,制粒,50℃干燥2 h,整粒,即得。结论:该研究建立的四妙凉血颗粒制备工艺稳定可行。

金芍凉血颗粒的质量标准研究

目的：建立金芍凉血颗粒的质量标准。方法：采用薄层色谱法对金芍凉血颗粒中的赤芍、白芷、牡丹皮进行定性鉴别。采用高效液相色谱法测定金芍凉血颗粒中绿原酸的含量。色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18（250＆#215;4.6 mm，5μm），流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶液（13：87），检测波长为327 nm，流速为1 mL/min。结果：薄层色谱特征斑点清晰，专属性强，阴性对照无干扰。绿原酸在0.0824～0.824μg（r=1）线性关系良好，平均回收率为99.50%，RSD=0.61%。结论：所建立的方法简便易行、准确可靠、重复性好，可用于金芍凉血颗粒的质量控制。

基于生物网络探究愈溃凉血颗粒治疗溃疡性结肠炎的作用机制

目的 基于网络药理学方法探究愈溃凉血颗粒(yu kui granules, YKG)治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)的生物学基础。方法 通过中药系统药理数据库及分析平台TCMSP数据库获取YKG的有效化合物及对应靶点,通过人类基因GeneCards数据库获得UC的相关靶点,并获取YKG与UC的共同靶点,对靶点之间的相互作用网络进行探究,并通过DAVID 6.8数据库对中药和UC的共同靶点进行GO生物学分析和KEGG通路富集分析。结果 共获得包括丁子香萜、槲皮素、β-谷甾醇、豆甾醇等187个有效化合物,抑癌基因P53(tumor protein p53, TP53)、转录因子和蛋白(JUN protein, JUN)、前列腺素内过氧化物合酶(prostaglandin endoperoxide synthase 2,PTGS2)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)、白介素2(interleukin 2, IL-2)等90个共同靶点,经GO富集分析得到199个条目(P<0.01),经KEGG富集分析得到76条相关通路(P<0.01),其中主要与磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinases B, Akt)信号通路、TNF信号通路、低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1, HIF-1)信号通路密切相关。结论:YKG的多成分、多靶点、多通路的特点是治疗UC的关键基础。

凉血颗粒所用药材的薄层鉴别

目的鉴别凉血颗粒所用的全部药材。方法采用薄层色谱法鉴别了凉血颗粒中黄芩、大黄、牡丹皮、栀子、芍药、生地黄等六味药材。结果分离效果良好,斑点清晰。结论所建方法简便、可靠、重复性好。

基于网络药理学和分子对接的四妙凉血颗粒质量控制研究

目的:通过网络药理学和分子对接筛选四妙凉血颗粒(SMLXC)对急性痛风性关节炎(AGA)的潜在有效成分,并测定SMLXC中3个成分的含量。方法:通过TCMSP和BATMAN-TCM数据库,获取SMLXC中药材的活性成分,同时检索TCMSP、Swiss Target Prediction、STITCH数据库进行靶点预测。使用OMIM、Gene Cards数据库查找AGA疾病靶点,通过Venny 2.1软件筛选成分靶点和疾病靶点的交集作为SMLXC治疗AGA的作用靶点。通过David数据库进行GO和KEGG富集分析。通过靶点网络分析,寻找相关通路的关键靶点。使用Discovery Studio进行分子对接,筛选抗炎核心成分,通过高效液相色谱法测定其中3个成分的含量。结果:筛选出与SMLXC相关的活性化合物102个,药物相关靶点239个;SMLXC与AGA的共同靶点30个;GO富集分析显示,SMLXC治疗痛风主要与细胞因子的活性调控、炎症反应等109条生物过程有关;KEGG富集分析显示,SMLXC可能通过TNF、NLRs和TLR等信号通路治疗痛风;可视化分析显示,PTGS2、MAPK14、MAPK1、IL-6等12个靶点可能是SMLXC治疗AGA的关键靶点;分子对接结果显示,小檗碱、落新妇苷等5个化合物与PTGS2有良好的对接活性。含量测定实验结果表明,SMLXC中含量测定结果由高到低依次为小檗碱(2.0008 mg·g^(-1))、落新妇苷(1.6583 mg·g^(-1))、山奈酚(1.5428 mg·g^(-1))。结论:SMLXC通过干预炎症、细胞因子的活性调控等相关通路达到治疗AGA的作用,建立的SMLXC的含量测定方法准确、稳定,为控制SMLXC的质量提供实验依据。

HPLC法测定凉血颗粒中绿原酸的含量

目的：建立HPLC法测定凉血颗粒中绿原酸含量。方法：采用反相色谱柱；流动相为甲醇-水-冰醋酸（20：100：1）；检测波长为324nm。结果：绿原酸在0．04208～0．2104μg范围内线性关系良好（r=0．9999），平均回收率为99．50％，RSD为0．92％（n=6）。结论：本方法灵敏、准确，可作为凉血颗粒的质量控制方法。

对复方凉血颗粒质量控制方法的研究

目的:探讨复方凉血颗粒的鉴别及含量测定方法,确定该方的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法(TLC)对复方凉血颗粒中的金银花、紫草、苦参及牡丹皮进行鉴别。采用高效液相色谱法(HPLC)对该方中的黄芩苷进行含量测定。结果:采用TLC可对复方凉血颗粒中的金银花、紫草、苦参及牡丹皮进行鉴别。采用HPLC对该方中的黄芩苷进行含量测定时,黄芩苷在0.017 6~0.352 0μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9)。结论:采用TLC和HPLC对复方凉血颗粒进行鉴别和含量测定可靠、准确、专属性强。TLC和HPLC可作为复方凉血颗粒的质量控制方法。

星点设计-效应面法优化四妙凉血颗粒的提取工艺

目的优化四妙凉血颗粒的提取工艺参数。方法以得膏率和盐酸小檗碱转移率为评价指标,采用单因素法筛选溶剂倍数、提取时间对评价指标的影响。以总评归一OD值为指标,采用星点设计法设计实验,通过效应面法优化提取工艺。结果预测得到最佳的二次多项回归方程为:Y=-0.456+0.0688A+8.64×10-3B-6×10-5AB-1.57×10-3A2-2.5×10-5B2,拟合度为0.9547。最佳提取参数为:溶剂倍数19倍,提取时间150 min。经3批验证实验:盐酸小檗碱的转移率、得膏率分别为为20.95%±1.7%、20.54%±0.47%,实际OD值与预测的OD值偏差为-5.94%。结论星点设计效应面法可用于四妙凉血颗粒提取工艺的优化,所建模型预测准确,优化后的提取工艺稳定、可靠。

中药凉血颗粒治疗银屑病的实验研究

目的:观察该中药对银屑病的治疗作用,为该药的临床应用提供药效学实验依据。方法:以己烯雌酚注射小鼠致其表皮增生,比较各组小鼠阴道基底细胞核分裂像数量、基底细胞核中银颗粒的数量;小鼠尾表皮细胞形成影响试验,比较各组鼠尾表皮颗粒细胞数。结果:凉血颗粒高、中剂量组可使小鼠阴道基底细胞核分裂像数量减少,高、中剂量组可使小鼠阴道基底细胞核仁组成区相关嗜银蛋白数量明显减少;高、中剂量组可使鼠尾鳞片表皮颗粒数增加。结论:中药凉血颗粒对银屑病有一定的治疗作用。

凉血清营颗粒对Ⅰ型变态反应的影响

目的 :研究凉血清营颗粒对Ⅰ型变态反应的影响。方法 :用天花粉蛋白所致小鼠速发型超敏反应及大鼠同种异体被动超敏反应 (PCA)观察对Ⅰ型变态反应的影响 ;用化合物 48/ 80所致小鼠过敏性休克死亡及大鼠颅骨肥大细胞模型观察对肥大细胞脱颗粒的影响 ;用组织胺所致小鼠皮肤毛细血管通透性亢进试验观察对组织胺的直接对抗作用。结果 :凉血清营颗粒能一定程度拮抗天花粉蛋白所致小鼠过敏性休克及大鼠PCA ,并能明显抑制化合物 48/ 80及天花粉蛋白所致腹腔或骨膜肥大细胞脱颗粒 ,还能明显对抗组织胺所致毛细血管通透性亢进。结论 :凉血清营颗粒具有显著的抗Ⅰ型变态反应作用 ,此作用可能是其能抑制IgE生成。

凉血活血颗粒对急性放射病-肺损伤的保护作用

目的研究凉血活血颗粒对急性放射病-肺损伤小鼠模型的保护作用。方法采用5.5 Gy60Coγ射线一次性全身照射小鼠,制成急性放射病-肺损伤动物模型。小鼠在照前45 min至照后30 d,给药组以不同剂量的凉血活血颗粒灌胃给药,正常对照组及模型组用等体积蒸馏水灌胃,均为1次/d。观察照后小鼠的一般情况,照后10 d每组抽取6只检测血常规,照后30 d处死,检测血常规、骨髓DNA、胸腺指数、肺脏指数,用HE染色观察肺脏的病理学改变。结果照后10 d,与正常对照组比较,辐射模型组外周血象显著下降;照后30 d,与正常对照组比较,辐射模型组肺脏指数明显升高,肺脏病理损伤显著,胸腺指数明显降低;外周血象和骨髓DNA有所恢复。凉血活血颗粒高剂量(4 g/kg)组能改善照后30 d小鼠的一般情况,显著降低肺脏指数,减轻辐射造成的肺脏病理损伤,显著增加胸腺指数;改善外周血象和提高骨髓DNA含量。结论凉血活血颗粒对辐射引起的呼吸器官、造血器官和免疫器官损伤具有较好的保护作用。

凉血清营颗粒的抗菌、解热、泻下和止痒作用研究

目的 :探讨凉血清营颗粒与其治疗变态反应性皮肤炎性疾病相关的作用 ,如抗菌、解热、泻下、止痒等。方法 :抗菌试验用体外试管法 ,解热试验用内毒素致家兔发热法 ,泻下试验直接观察小鼠排便情况 ,止痒试验应用化合物 48/80导致小鼠抓搔反应。结果 :凉血清营颗粒体外抗菌作用以对革兰氏阳性球菌为敏感 ;凉血清营颗粒能明显抑制内毒素所致家兔发热 ,其对小鼠的泻下作用呈明显的个体差异 ,凉血清营颗粒还能明显抑制化合物 48/80所小鼠抓搔反应。结论 :凉血清营颗粒有明显抗菌、解热、泻下和止痒作用。

凉血活血颗粒防治放射性肺损伤疗效动态观察

目的动态观察凉血活血颗粒对小鼠放射性肺损伤模型的防治作用。方法采用5.5 Gy60Coγ射线一次性全身照射小鼠,制成放射性肺损伤动物模型。照后第2日起至照后第30日连续灌胃给药,正常组和模型组用等体积蒸馏水灌胃,均为每日1次。照后第29日,记录小鼠爬杆和爬网时间。照后第30日,采用肾上腺素实验观察小鼠外周血象。结果与模型组比较,凉血活血颗粒中、低剂量组小鼠爬杆、爬网平均时间和动态血常规中白细胞、淋巴细胞均显著升高。结论凉血活血颗粒对放射性肺损伤动态指标有较好的改善作用。

凉血活血颗粒对小鼠辐射损伤的防治作用

目的观察凉血活血颗粒对辐射损伤小鼠模型的防治作用。方法雄性BALB/c小鼠50只,随机分为即正常组、模型组、凉血活血颗粒高、中、低剂量组,每组10只,采用6.0 Gy 60Coγ放射源照射除正常组外的动物,建立辐射损伤动物模型。照前45 min至照后10 d,凉血活血颗粒高、中、低剂量组小鼠分别给予4、2、1 g/kg灌胃,正常组及模型组用等体积蒸馏水灌胃,均为每日1次。观察照后小鼠的一般情况,照后10 d检测血常规、骨髓DNA、骨髓有核细胞、胸腺指数、肺脏指数。结果 与正常组比较,模型组小鼠接受6.0 Gy 60Coγ射线照射后10 d外周血白细胞、红细胞、血小板数量,骨髓DNA、骨髓有核细胞计数、胸腺指数显著降低,肺脏指数显著增高。与模型组比较,凉血活血颗粒高剂量组能升高外周血白细胞、血小板、骨髓DNA、骨髓有核细胞的数量,提高胸腺指数,降低肺脏指数。结论凉血活血颗粒对小鼠辐射损伤具有良好的防治作用。

凉血清营颗粒对炎症及迟发型超敏反应的影响

目的 :研究凉血清营颗粒对炎症及迟发型超敏反应的影响。方法 :用新鲜鸡蛋清所致大鼠足爪水肿及羧甲基纤维素(CMC)所致大鼠背囊内白细胞聚集为抗炎模型 ;用 2 ,4,6 三硝基氯苯 (PC)及绵羊红血球 (SRBC)引致小鼠耳部或小鼠爪肿胀为迟发型超敏反应模型。结果 :凉血清营颗粒能明显抑制大鼠蛋清性足肿及CMC囊内白细胞聚集 ,还能显著抑制PC及SRBC所致小鼠迟发型超敏反应。结论 :凉血清营颗粒具有明显的抗炎及抗迟发型超敏反应作用。

凉血祛风颗粒治疗风热血热型儿童变应性鼻炎的临床疗效观察

目的:观察凉血祛风颗粒对风热血热型儿童变应性鼻炎的临床疗效。方法:将符合纳入标准的108例风热血热型变应性鼻炎患儿作为研究对象,并随机分为治疗组56例和对照组52例。治疗组口服凉血祛风颗粒,对照组口服盐酸西替利嗪糖浆,分别观察两组患儿在服药前24 h与服药后30 min、3 d、14 d的临床疗效。结果:治疗前后治疗组有效率、临床症状评分及中医证候积分(P<0.01)均优于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:凉血祛风颗粒能够显著缓解变应性鼻炎患儿的喷嚏、鼻痒等症状,值得临床推广。

高效液相色谱法测定凉血祛风颗粒中牛蒡子苷含量

目的建立测定凉血祛风颗粒中牛蒡子苷含量的高效液相色谱法。方法采用Lichrosper C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(25∶75)为流动相,检测波长为280 nm。结果牛蒡子苷进样量在0.171 2～1.027 2μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.29%,RSD=2.60%(n=6)。结论该方法专属性强、灵敏度高、重现性好、操作简便,可作为凉血祛风颗粒中牛蒡子苷含量的测定方法。