电针对创伤应激大鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的:观察创伤应激及电针对大鼠胸腺细胞增殖功能及细胞凋亡的影响。方法:Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、创伤应激组、创伤应激加电针组。建立创伤应激大鼠模型。电针选用的穴位为“足三里”和“阑尾”两穴。用MTT法检测胸腺细胞增殖功能,用TdT介导的脱氧尿嘧啶末端缺口标记法(TUNEL)检测胸腺细胞凋亡情况。结果:创伤应激能导致大鼠胸腺细胞发生凋亡,同时伴有胸腺细胞增殖能力的降低;电针能减少由于创伤应激诱导的胸腺细胞凋亡并改善胸腺增殖能力。结论:电针可通过抑制创伤应激诱导的胸腺细胞凋亡,起到改善应激后细胞免疫功能紊乱的作用。

木贼有效部位提取物对氧化低密度脂蛋白致内皮细胞凋亡的干预

目的提取木贼有效成分,并观察其对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后细胞增殖与凋亡的影响。方法采用乙醇回流提取,大孔树脂分离纯化出有效成分,紫外分光光度计测定提取物中槲皮素与阿魏酸的含量;60μg/ml的ox-LDL刺激培养的HU-VEC株;扫描电镜观察细胞形态变化;流式细胞仪测定细胞周期、增殖指数及凋亡率。结果木贼有效成分槲皮素与阿魏酸的平均含量分别为1.69mg/g,1.23mg/g,纯度达到63.28%;木贼有效成分干预组细胞增殖指数增高、凋亡率明显下降(P<0.05)。结论所得木贼提取物达到有效标准,并能有效降低ox-LDL致内皮细胞凋亡率,明显改善内皮细胞增殖周期时相。

孕期乙醇暴露所致的胎鼠海马神经毒性作用及其对神经元结构和相关功能的影响

目的研究孕期乙醇暴露对胎鼠海马神经元结构与相关功能的影响,并探讨其可能的发生机制。方法将体重为250~300 g的Wistar大鼠,以雌∶雄=2∶1合笼,雌鼠受孕后随机分为对照组、地塞米松组和乙醇组。孕9 d起,地塞米松组以1 mg/(kg·d)地塞米松皮下注射,乙醇组以4 g/(kg·d)乙醇灌胃,对照组给予等体积蒸馏水,连续给药至受孕20 d。孕鼠于受孕20 d经异氟醚麻醉后,剖宫取出胎鼠,选取胎鼠数量在8~14只的母鼠,胎鼠断头取血,并分离胎海马组织,实时定量PCR技术检测海马相关功能的基因表达。各组取胎鼠全脑常规固定、制片,并行病理组织学(HE染色)和细胞超微结构观察。结果 HE染色显示,孕期地塞米松和乙醇暴露的胎鼠海马神经元排列整齐、规则,与对照组比较无明显改变;电镜结果显示,与对照组相比,地塞米松组和乙醇组出现内质网扩张,高尔基体肥大。孕期地塞米松暴露后,雄性胎鼠胰岛素样生长因子(IGF)-1、IGF-1R、AKT2、Bcl-2及Caspase-8、SNAP25、NR2B和GLUR1、11β-HSD-1和MR的mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01),Bax、Cdc42、NR1和GLUR2、PKACa、11β-HSD-2和BDNF的mRNA表达显著下降(P<0.01),Bax/Bcl-2比值显著降低(P<0.01),Cyclin A、Rac、Rho A、NR2A、GLUR3和Syn1、GR、Egr-1及5HTr7表达无显著改变。孕期乙醇暴露后,IGF-1、IGF-1R、AKT2、CDK2、Bcl-2、Caspase-8、Rac、NR1、NR2A、NR2B、Syn1、SNAP25、HCN1和HCN2、GR、MR、5HTr7及Egr-1的mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01),Cyclin A、Bax、Caspase 3、Cdc42、GLUR2和GLUR3、PKACa及BDNF的mRNA表达显著降低(P<0.01),Bax/Bcl-2比值显著降低(P<0.01),Rho A和GLUR1、11β-HSD-1的mRNA表达差异无统计学意义。结论孕期乙醇暴露在一定程度上不仅影响了胎鼠海马神经结构,而且海马神经元增殖与凋亡、学习与记忆、GC代谢与营养发育等相关功能发生了变化,并出现细胞的增殖和代谢升高的趋势,表明海马损伤的同时出现了一定的代偿作用。乙醇所致的胎鼠海马结构和相关功能改变可能与c AMP/Egr-1/GR/BDNF通路改变有关。

RTX诱导神经管畸形动物模型的建立及机制研究

目的 :通过胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)特异性抑制剂———雷替曲塞(RTX)干预孕鼠,建立小鼠神经管畸形(neural tube defects,NTDs)模型,探讨细胞凋亡和增殖、DNA损伤在RTX诱导的NTDs发生中的作用。方法:将孕7.5 d C57BL/6J小鼠随机分为6组:1组为对照组,5组为RTX干预组。对照组腹腔注射0.9%Na Cl,RTX干预组分别腹腔注射不同剂量的RTX(5.0、10.0、11.5、13.5、15.0 mg/kg),孕11.5 d取胚胎并观察其发育情况。苏木精-伊红(HE)染色观察神经管闭合情况,放射性法测定TS活性,高效液相色谱检测胸苷酸(d TMP)及尿苷酸(d UMP)含量,Western blot分析复制蛋白A2(RPA2)、γ-H2AX和caspase-3表达,免疫组化检测细胞增殖。结果:RTX注射剂量为11.5 mg/kg时,NTDs发生率最高(30.56%);RTX干预后,TS活性较对照组显著降低,dUMP含量显著升高,dTMP含量显著下降;RTX建立的NTDs模型中,RPA2和γ-H2AX磷酸化水平显著升高;caspase-3表达量显著增加,细胞增殖显著减少。结论:通过RTX干预孕鼠可建立小鼠NTDs模型,dTMP合成障碍导致DNA损伤、细胞凋亡与增殖失调可能是NTDs发生的重要机制。

甘草查尔酮A抗肿瘤作用研究进展

甘草查尔酮A是从甘草根中提取出来的黄酮类化合物,具有多种药理学活性,目前最受关注的是其抗肿瘤活性,本文将对近年来国内外关于甘草查尔酮A抗肿瘤活性及其机制的研究进展进行综述。

化痰散结中药治疗甲状腺肿的作用机制

目的:通过甲状腺增殖与凋亡平衡调节机制和生长因子的表达,探讨化痰散结中药治疗碘缺乏致甲状腺肿的作用机制。方法:选4周龄180只Wistar大鼠,制成碘缺乏甲状腺肿模型。造模后随机分成正常对照组,模型对照组,高碘组,化痰散结复方组,优甲乐组以及化痰散结复方加优甲乐组。在给处理因素的21,77 d每组分别处死15只鼠,收集标本待用。给药量按体表面积换算,并根据大鼠体重的变化,调整剂量。TT3,TT4,TSH测定采用免疫放射法。Fas,FasL,PCNA蛋白表达用免疫组化法测定。结果:与正常组和模型组比较,化痰散结组和化痰散结加优甲乐组Fas及FasL均明显升高。优甲乐组较化痰散结和化痰散结加优甲乐组甲状腺Fas表达明显减低。与正常组比较,化痰散结组和化痰散结加优甲乐组PCNA的表达均显著降低。与模型组比较,高碘组、化痰散结组和化痰散结加优甲乐组PCNA的表达都明显降低。与正常组比较,治疗后高碘组VEGF表达明显升高。与高碘组比较,化痰散结组和优甲乐组的VEGF表达均有明显减低。与正常组比较,模型组和化痰散结组TGF-β1表达均有明显增高。与模型组比较,高碘组TGF-β1的表达有明显减低。与化痰散结组比较,化痰散结加优甲乐组TGF-β1的表达明显减低。结论:化痰散结中药通过促进甲状腺细胞凋亡,抑制其增殖,抑制生长因子VEGF的表达、增强TGF-β生长因子的表达作用可使甲状腺肿恢复完全,并未造成甲状腺细胞损伤。

苗药组方熏洗对家兔早期膝骨关节炎模型软骨细胞Bax、Bcl-2影响的实验研究

目的:探讨苗药熏洗疗法对家兔早期膝骨关节炎模型软骨细胞凋亡与增殖的作用及机制。方法:采用兔膝关节腔内注射木瓜蛋白酶制造膝骨关节炎(KOA)模型,经苗药熏洗治疗20d后,肉眼、光镜下观察软骨组织的病理改变,并用Mankin法进行评分;免疫组织化学法检测膝关节软骨Bax、Bcl-2水平。结果:肉眼观察模型组可见到关节软骨表面的改变;光镜下观察苗药熏洗能显著抑制软骨的炎症,减轻软骨病理改变;促进关节软骨Bcl-2表达,抑制关节软骨Bax表达。结论:苗药熏洗疗法可以抑制膝骨关节炎软骨细胞的凋亡,改善软骨的病变;其作用途径可能和抑制软骨炎症、促进Bcl-2水平的表达、抑制Bax水平的表达有关。

腰痛舒胶囊对骨关节炎模型鼠中p53、bcl-2、PCNA、TGF-β_1的影响

目的观察腰痛舒胶囊对骨关节炎模型中p53、bcl-2、增殖细胞核抗原(PCNA)、转移生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法采用免疫组化染色,在光镜下观察p53、bcl-2、PCNA、TGF-β1的表达。结果正常组大多数标本未见p53与bcl-2的表达,造模后在软骨移行层见到散在的p53与bcl-2的表达,用腰痛舒后bcl-2的表达有逐渐增强、p53的表达有逐渐减弱的趋势;正常组有少量PCNA阳性细胞的表达,造模组PCNA在滑膜表达明显,腰痛舒中、高剂量组在滑膜中的表达率较造模组下降,但在表浅层的表达率较造模组升高,TGF-β1表达在正常组有少量表达,造模后明显增加,腰痛舒高、中剂量组在滑膜中的表达减少。结论腰痛舒胶囊通过调节软骨bcl-2、p53以及软骨面、滑膜的PCNA和TGF-β1的表达,来延缓软骨细胞的凋亡,抑制滑膜的增殖。