四妙散对肩周炎患者成纤维细胞样滑膜细胞形态学的影响及促凋亡机制研究

目的:探究四妙散对肩周炎患者成纤维细胞样滑膜细胞(Fibroblast-like Synoviocytes,FLS)形态学的影响及促凋亡机制。方法:取不同浓度的四妙散溶液(10、20、40μg/mL)刺激FLS细胞,设置0μg/mL的空白对照组,各组培养24、48、72 h,采用四甲基偶氮唑蓝法检测各组刺激后的FLS细胞变化情况,评估四妙散溶液对细胞增殖的抑制作用,采用倒置显微镜观察培养48 h各组细胞的形态学变化情况,采用4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-Diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色法观察各组FLS细胞凋亡情况,并采用Western blot检测各组促凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因相关X蛋白(B-cell lymphoma-2-Associated X protein,Bax)、抗凋亡蛋白髓细胞白血病因子(Myeloid Cell Leukemia 1,Mcl-1)的表达情况。结果:四妙散溶液在10~40μg/mL的浓度范围内可有效降低FLS细胞的存活率,且呈现时间和浓度依赖性(P<0.05);倒置显微镜下观察可见空白对照组的FLS细胞生长状态良好,随着四妙散溶液浓度的增加,细胞表面有棕褐色絮状物质形成,细胞增殖受到抑制,细胞密度随四妙散溶液浓度上升而降低(P<0.05);DAPI染色下空白对照组细胞核均匀淡染,胞膜完整,随着四妙散溶液浓度增加细胞膜通透性增加,细胞核固缩形态增加且有细胞核碎裂;随着四妙散溶液浓度的增加,Bax水平上调,Mcl-1水平下降,均呈现出浓度依赖性(P<0.05)。结论:四妙散溶液能够显著降低肩周炎患者FLS细胞的存活率,有一定的时间和浓度依赖性,作用机制可能是通过调节促凋亡蛋白Bax、抗凋亡蛋白Mcl-1的表达来实现的。

马立克氏病病毒人工感染鸡细胞凋亡病变及凋亡机制研究

通过光镜、电镜观察以及免疫组织化学方法对马立克氏病病毒人工感染鸡的多种组织的实质细胞进行了细胞凋亡病变及凋亡机制研究。结果表明,马立克氏病病鸡肝、肾、心、脾、腺胃、卵巢、羽髓等组织、器官的实质细胞均出现明显的细胞凋亡病变。光镜观察,可见肝细胞、肾小管上皮细胞、腺胃腺上皮细胞、心肌纤维、脾脏内的淋巴细胞、卵巢内的颗粒膜细胞、羽髓细胞的细胞核裂解成大小不等的、致密浓染的球形团块。电镜观察,可见这些细胞的细胞核染色质经历凝集、边集、裂解,最后形成许多凋亡小体等不同阶段。免疫组化研究结果显示,上述细胞均有明显的FasL表达,FasL的表达表明细胞凋亡信号增强,细胞凋亡发生。

中药诱导卵巢癌细胞凋亡机制及研究进展

卵巢癌是女性生殖器官常见的肿瘤之一,发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而列居第三位。但卵巢癌病死率却占各类妇科肿瘤的首位,严重威胁着女性的健康和生命安全。

中药有效成分影响宫颈癌Hela细胞凋亡机制的研究进展

目的随着宫颈癌发病率的逐年上升,中药在治疗宫颈癌放化疗副反应及术后并发症中的作用逐渐被重视。大量研究发现诱导宫颈癌Hela细胞凋亡可以通过影响Bcl-2基因家族、Caspase蛋白酶家族、Fas/Fasl基因系统、某些相关基因的表达等方式来实现。文章从目前国内外研究比较热门的一些中药入手,综述这些中药的有效成分在宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用。例如文中提到中药温莪术有效成分β-榄香烯是通过下调Bcl-2基因表达来促进Hela凋亡;栝楼根的有效活性成分天花粉蛋白促凋亡过程与Caspase家族有关;薏苡仁酯诱导Fas表达上调、Fasl表达下调来促进宫颈癌Hela细胞凋亡。研究中药有效成分影响宫颈癌Hela细胞凋亡机制的目的是为临床应用中药治疗宫颈癌提供科学依据和筛选抗宫颈癌新药提供思路。

脑出血后继发性脑损伤的细胞凋亡机制研究进展

近年来研究表明，脑出血（intracerebral hemorrhage，ICH）后脑损伤不仅是由于血肿的占位效应及血肿对周围脑组织的直接破坏，继发性脑损伤也是出血后脑损伤的主要原因。细胞凋亡在脑出血后继发性脑损伤中起着重要作用。本文主要就脑出血后继发性脑损伤细胞凋亡机制的研究进展作一综述。

骨关节炎的软骨细胞凋亡机制

骨关节炎（osteoarthritis,OA）是一种退行性关节病,常见于老年人。目前ΟΑ的具体发病机制尚不明确,当骨关节软骨基质降解后,会导致骨钙质出现沉积现象;骨关节中凋亡的软骨细胞,未能全部清除,遗留在软骨中,对软骨细胞功能造成严重影响;在骨关节中的软骨细胞处于凋亡时期,若其基质合成较低,将导致ΟΑ的发生[1],故阐明软骨细胞凋亡的机制很有意义。本文将着重从信号通路、细胞因子、基因三方面对OA软骨细胞凋亡机制作一综述。

余甘子叶化学成分没食子酸诱导人肝癌细胞株BEL-7404凋亡机制的研究

目的:探讨余甘子叶化学成分没食子酸诱导人肝癌细胞株BEL-7404产生凋亡的机制。方法:采用PI和Hoechst33342双染色法流式检测对人肝癌细胞株BEL-7404各周期的影响;细胞荧光免疫染色法和Western blot法检测Bax和Bcl-2蛋白表达的变化。结果:PI和Hoechst33342双染色法分析结果表明,余甘子叶化学成分没食子酸作用BEL-7404细胞72 h后,G2/M期细胞数增多,呈现细胞阻滞现象,并伴有大量的细胞凋亡。荧光免疫染色显示,药物作用人肝癌细胞株BEL-7404 72 h后Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达则降低。Western blot法实验亦显示Bax蛋白表达升高。结论:余甘子叶化学成分没食子酸能阻滞G2/M期细胞,并通过上调Bax和下调Bcl-2蛋白表达,导致线粒体膜电位的下降,进而激活Caspase,最终导致细胞死亡,可能是其诱导人肝癌细胞株BEL-7404凋亡的分子机制之一。

罗布麻总黄酮通过PI3K/Akt/GSK3β抑制H_2O_2诱导的EA.hy926凋亡机制研究

心血管疾病严重危害人类健康,其致病机制主要是氧化应激诱导的内皮细胞凋亡,保护内皮细胞免受氧化应激损伤是防治心血管疾病的关键。为了探讨罗布麻总黄酮(total flavonoids of Folium Apocyni Veneti,TFF)抑制过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)诱导的EA.hy926细胞凋亡的机制,采用不同浓度TFF处理EA.hy926细胞,一定浓度的H_2O_2造模,通过MTT法、Hoechst33342/PI荧光双染、流式细胞术检测各组的细胞凋亡情况,并用Western-blot和荧光定量PCR检测相关蛋白及m RNA的表达水平。研究发现,H_2O_2能明显诱导EA.hy926细胞凋亡,而TFF可降低H_2O_2引起的内皮细胞凋亡,表现为凋亡率降低、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)增加、裂解的半胱天冬酶-3,-9(cleaved caspase-3,-9)表达减少、髓细胞白血病因子-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)表达增加、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3β(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B/glycogen synthase kinase-3β,PI3K/Akt/GSK3β)通路中Akt、GSK3β蛋白的磷酸化水平升高。上述结果表明,TFF主要是通过激活PI3K/Akt/GSK3β通路,调节Mcl-1的表达,保护MMP,进而抑制caspase蛋白的剪切活化,抑制H_2O_2诱导的EA.hy926凋亡。

穿孔素介导的细胞凋亡机制

穿孔素(PFP)是一种存在于细胞毒性T细胞和自然杀伤细胞胞浆的细胞毒颗粒中的糖蛋白,通过与颗粒酶的协同作用,介导靶细胞的凋亡。这种由穿孔素介导的细胞凋亡机制在抗感染免疫等方面具有非常重要的作用。论文就穿孔素的分子生物学特性、穿孔素介导的细胞凋亡机制及其在抗感染免疫中的作用等方面的研究进展做一综述。

急性脑损伤后神经细胞凋亡机制的研究进展

1972年，Kerr等根据细胞的超微结构特征把细胞死亡分为坏死和凋亡2种方式。1973年，Schweichel等在此基础上又将溶酶体的作用纳入其中，把细胞死亡分为3种类型。然而早期对神经细胞凋亡的研究大多集中在神经元正常发育过程中，或者是神经细胞的慢性变性的病变中，而对颅脑急性损伤中细胞凋亡的研究较少。

Akt抗凋亡机制与癌症治疗

细胞凋亡与抗凋亡的调节异常与许多疾病特别是癌症的发生、发展相关。PI 3K/Akt信号转导通路在抗凋亡机制中发挥了重要作用。蛋白激酶B(Akt)是一种丝氨酸 /苏氨酸蛋白激酶 ,当Akt磷酸化下游靶点后 ,可阻碍细胞凋亡。最近 ,Akt抗凋亡机制的研究取得了极大的进展。随着研究的不断深入 ,尤其是更多Akt底物及抑制剂的不断发现 ,必将对多种癌症的治疗及药物筛选产生积极的影响。

TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡机制研究进展

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)与死亡受体结合后 ,可启动凋亡信号转导。在产生一系列凋亡分子的同时 ,胞内抗凋亡分子也被诱导产生 ,但单一因素在TRAIL凋亡信号调控网络中并不起决定作用 ,而是多因素制衡的一个动态过程决定细胞生死。了解TRAIL通路的精确调控机制及肿瘤的遗传背景 ,对于研究TRAIL在肿瘤治疗中的应用具有决定性作用。现综述近年来TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡胞内机制的研究进展。

2-甲氧基雌二醇诱导肿瘤细胞凋亡机制研究进展

细胞凋亡是维持所有多细胞机体中内稳态平衡以及机体发育必不可少的受到严密调控的过程。细胞生长因子的撤退、细胞周期进程的异常、细胞DNA的损伤以及死亡受体配体的相互作用等都可启动这一细胞凋亡的级联反应[1]。

促炎性细胞因子诱导NF-κB激活促进神经细胞凋亡机制

目的:探讨细胞凋亡机制中核转录因子κB(NF-κB)的激活及信号转导机制. 方法:用IL-1β,TNFα处理大鼠皮层培养的神经细胞,采用四唑盐比色法(MTT),乳酸脱氢酶释放率及免疫荧光方法反映细胞生存力和损伤指标,western blot分析检测NF-κB,JNK,ERK,Hsp27蛋白的表达水平.

高剂量五五丹外用对大鼠肾毒性凋亡机制研究

目的通过高剂量五五丹长期应用于大鼠皮肤后对肾脏的毒性作用及诱导凋亡研究,考察其毒理学意义以及其对毒性凋亡机制的影响。方法通过TUNEL法、免疫组织化学法等定性检测细胞凋亡以及细胞凋亡过程中Bax/Bcl-2凋亡相关蛋白表达变化。结果五五丹的肾毒性与用药剂量和时间具有一定的关系;肾组织凋亡以及Bax、Bcl-2凋亡相关蛋白表达水平均具有一定的剂量-效应及时间-效应关系,2～3周时达高峰,停药后,凋亡程度明显减轻。结论五五丹可通过调控Bax及Bcl-2凋亡相关蛋白表达水平引起肾脏细胞凋亡,效应具有一定的剂量-效应及时间-效应关系,2～3周时达高峰,具有一定的可逆性。提示机体对五五丹具有一定的适应能力,可通过调节其相关代谢或增强其损伤修复功能从而使其毒性降低。

TRAIL联合顺铂诱导卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP凋亡机制的研究

目的:研究TRAIL联合顺铂对卵巢癌耐药细胞COC1/DDP生长的影响,以及联合用药对TRAIL死亡受体(DR4、DR5)、凋亡相关基因Smac、Survivin表达的影响,揭示TRAIL联合顺铂可能逆转COC1/DDP细胞耐药性的机制。方法:采用MTT法检测不同浓度TRAIL蛋白与DDP联合用药对COC1/DDP细胞生长的影响,用Annexin V-FITC法检测COC1/DDP细胞凋亡,用RT-PCR方法检测DDP对TRAIL受体(DR4、DR5)、凋亡相关基因Smac、Survivin表达。结果:TRAIL蛋白对COC1/DDP细胞生长有抑制作用,DDP与TRAIL蛋白联合作用后细胞生长抑制率显著升高(P<0.05)。DDP使COC1/DDP细胞的DR5表达水平显著增强,为正常对照组的3.45倍(P<0.001);Smac表达为对照组的2.82倍(P<0.001);DR4水平无明显变化;Survivin表达较对照组显著减少(P<0.001)。结论:TRAIL蛋白对COC1/DDP细胞生长有抑制作用,DDP与TRAIL联合增强了对COC1/DDP细胞生长抑制;TRAIL逆转COC1/DDP细胞对DDP的耐药性可能与DDP导致TRAIL受体DR5水平升高、Smac表达增加,通过线粒体途径促进了肿瘤细胞的凋亡有关。

血管平滑肌细胞凋亡机制的研究进展

血管平滑肌细胞凋亡与很多心血管疾病的发生、发展密切相关,目前已经成为心血管疾病防治研究的热点。现对血管平滑肌细胞凋亡机制的研究现状进行了较为深入的探讨,从其诱导因素以及基因调控机制等角度综述了近年来国内外在这方面的研究进展。