电针对完全性脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠脊髓组织中Caspase-9、细胞色素C及凋亡蛋白酶激活因子-1表达的影响

目的观察电针对完全性脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠膀胱功能及脊髓组织中Caspase-9、细胞色素C(Cyt-C)及凋亡蛋白酶激活因子-1(Apaf-1)表达的影响。方法雌性Sprague-Dawley大鼠60只,随机抽取36只,采用改良T_(10)脊髓横断法制作完全性脊髓损伤后神经源性膀胱模型,取24只成功模型分为模型组和电针组各12只,其余未造模大鼠24只随机分为假手术组和空白组各12只。于造模后第19天取次髎、中极、三阴交、大椎行电针,连续7 d后行尿流动力学检测,TUNEL法测定细胞凋亡率,Western blotting测定脊髓组织中Caspase-9、Cyt-C和Apaf-1蛋白的表达情况。结果与空白组和假手术组比较,模型组和电针组膀胱最大容量及膀胱顺应性均明显降低(P<0.01),膀胱基础压力和漏尿点压力增加(P<0.05);脊髓组织TUNEL阳性率显著升高(P<0.001);脊髓组织中Caspase-9、Cyt-C和Apaf-1蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组比较,电针组的膀胱最大容量及膀胱顺应性明显增加(P<0.01),膀胱基础压力和漏尿点压力降低(P<0.05);脊髓组织TUNEL阳性率明显降低(P<0.01);脊髓组织中Caspase-9、Cyt-C及Apaf-1蛋白表达量降低(P<0.05)。结论电针次髎、中极、三阴交、大椎可改善完全性脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠膀胱功能,其作用机制可能与脊髓组织中Caspase-9、Cyt-C和Apaf-1的表达下调,凋亡减少有关。

表达谱基因芯片技术研究膦甲酸钠上调细胞凋亡蛋白酶激活因子-1基因的表达

目的:了解膦甲酸钠(PFA)与细胞凋亡蛋白酶激活因子-1(APAF-1)基因启动子的关系,为PFA的作用机制提供理论依据。方法:应用基因表达谱芯片技术对于膦甲酸钠刺激Jurkat细胞之后的基因表达谱进行研究。聚合酶链反应(PCR)扩增APAF-1基因启动子,命名为APAF-P。以T-A克隆法,将APAF-P基因片段连入栽体pGEM-T。将获得的质粒pT-APAF-P,与报告质粒pCAT3-basic分别用KpnⅠ和NheⅠ双酶切后构建APAF-1启动子报告基因表达载体pCAT3-APAF-P,以重组表达质粒pCAT3-APAF-P瞬时转染Jurkat细胞,以转染pCAT3 basic的Jurkat细胞为阴性对照,PFA刺激后24小时收获细胞。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性。结果:表达谱基因芯片研究结果表明,PFA可上调APAF-1基因表达水平达2.815倍。构建的报告载体pCAT3-APAF-P经过序列分析和酶切鉴定正确。pCAT3-APAF-P和PFA瞬时转染的Jurkat细胞的CAT表达活性是CAT3空载体的4.9倍,pCAT3-Weep的2.9倍。结论:PFA可以上调APAF-1启动子的活性,进而上调APAE-1基因的表达。为深入了解PFA的免疫调节作用及其在病毒的清除过程中的作用机制提供新的理论依据。

毛蕊异黄酮通过调控细胞色素C/凋亡酶激活因子1凋亡信号通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤

目的探讨毛蕊异黄酮对脑缺血/再灌注损伤的影响及其作用机制。方法将SPF级雄性SD大鼠40只随机分为假手术组(sham)、模型组(model)、毛蕊异黄酮组(calycosin,20 mg/kg)和尼莫地平组(nimodipine,0.7 mg/kg,阳性对照药组),采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型,在体模拟脑缺血/再灌注损伤环境。Zea Longa评分法检测脑缺血/再灌注大鼠神经功能缺损情况;盐酸2,3,5-三苯基四氮(TTC)染色检测脑梗死体积;HE染色检测神经细胞病理形态学改变;尼氏染色观察尼氏小体变化;TUNEL染色检测神经细胞凋亡情况;Western blotting检测凋亡关键蛋白细胞色素C(Cyt C)、凋亡酶激活因子1(Apaf-1)、Caspase-9和Caspase-3的表达。结果与sham组相比,model组神经功能缺损症状明显(P<0.05),脑梗死体积明显增大(P<0.05),倒置光学显微镜下观察发现神经细胞出现胞体收缩,胞核深染、固缩,细胞生长状态较差,尼氏小体明显减少或消失(P<0.05),凋亡神经细胞明显增多(P<0.05),凋亡关键蛋白Cyt C、Apaf-1、Caspase-9和Caspase-3表达均明显升高(P<0.05);与model组相比,calycosin组和nimodipine组大鼠神经功能缺损症状明显减轻(P<0.05),脑梗死体积明显缩小(P<0.05),光学显微镜下观察发现,神经细胞损伤明显减轻,尼氏小体表达明显增多(P<0.05),凋亡神经细胞明显减少(P<0.05),凋亡关键蛋白Cyt C、Apaf-1、Caspase-9和Caspase-3的表达明显降低(P<0.05)。结论毛蕊异黄酮可明显抑制神经细胞凋亡,减轻脑缺血/再灌注损伤,其作用机制与毛蕊异黄酮有效调控Cyt C/Apaf-1凋亡信号通路相关。

紫杉醇联合顺铂治疗蒽环类耐药乳腺癌的疗效及对血清凋亡蛋白酶激活因子-1和增殖细胞核抗原水平的影响

目的探讨紫杉醇联合顺铂治疗蒽环类耐药乳腺癌的疗效,以及对血清凋亡蛋白酶激活因子(Apaf-1)、增殖细胞核抗原(Ki-67)水平的影响。方法选择北京朝阳医院2016年6月至2019年6月收治的紫杉醇+顺铂治疗的蒽环类耐药乳腺癌患者(研究组,42例)和接受长春瑞滨治疗的蒽环类耐药乳腺癌患者(对照组,42例),3周为1个周期,连续用药2个周期。结果研究组患者治疗有效率为59.52%,显著高于对照组的35.71%(P<0.05);研究组患者生活质量改善率为66.67%,显著优于对照组的42.86%(P<0.05);治疗后,两组患者的Apaf-1水平均较治疗前显著上升,而Ki-67下降(P<0.05),且研究组上述指标与同期对照组相比差异显著(P<0.05);治疗期间,两组患者白细胞和血小板减少、恶心呕吐、贫血、脱发等发生率无显著差异(P>0.05),静脉炎和肌肉关节疼痛发生率差异显著(P<0.05)。结论紫杉醇联用顺铂治疗蒽环类耐药乳腺癌疗效显著,可改善患者的生活质量,且不良反应可耐受。

术前血清凋亡蛋白酶激活因子-1、组织多肽特异性抗原水平与乳腺癌患者临床病理特征和预后的相关性分析

目的分析术前血清凋亡蛋白酶激活因子-1(apoptosis protease activating factor-1,Apaf-1)、组织多肽特异性抗原(tissue polypeptide specific antigen,TPS)水平与乳腺癌患者临床病理特征和预后的相关性。方法选择2014年7月至2016年6月重庆大学附属肿瘤医院收治的126例乳腺癌患者纳入乳腺癌组,另选取该院同期收治的80例良性乳腺肿瘤患者和120例乳腺增生患者分别纳入良性乳腺肿瘤组和乳腺增生组,采集三组患者术前外周静脉血,检测血清Apaf-1和TPS水平,并分析术前血清Apaf-1和TPS水平与乳腺癌患者临床病理特征的关系。乳腺癌患者术后均获得随访,统计其术后3年无瘤生存率,分析术前血清Apaf-1、TPS水平与乳腺癌患者预后的相关性。结果乳腺癌组患者术前血清Apaf-1水平均显著低于良性乳腺肿瘤组和乳腺增生组(均P<0.05),TPS水平均显著高于良性乳腺肿瘤组和乳腺增生组(均P<0.05)。术前血清Apaf-1、TPS水平与乳腺癌患者的月经状态、组织学分级、淋巴结转移数量均无相关性(均P>0.05),与肿瘤直径、腋窝淋巴结性质、临床分期、雌激素受体状态、孕激素受体状态、人表皮生长因子受体-2状态均有相关性(均P<0.05)。随访至2019年8月,126例乳腺癌患者术后3年无瘤生存率为75.40%(95/126);术前血清Apaf-1和TPS均为阳性的乳腺癌患者无瘤生存率均显著低于术前血清Apaf-1和TPS均为阴性患者(均P<0.05)。结论乳腺癌患者术前血清Apaf-1和TPS水平与其临床病理特征和预后均存在相关性,可作为评估病情和预后的指标。

细胞凋亡机制的研究进展

以线虫和哺乳动物为实验材料 ,综述近年来对细胞凋亡机制的研究进展。

Nodosin通过Apaf-1和caspase-3诱导HepG2细胞凋亡

目的:研究传统中药提取物nodosin对人肝细胞癌Hep G2细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:将nodosin设置为1. 25μmol/L、2. 5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L不同浓度组,作用于Hep G2细胞24 h后,用Hoechst 33258染色和电镜观察不同浓度的药物对细胞形态学的影响,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用RT-qPCR检测凋亡蛋白酶激活因子1 (Apaf-1) mRNA的表达,用Western blot检测caspase-3及其前体和活化体的蛋白水平。结果:形态学结果显示,随着用药剂量的增加,细胞皱缩和细胞核偏移越明显,凋亡小体在5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L剂量组明显增多。Apaf-1 mRNA的表达增加,caspase-3及其前体的表达和cleaved caspase-3的蛋白水平随着用药剂量的增加逐渐增加(P <0. 01)。结论:Nodosin能够诱导Hep G2细胞凋亡。该作用可能是通过增加Apaf-1 mRNA的表达继之激活caspase-3实现的。

凋亡体与细胞凋亡

由细胞色素C(Cytochrome c,Cyt c)、ATP/dATP、凋亡酶激活因子-1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)以及procaspase-9(caspase-9的前体)构成的约700 kDa、具有很强的caspase酶激活活性的大分子蛋白复合物——凋亡体(apoptosome),在哺乳动物线粒体凋亡途径和胚胎发育中至关重要。描述了凋亡体上各因子的结构、功能及其相互关系,线粒体介导的凋亡通路中凋亡体的形成及其调控。

双氢青蒿素诱导人前列腺癌细胞系PC-3凋亡

目的探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人前列腺癌细胞系PC-3的凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法人前列腺癌PC-3细胞经不同浓度(0、25、50和100μmol/L)DHA处理48 h,用FCM法检测各组细胞凋亡率。用荧光定量PCR检测细胞中HSP70 mRNA的表达。用蛋白质印迹法检测细胞中HSP70蛋白、凋亡酶激活因子(Apaf-1)及caspase-3的表达;荧光定量PCR及蛋白质印迹法增加两组,即100μmol/L HSP70抑制剂槲皮素(quercetin)作为阳性药物对照组,以DMSO作为溶剂对照组。结果 DHA能明显诱导PC-3细胞凋亡(P<0.05)。不同浓度DHA能明显下调HSP70 mRNA及蛋白表达水平(P<0.05),上调Apaf-1及caspase-3蛋白表达水平(P<0.05)。结论双氢青蒿素能诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡,其作用机制可能是DHA干扰HSP70的表达,促进caspase信号通路中Apaf-1及caspase-3表达。

凋亡蛋白酶激活因子1基因敲除HEK293细胞系的构建及其对重组蛋白表达的影响

目的 构建凋亡蛋白酶激活因子1(apoptotic protease activating factor 1,Apaf1)基因敲除的HEK293细胞系,并检测其对细胞中重组蛋白表达的影响,以期为进一步探索Apaf1基因的功能和作用机制提供有效的细胞模型。方法采用规律成簇的间隔短回文重复序列系统(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/CRISPR-associated systems,CRISPR/Cas)基因编辑系统构建Apaf1基因敲除的重组质粒,在脂质体的介导下转染HEK293细胞,通过嘌呤霉素筛选Apaf1基因缺陷细胞,再经有限稀释法获得单克隆细胞,并对单克隆细胞进行基因测序。采用RTqPCR及Western blot法分别检测获得的HEK293单克隆细胞株(HEK293-Apaf1-KO组)及野生型HEK293细胞(HEK293-WT组)中Apaf1基因mRNA相对转录及Apaf1蛋白相对表达水平,CCK-8法及流式细胞术分别检测Apaf1基因敲除对HEK293细胞增殖及凋亡水平的影响,流式细胞术及Western blot法分别检测Apaf1基因敲除对HEK293细胞瞬时表达分泌型碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase,SEAP)及稳定表达玻连蛋白(vitronectin,VN)的影响。结果 经筛选及鉴定获得1株Apaf1基因敲除的HEK293单克隆细胞株1-38。与HEK293-WT组比较,HEK293-Apaf1-KO组细胞中Apaf1基因mRNA相对转录及Apaf1蛋白相对表达水平均明显降低(t分别为73.98和75.57,P均<0.000 1),细胞增殖水平明显增强(t=3.634,P <0.01),细胞凋亡水平差异无统计学意义(t=0.162 1,P> 0.05),SEAP及VN蛋白表达水平分别提高2.5倍和1.8倍(t分别为-51.199和2.47,P均<0.01)。结论 建立的Apaf1基因敲除HEK293细胞系可提高SEAP及VN蛋白的表达水平,有望应用于重组蛋白药物的生产。

抗炎症因子与类风湿性关节炎关系的研究进展

类风湿性关节炎(RA)是一种慢性炎症性疾病,疾病晚期可出现关节畸形和功能障碍,严重危害人类健康。抗炎症因子(AIC)作为一种保护性因子,和促炎症因子(PIC)共同在RA的发病和进展中发挥重要作用。RA中AIC水平降低,PIC水平升高,全身和局部炎症反应加重,关节软骨和软骨下骨破坏加速,促进RA进一步进展的理念已经被广大学者接受,以AIC为靶点的新一代RA生物学治疗方兴未艾。因此深入了解各种AIC在RA发病中的作用具有重要意义。本文从AIC与RA的关系和作用机制入手,对该领域的研究进展进行综述,为RA的临床诊治提供新的思路。

凋亡酶激活因子与p53及Ki-67在结直肠癌和结直肠腺瘤组织中的表达

目的探讨凋亡酶激活因子1(Apaf-1)、p53和Ki-67在结直肠腺瘤、结直肠癌组织中的表达情况。方法采用SP染色法,检测结直肠癌、腺瘤组织中Apaf-1、p53和Ki-67的表达情况。结果结直肠癌淋巴结转移组中,Apaf-1、p53、Ki-67阳性表达率分别为22.7%、31.8%和90.9%,无淋巴结转移组分别为43.6%、89.7%和61.5%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结直肠癌A、B期的Apaf-1、p53、Ki-67阳性表达率分别为43.6%、89.7%和61.5%,C、D期的Apaf-1、p53、Ki-67阳性表达率分别为27.7%、31.8%和90.9%。结直肠癌组织中Apaf-1阳性率(39.0%)低于腺瘤(88.0%),p53阳性率(77.0%)和Ki-67阳性率(68.0%)均高于腺瘤(分别为49.0%、26.0%),差异均有统计学意义(P<0.05)。Apaf-1阳性表达与p53、Ki-67阳性表达均呈负相关(r1=-0.358,r2=-0.361,P<0.01)。结论 Apaf-1、p53与Ki-67表达在结直肠癌、腺瘤的发生、发展与转移过程中有一定影响,对诊断结直肠癌有重要意义。

凋亡酶激活因子与Ki-67在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征的关系

目的探讨凋亡酶激活因子(APAF-1)与增殖细胞核抗原(Ki-67)在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法选取2018年5月至2019年9月本院收治乳腺癌患者58例。术中收集乳腺癌组织标本及距肿瘤边缘5 cm的正常乳腺组织标本,采用EnVision两步法免疫组化染色检测APAF-1、Ki-67蛋白表达水平;收集患者临床病理指标。结果乳腺癌组织中APAF-1蛋白阳性表达率为20.69%,明显低于正常乳腺组织中的68.97%;Ki-67蛋白阳性表达率为74.14%,明显高于正常乳腺组织37.93%;差异均有统计学意义(均P<0.01)。不同肿瘤直径、淋巴结转移情况、临床分期的乳腺癌患者APAF-1表达水平比较差异均有统计学意义(均P<0.01);不同淋巴结转移情况、临床分期的乳腺癌患者Ki-67表达水平比较差异均有统计学意义(均P<0.01)。乳腺癌组织中APAF-1与Ki-67表达水平呈负相关(均P<0.01)。结论 APAF-1和Ki-67蛋白在乳腺癌组织中异常表达,以负反馈调节的形式参与乳腺癌的发生与发展,同时与临床病理特征密切相关。

胃癌组织中IL-32与Apaf-1蛋白的表达及意义

目的 分析胃癌组织中白细胞介素-32(Interleukin-32,IL-32)与凋亡蛋白酶激活因子-1(Apoptotic Protease Activating Factor-1,Apaf-1)的表达及意义。方法 回顾性选取2019年1月—2022年12月南通市肿瘤医院收治的100例胃癌患者的临床资料,分别取其胃癌组织标本(胃癌组)和正常胃黏膜标本(癌旁组),通过免疫组化法(Streptavidin-perosidase,SP)检测胃癌标本与正常标本中IL-32、Apaf-1蛋白的阳性表达情况。结果胃癌组IL-32阳性表达率高于癌旁组,Apaf-1蛋白阳性表达率低于癌旁组,差异有统计学意义(P均<0.05);胃癌患者高中分化程度与低分化程度之间,浸润深度<肌层与≥肌层之间,TNM分期为Ⅰ、Ⅱ期与分期为Ⅲ、Ⅳ期之间以及有无淋巴结转移之间的IL-32、Apaf-1蛋白阳性表达率对比,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 IL-32与Apaf-1蛋白的阳性表达可为胃癌患者的临床诊断和治疗提供重要的参考价值。

黄芪注射液抑制脑缺血再灌注大鼠海马组织Apaf-1表达

目的:观察黄芪注射液对脑缺血再灌注大鼠海马组织凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)蛋白及其mRNA表达的影响。方法:将健康雄性SD大鼠120只随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、黄芪注射液干预组和溶剂对照组。采用四血管阻断法制备大鼠脑缺血再灌注模型,除假手术组外其余3组根据再灌注不同时点再分为0 h、0.5 h、2 h、6 h、24 h、72 h和120 h 7个亚组,于再灌注相应时点提取脑组织。采用免疫组织化学和Western blot-ting检测大鼠海马组织Apaf-1蛋白的表达,RT-PCR法检测Apaf-1 mRNA的表达。结果:除0 h和120 h外,脑缺血再灌注组各个时点Apaf-1蛋白及mRNA表达均较假手术组增加(P<0.05);与脑缺血再灌注组相比,黄芪注射液干预组各个时点Apaf-1蛋白及mRNA表达均显著减少(P<0.05),而溶剂对照组各时点与脑缺血再灌注组相比则均无显著变化(P>0.05)。结论:黄芪注射液能抑制大鼠海马组织Apaf-1蛋白及mRNA表达,从而抑制脑缺血再灌注大鼠海马神经元的凋亡。

黄芪注射液对脑缺血再灌注大鼠海马神经元形态学和Apaf-1表达的影响

目的观察黄芪注射液对脑缺血再灌注大鼠海马神经元形态学和Apaf-1表达的影响。方法SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组(再灌注组)和黄芪注射液处理组(实验组)。采用Pulsinelli四血管阻断法建立大鼠脑缺血再灌注模型,实验组于术前30 min腹腔注射黄芪注射液6 mL/kg,每24 h注射1次,各组于再灌注后24h断头取脑。采用HE染色,光镜下观察海马组织病理学改变;透射电镜下观察海马神经元超微结构变化;免疫组织化学法和Western blot法检测大鼠海马组织凋亡蛋白酶激活因子-1(Apaf-1)蛋白表达的变化。结果与假手术组比较,再灌注组大鼠海马神经元出现胞核及线粒体损伤,并且Apaf-1蛋白的表达明显升高(免疫组化:0.024±0.001 vs 0.109±0.011;Western blot法:0.270±0.018 vs 0.894±0.072,均P<0.01),与再灌注组比较,实验组大鼠海马神经元胞核及线粒体损伤明显减轻,而Apaf-1蛋白的表达明显降低(免疫组化:0.048±0.005;Western blot法:0.392±0.046,均P<0.01)。结论黄芪注射液可减轻脑缺血再灌注大鼠海马神经元的损伤,其作用机制可能与抑制Apaf-1蛋白表达有关。

Apaf-1和Ki-67在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨凋亡酶激活因子(Apaf-1)和Ki-67在乳腺癌组织中的表达并分析两者表达的临床意义。方法收集2014年1月至2015年12月60例乳腺癌组织和30例癌旁组织存档蜡块,采用免疫组织化学En Vision法检测Apaf-1和Ki-67的表达情况,同时分析两者表达的相关性及与临床病理特征(年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期和身体质量指数)的关系。结果 Apaf-1在乳腺癌组织中的阳性表达率为21.7%(13/60),低于癌旁组织的70.0%(21/30),差异有统计学意义(P<0.05)。Ki-67在乳腺癌组织中的阳性表达率为73.3%(44/60),高于癌旁组织的36.7%(11/30),差异有统计学意义(P<0.05)。两者表达与年龄、身体质量指数均无关(P>0.05),与肿瘤大小、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05)。两者在乳腺癌组织中的表达呈负相关(r=-0.413,P=0.018)。结论 Apaf-1在乳腺癌中表达降低,而Ki-67水平升高,两者在乳腺癌的发展和侵袭中发挥促癌作用,有可能作为临床诊断乳腺癌的标志物。

癫痫清颗粒对大鼠海马区神经元影响

目的:观察癫痫清颗粒对戊四唑引起大鼠海马神经元凋亡的影响。方法:大鼠腹腔注射10 g·L^(-1)戊四唑(40 mg·kg^(-1)),每2 d 1次,连续15次,停药l周后,再次腹腔注射戊四唑,根据本次癫痫发作级别随机分为7组,每组6只,连续灌胃给药治疗4周,麻醉后取脑,通过尼氏染色观察癫痫清颗粒对戊四唑诱发大鼠慢性癫痫模型海马组织结构的影响,并通过免疫组化染色观察癫痫清颗粒对戊四唑诱发大鼠慢性癫痫模型海马组织神经元Apaf-1、caspase-9和caspase-3表达的影响。结果:与模型对照组相比癫痫清低、中、高剂量组及苯妥英钠组大鼠海马齿状回存活细胞显著升高,与模型对照组相比癫痫清低、中、高剂量组Apaf-1表达均显著降低,与模型对照组相比癫痫清中剂量组caspase-9表达显著降低,与模型对照组相比癫痫清低、中、高剂量组caspase-3表达均显著降低。结论:癫痫清颗粒对戊四唑诱发慢性癫痫模型大鼠海马区神经元具有呈剂量依赖性的保护作用。

头孢曲松对大鼠弥漫性轴索损伤后细胞凋亡的影响

目的探讨头孢曲松对大鼠弥漫性轴索损伤后海马CA1区神经元凋亡的影响。方法选择雄性Wistar大鼠120只,随机分为药物干预组(n=36):制作弥漫性轴索损伤模型,于制作模型后即刻给予头孢曲松200 mg·kg-1。假手术组(n=36):仅行头皮切开缝合处理,给予等量生理盐水腹腔注射。脑损伤组(n=36):制作弥漫性轴索损伤模型,给予等量生理盐水腹腔注射。正常对照组(n=12):不给予任何干预措施。采用免疫组化技术检测干预后12、24和36h时相海马CA1区凋亡蛋白酶激活因子-1(Apaf-1)蛋白的表达水平。结果脑损伤组和药物干预组大鼠海马CA1区Apaf-1蛋白表达水平均于12 h开始增加,24 h达高峰,此后逐渐下降。药物干预组大鼠海马CA1区Apaf-1蛋白表达水平在各个时相点均低于脑损伤组,均差异有统计学意义。结论弥漫性轴索损伤可引起大鼠海马CA1区神经元凋亡,头孢曲松可改善凋亡的发生、发展。

神经节苷脂对大鼠弥漫性轴索损伤后细胞凋亡的影响

目的探讨神经节苷脂对大鼠弥漫性轴索损伤后海马CA1区神经元凋亡的影响。方法 Wistar大鼠,♂,192只,随机分为正常对照组、假手术组、脑损伤组和药物干预组。正常对照组不给予任何干预措施;假手术组仅进行头皮切开缝合处理;脑损伤组和药物干预组均制作弥漫性轴索损伤模型,其中药物干预组在制作模型后定期给予神经节苷脂(40 mg·kg-1·d-1)。造模3,6,12,24,336 h后,用免疫组化方法检测海马CA1区凋亡蛋白酶激活因子-1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)蛋白的表达。结果脑损伤组和药物干预组大鼠海马CA1区Apaf-1蛋白表达含量均于3 h开始增加,6 h达到高峰,此后逐渐下降。药物干预组大鼠海马CA1区Apaf-1蛋白表达含量在各个时间点均低于脑损伤组,除3 h组外,差异均有统计学意义(P<0·05)。结论弥漫性轴索损伤可引起大鼠海马CA1区神经元凋亡,神经节苷脂可改善该凋亡的发生发展。