基于蛋白质相互作用网络探讨天花粉蛋白对乳腺癌MCF-7/PTX细胞的耐药逆转作用

目的:构建人乳腺癌MCF-7/PTX细胞的蛋白质相互作用网络,预测细胞关键靶点,从凋亡耐药途径观察天花粉蛋白对MCF-7/PTX细胞的耐药逆转作用。方法:通过在线基因银行数(GenBank)筛选获得MCF-7/PTX细胞相关基因;使用STRING进行文本挖掘并构建蛋白质相互作用网络;应用插件Centiscape 2.2实现拓扑分析;基于拓扑分析所得的关键因子,选取Bcl-2基因为研究指标;MTT法检测TCS对MCF-7/PTX细胞的增殖抑制作用,Western Blot检测TCS对MCF-7/PTX细胞Bcl-2蛋白表达的影响。结果:通过"GenBank"筛选获得MCF-7/PTX细胞相关基因134个,软件STRING挖掘出MCF-7/PTX细胞的蛋白质相互作用网络包含1194个节点(蛋白质)、19733条边(相互作用关系);插件Centiscape 2.2分析得出关键节点Bcl-2。实验表明TCS对MCF-7/PTX细胞有明显的增殖抑制作用,且随着药物浓度的升高和作用时间的延长,对细胞的增殖抑制率升高,具有时间-剂量依赖性。不同浓度TCS作用于MCF-7/PTX细胞72 h,Bcl-2蛋白的表达下调,且呈剂量依赖性。结论:TCS通过下调MCF-7/PTX细胞Bcl-2蛋白的表达来发挥耐药逆转作用。

癌症相关成纤维细胞通过转移外泌体LncRNANEAT1促进骨肉瘤对TRAIL耐药性研究

目的探索癌症相关成纤维细胞(CAFs)通过转移外泌体长链非编码RNA NEAT1(LncRNANEAT1)促进骨肉瘤对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)耐药性机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测骨肉瘤亲本细胞和TRAIL耐药细胞中LncRNANEAT1的表达水平;TUNEL实验检测敲低LncRNANEAT1对骨肉瘤细胞TRAIL耐药性影响;Western blot检测正常成纤维细胞(NFs)和CAFs中的Fibronectin和a-SMA蛋白表达;qRT-PCR检测NFs和CAFs中的LncRNANEAT1的表达。使用NFs和CAFs的条件培养基处理骨肉瘤细胞, TUNEL实验检测骨肉瘤细胞对TRAIL敏感性的变化, Western blot检测ROCK2蛋白的表达;使用LncBase数据库和双荧光素酶报告基因实验分析了与LncRNANEAT1和ROCK2潜在结合的miRNAs。结果与骨肉瘤亲本细胞相比, 骨肉瘤TRAIL耐药的细胞中LncRNANEAT1的表达显著增加。敲低LncRNANEAT1 TRAIL耐药性被逆转。与NFs相比, CAFs中fibronectin和α-SMA蛋白表达显著增加, LncRNANEAT1的表达也明显增加。CAFs条件培养基处理的骨肉瘤细胞对TRAIL敏感性下降, 且ROCK2蛋白表达增加。LncRNANEAT1可吸附miR-142-3p上调ROCK2的表达。结论 CAFs通过转移外泌体LncRNANEAT1吸附miR-142-3p进而上调ROCK2的表达, 增强骨肉瘤细胞对TRAIL的耐药性。

Y-box结合蛋白1在肿瘤发生与治疗中的研究进展

Y-box结合蛋白1(YB-1)属于冷休克蛋白家族,是一种多功能蛋白。YB-1参与一系列DNA/RNA依赖的事件,如DNA的修复、m RNA选择性剪接、m RNA稳定性和翻译的调节。YB-1在细胞增殖、分化、应激反应和恶性细胞的转化等过程中发挥重要的生物学功能。YB-1在各种类型的肿瘤组织中过表达,在肿瘤的发生和耐药性方面发挥着关键作用。现在,以YB-1为靶点治疗肿瘤已经成为研究的热点。