中华芦荟多糖对辐射小鼠胸腺细胞凋亡及细胞周期的影响

目的研究芦荟多糖(AP)对受60Coγ射线辐射后小鼠胸腺细胞凋亡及细胞周期进程的影响。方法取小鼠辐射后不同时间点胸腺单细胞悬液,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的改变,1.8%琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯形条带,透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果辐射前30minip50mg/kgAP能显著降低6Gyγ射线辐射后4h、8h和12h小鼠胸腺细胞凋亡率,显著提高各时间点G0/G1期细胞所占比例,降低G2/M期细胞比例。能使DNA片段明显减少;显著改善细胞超微结构,明显减少凋亡小体数量。结论AP对辐射小鼠胸腺细胞的保护作用与改善细胞周期紊乱、抑制细胞凋亡有关。

IL-2、IL-6对地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用

目的：以Ｄｅｘ诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型，研究细胞因子（ＩＬ２、ＩＬ６）对小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用。方法：应用ＰＩ法检测亚二倍体细胞，二苯胺法测定胸腺细胞片段化ＤＮＡ含量（％），ＤＮＡ凝胶电泳，流式细胞计分析胸腺细胞表型、测定高钙细胞百分比。结果：发现地塞米松（Ｄｅｘ）与小鼠胸腺细胞共同培养引起细胞凋亡，胸腺细胞减少以ＣＤ４＋ＣＤ８＋细胞最明显。细胞凋亡具有时间效应并与Ｄｅｘ浓度有关。３～４ｗ小鼠胸腺细胞对Ｄｅｘ的敏感性高于６～８ｗ小鼠。高浓度（＞２００Ｕ／ｍｌ）ＩＬ２或１００Ｕ／ｍｌＩＬ２与ＩＬ６（１００Ｕ／ｍｌ）协同可减轻Ｄｅｘ诱导的胸腺细胞凋亡，其片段化ＤＮＡ和亚二倍体细胞明显减少，胞浆Ｃａ２＋浓度降低，胸腺细胞亚群分布得到纠正。单独应用ＩＬ６不能改变Ｄｅｘ诱导的胸腺细胞凋亡。结论：地塞米松可促进小鼠胸腺细胞凋亡，高浓度（＞２００Ｕ／ｍｌ）ＩＬ２或１００Ｕ／ｍｌＩＬ２与ＩＬ６（１００Ｕ／ｍｌ）协同可减轻Ｄｅｘ诱导的胸腺细胞凋亡。

荧光显微镜法检测小鼠胸腺细胞凋亡的染料选择

目的:通过荧光显微镜检测对比不同染料的特点,并找出最佳染料组合用于胸腺细胞凋亡检测。方法:PI,7-AAD,Annexin V-Alexa Flour 488(AF488)分别单染胸腺细胞,Annexin V-AF488与PI/7-AAD双染胸腺细胞在荧光显微镜下观察,Annexin V-APC与7-AAD双染胸腺细胞在流式细胞仪下观察。结果:采用荧光显微镜检测,PI单染后在绿色模块下能够看到阳性信号,而7-AAD单染后在绿色模块下不会出现阳性信号;三种染料中,PI与7-AAD单染细胞涂片后随着时间的延长阳性信号逐渐增多,Annexin V-AF488单染细胞涂片后随着时间的延长阳性信号稍微减弱;7-AAD与Annexin V-AF488双染胸腺细胞在荧光显微镜下检测的结果和7-AAD与Annexin V-APC双染胸腺细胞流式细胞仪检测的结果无差异。结论:采用荧光显微镜法检测胸腺细胞凋亡,7-AAD与Annexin V-AF488结合最佳。

补充L-精氨酸对热应激大鼠胸腺细胞凋亡的影响

探导热应激对大鼠胸腺细胞的影响及补充L 精氨酸 (L Arg)对胸腺细胞的作用 ,结果显示 :1.在常温下 ,胸腺细胞结构清晰 ,形态规则 ,自然凋亡率低 ,补充L Arg组自然凋亡率低于灌水对照组 (P <0 .0 1) ;2 .不同温度的热应激均可导致胸腺细胞凋亡 ,电镜和光镜显示其典型的形态学特征 ;3.DNA凝胶电泳呈“梯状”条带 ,FCM检测出现凋亡峰 ;4 .补充L Arg的两组上述结果轻于灌水对照组。热应激后 ,2h便可见到凋亡细胞 ,4 - 8h达高峰。补充L Arg组 2 4h后基本恢复到正常水平 ,而灌水对照组稍差。说明适量补充L

丙酸睾酮对大鼠胸腺细胞凋亡及胸腺中Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨丙酸睾酮在大鼠胸腺退化过程中的作用及其对大鼠胸腺中Bcl-2和Bax表达的影响。方法雄性大鼠去势后给予丙酸睾酮皮下注射,分别于注射后第1、4、7天取材,用半薄切片甲苯胺蓝染色检测胸腺细胞凋亡情况,免疫组织化学法检测胸腺组织中Bcl-2和Bax的表达情况,采用t检验进行统计学处理。结果丙酸睾酮处理组大鼠胸腺组织中可发现较多的凋亡细胞和凋亡小体;去势组大鼠胸腺组织中Bcl-2表达量明显高于假手术组(P<0.001),丙酸睾酮处理后Bcl-2表达量明显减少(P<0.001);而Bax的表达正好相反,去势组大鼠胸腺组织中Bax表达量明显低于假手术组(P<0.001),给予丙酸睾酮后Bax表达量明显增加(P<0.001);结论丙酸睾酮可诱导大鼠胸腺细胞凋亡,并抑制大鼠胸腺组织中Bcl-2的表达,促进Bax的表达。

运动对RBP4诱导的胰岛素抵抗大鼠心肌Na^+-K^+-ATP酶及胸腺细胞凋亡的影响

研究运动对RBP4诱导的胰岛素抵抗大鼠心肌Na+-K+-ATP酶及胸腺细胞凋亡的影响。方法:8周龄雄性SD大鼠给予重组RBP4 3μg/g体重腹腔注射,12小时注射一次,持续注射4周。设RBP4+运动组(RE)、RBP4安静组(RR)和正常安静对照组(C),RE组予4周无负重游泳训练,60min/天。免疫组化和免疫印迹法分别检测血清RBP4,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采用化学比色法,以考马斯亮蓝G250进行蛋白定量检测心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性。双抗体夹心ABC-ELISA法检测血清GM-CSF含量;S-P一步法检测血液中CD4、CD8的活性。运用TUNEL法标记各组大鼠胸腺的凋亡细胞。结果:RE组血清RBP4和HOMA-IR显著低于RR组。RE组较RR组大鼠CD4细胞数增多(P<0.05),CD8细胞数稍有减少(P<0.05),CD4/CD8比值明显增加(P<0.01);RE组心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶活性显著高于RR组,与对照组相比无显著差异;RE组与RR组比胸腺指数(P<0.05)、脾脏指数明显提高(P<0.01)。RE组在胸腺皮质及髓质部位见棕红色的凋亡细胞似较正常安静对照组增多,但较C组明显减少。结论:运动能够提高胰岛素抵抗大鼠Na+-K+-ATP酶活性,降低了细胞内Na+浓度,明显提升RBP4诱导的胰岛素抵抗大鼠心肌传导能力;运动能够使CD4/CD8比值增加,胸腺细胞凋亡减少,能够提高RBP4诱导的胰岛素抵抗大鼠的免疫能力。

计算机辅助诊断系统对小鼠胸腺细胞凋亡超微结构实验研究

目的:利用fPAX^TM计算机辅助诊断系统评估经糖皮质激素诱导小鼠体外胸腺细胞凋亡超微结构图像。方法:先对小鼠腹腔内注射地塞米松诱导细胞凋亡;利用fPAX^TM计算机辅助诊断系统后处理功能,按照实验程序对扫描与透射电镜图像进行数码采集、观察与评估。结果:按照程序对经fPAX^TM计算机辅助诊断系统后处理的电镜图像在线分析,结果显示在图像质量与图像参数实验组与对照组之间存在显著性差异(P<0.05)。结论:经fPAX^TM计算机辅助诊断系统后处理的电镜图像质量高,清晰地显示细胞凋亡细节包括细胞凋亡不同时期的超微结构。

地塞米松对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的 探讨地塞米松对实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法 采用昆明小鼠建立 EAE模型 ,于处死前 2 4小时腹腔注射地塞米松 ,通过荧光染色法、原位末端标记法和电镜法观察地塞米松处理组、自然病程组和对照组的小鼠胸腺细胞凋亡。结果 地塞米松处理组的胸腺细胞凋亡率明显高于自然病程组和正常对照组 (P<0 .0 1) ;且电镜发现有典型的凋亡改变。结论 地塞米松可明显增强 EAE小鼠胸腺细胞凋亡。

LPS诱导的胸腺细胞凋亡对瘦素的抑制作用(英文)

Objective To study the signaling transduction mechanism of leptin, including phosphatidylinositol 3-kinase/AKT (PI3-K/AKT) and cPLA2 signal pathway. Methods MTT colorimetric assay and Annexin V-FITC/PI double staining for flow cytometry were used to demonstrate the inhibitory effect of leptin on lipopolysaccharide(LPS)-induced toxicity and apoptosis of thymocytes with a cPLA2 activity kit. RT-PCR was performed to show the suppressive effect of leptin on cPLA2 activity and cPLA2 mRNA level in proteins and genes. Effect of a specific inhibitor (LY294002) of PI3-K on apoptosis of thymocytes was detected by flow cytometry. Caspase3 mRNA was determined by RT-PCR. Results Leptin inhibited lipopolysaccharid(eLPS)-induced toxicity and apoptosis of thymocytes, decreased the cPLA2 activity and cPLA2 mRNA level in proteins and genes. Conclusion Leptin inhibits toxicity and apoptosis of thymocytes through the PI3-K/AKT and cPLA2 signal pathway.

外源性补充Tα1对运动性免疫抑制发展过程中胸腺组织细胞的抗凋亡效应

研究了补充Tα1(胸腺素α1)对大鼠胸腺形态、结构与淋巴细胞凋亡的影响,分析了补充Tα1后改善运动性免疫抑制(Exercise-induced immunosuppression)的机制。将雄性SD大鼠48只,分为单纯运动组和运动+Tα1组。运动方案采用6周活动跑台递增负荷运动,分别在第0、2、4、6周末次运动后48h取材。结果发现,单纯运动组大鼠胸腺形态不断萎缩,胸腺结构发生进行性破坏,且细胞凋亡显著增加。补充Tα1后,大鼠胸腺形态结构明显改善,细胞凋亡情况显著降低。补充Tα1能够保护胸腺形态结构的完整性,减少胸腺细胞凋亡,有效提升机体的抗氧化能力,改善运动免疫抑制的程度。

关于细胞凋亡

机体组织细胞在各种损伤、感染或丧失血液供应的条件下会出现局部死亡的现象。细胞死亡时既有细胞核的改变,也有细胞浆的变化。体外培养的神经元在剥夺神经生长因子后数小时即呈现蛋白合成下降,继而DNA发生碎裂,细胞死亡已不可避免。死亡的细胞还有细胞膜损伤、线粒体破坏、溶酶体裂解等。其中,认为DNA碎裂和线粒体破坏是细胞死亡的重要标志。细胞生物学家区分出两种类型的细胞死亡:一种表现是细胞核DNA的改变,称为细胞凋亡(Apoptosis);另一种首先有明显的胞浆肿胀,膜通透性改变,细胞器损毁,后期才有核深染、DNA非特异性解聚和核溶解,称为细胞坏死(Necrosis)。细胞凋亡和细胞坏死在发生机理上有很大的差别,其意义正受到广泛重视。1

地塞米松诱导小鼠胸腺凋亡的形态学及组织化学研究

地塞米松诱导小鼠胸腺凋亡的形态学及组织化学研究陈英杰孙品伟朱小辉（北京医科大学组织学与胚胎学系）采用半薄切片技术研究小鼠胸腺内细胞凋亡。对ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔内注射地塞米松诱发胸腺细胞凋亡，制成凋亡模型。于注射后１、７、１５、１９、３０ｈ取材，常规电...

禽流感病毒与番鸭呼肠病毒感染番鸭免疫器官细胞凋亡的研究

应用原位末端标记法和免疫组化SABC法，分别以Hg亚型禽流感和番鸭呼肠病毒单独感染或混合感染雏番鸭后1、3、5、7、10d对胸腺、法氏囊、脾脏细胞凋亡和P53的动态变化进行检测。结果显示，H9亚型AIV，MDRV单独感染和混合感染均可导致雏番鸭胸腺、法氏囊和脾脏出现淋巴细胞凋亡增多；病毒感染早期各免疫器官组织细胞凋亡明显，感染后期细胞凋亡量逐渐减少；混合感染组脾脏、胸腺细胞凋亡更为显著。

全身X射线照射对小鼠胸腺细胞凋亡的影响——原位末端标记法检测DNA断裂

胸腺是Ｔ淋巴细胞发育、分化和成熟的场所。在Ｔ淋巴细胞的发育过程中，只有小部分胸腺细胞完成其发育过程，大部分胸腺细胞未发育成熟而在胸腺中死亡［１］，现已证实，未成熟的胸腺细胞主要通过细胞凋亡途径被清除［２］，胸腺细胞凋亡已成为机体免疫调节的主要途径之一...

性别对T细胞受体抗体诱导的小鼠胸腺细胞亚群凋亡的影响

为分析抗TCR抗体诱导小鼠胸腺细胞的凋亡与性别的关系。用抗TCR抗体腹腔注射、体外包被诱导不同性别小鼠胸腺细胞的凋亡 ,并体外分析雌、雄小鼠在细胞周期凋亡敏感性的差异。腹腔注射抗TCR抗体 4 8h后 ,BALB/c小鼠成熟髓质区高表达TCR的单阳性细胞数目 (CD4 + CD8 、CD4 CD8+ )成倍增加 ,同时皮质区低表达TCR的不成熟双阳性细胞 (CD4 +CD8+ )数目减少。雄性小鼠的这种变化明显于雌性小鼠 ,体外刺激显示类似的结果。抗TCR抗体诱导的凋亡与G0 /G1期细胞的减少有关。结果表明不同性别小鼠在细胞凋亡的敏感性上有差异 ,雄性小鼠更易感。