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过表达Bcl-2雪旺细胞抗凋亡能力的实验研究 被引量:9
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作者 葛成国 靳凤烁 +4 位作者 李黔生 江军 李彦锋 王洛夫 靳文生 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期95-97,共3页
目的:探讨凋亡相关基因Bcl-2过表达对抗过氧化氢诱导的雪旺细胞凋亡的影响。方法:构建含有人Bcl-2cDNA的逆转录病毒真核表达载体PLXSN,脂质体法将重组质粒转染PA317细胞,G418筛选阳性克隆,鉴定后浓缩收集病毒液,感染人雪旺细胞株系Schwa... 目的:探讨凋亡相关基因Bcl-2过表达对抗过氧化氢诱导的雪旺细胞凋亡的影响。方法:构建含有人Bcl-2cDNA的逆转录病毒真核表达载体PLXSN,脂质体法将重组质粒转染PA317细胞,G418筛选阳性克隆,鉴定后浓缩收集病毒液,感染人雪旺细胞株系Schwann'scells,采用Western法检测Bcl-2蛋白表达情况。5mMH2O2作用并诱导细胞凋亡后,流式细胞仪检测细胞凋亡发生变化。结果:成功构建出含目的基因Bcl-2的逆转录病毒表达载体pLBcl-2SN。5mMH2O2成功的诱导雪旺细胞凋亡。Bcl-2逆转录病毒感染雪旺细胞后,Bcl-2蛋白水平呈过高表达,并能显著对抗H2O2诱导的雪旺细胞凋亡。结论:Bcl-2蛋白过表达能够抑制氧化剂诱导的雪旺细胞凋亡。 展开更多
关键词 基因表达 BCL-2 雪旺细胞 凋亡能力 细胞 逆转录病毒
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H18杂交瘤抗凋亡能力的改造 被引量:2
2
作者 王贤辉 徐静 +2 位作者 张阳 米力 陈志南 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期705-708,共4页
利用PCR从pGEM T bcl XL 质粒中获得bcl XL 基因 ,构建真核表达载体pEF bcl XL,脂质体法转染杂交瘤细胞 ,G4 18筛选稳定表达株 ,Westernblotting检测目的蛋白表达 ,流式细胞仪检测Bcl XL 提高杂交瘤抗正丁酸钠诱导凋亡的功能。将构建的... 利用PCR从pGEM T bcl XL 质粒中获得bcl XL 基因 ,构建真核表达载体pEF bcl XL,脂质体法转染杂交瘤细胞 ,G4 18筛选稳定表达株 ,Westernblotting检测目的蛋白表达 ,流式细胞仪检测Bcl XL 提高杂交瘤抗正丁酸钠诱导凋亡的功能。将构建的编码鼠bcl XL 基因的真核表达载体pEF bcl XL,转染H18细胞后 ,获得稳定的表达株细胞 ;稳定表达Bcl XL 的细胞具有抗正丁酸钠诱导凋亡的功能。鼠bcl XL 基因在杂交瘤细胞中稳定表达 ,提高了杂交瘤抗凋亡的能力 ,对高密度大规模培养杂交瘤细胞具有重要意义。 展开更多
关键词 BCL-XL基因 杂交瘤细胞 表达 凋亡能力 真核表达载体 哺乳动物细胞 高密度培养
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转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2 shRNA的人骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡能力观察 被引量:2
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作者 于云祥 龚泰芳 +2 位作者 刘小涛 柯文 李彬彬 《山东医药》 CAS 2020年第12期10-13,共4页
目的观察转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)shRNA的骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡的变化。方法以qRT-PCR法和Western blotting法分别检测人骨肉瘤细胞(U2-OS、MG-63、SaOS-2)和人正常成骨细胞(h FOB1.19)中ATAD2 mRNA、蛋白。在U2-OS细... 目的观察转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)shRNA的骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡的变化。方法以qRT-PCR法和Western blotting法分别检测人骨肉瘤细胞(U2-OS、MG-63、SaOS-2)和人正常成骨细胞(h FOB1.19)中ATAD2 mRNA、蛋白。在U2-OS细胞中转染ATAD2 shRNA慢病毒载体,采用qRT-PCR法和Western blotting法检测转染效果,CCK8方法检测细胞增殖变化,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成数目,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期,膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/PI双染法检测细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-Caspase-3)、细胞周期依赖性蛋白激酶4(CDK2)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(C-Caspase-9)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白。结果骨肉瘤细胞中ATAD2 mRNA、蛋白表达水平高于正常成骨细胞(P均<0.05)。ATAD2 shRNA慢病毒载体转染后的骨肉瘤细胞中ATAD2表达水平下降(P<0.05)。转染ATAD2 shRNA后的骨肉瘤细胞增殖能力和克隆形成能力均降低,细胞G1期比例升高,细胞凋亡率升高,细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达升高,CDK2、CyclinD1蛋白表达降低(P均<0.05)。结论转染ATAD2 shRNA可抑制U2-OS细胞增殖,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷酶家族蛋白2 shRNA慢病毒载体 骨肉瘤 U2-OS细胞 细胞增殖能力 细胞凋亡能力
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虾青素对IPEC⁃J2细胞抗氧化、抗炎和抗凋亡能力的影响 被引量:2
4
作者 张晶 田乐 +3 位作者 赵云 房恒通 付玉蓉 王传奇 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期5983-5993,共11页
本试验旨在研究虾青素(AST)对IPEC-J2细胞抗氧化、抗炎和抗凋亡能力的影响。以IPEC-J2细胞作为研究对象,经不同浓度[0(对照组)、5、10、20、40、80和100μmol/L]的AST处理24 h后,通过实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹(Western Blot)技... 本试验旨在研究虾青素(AST)对IPEC-J2细胞抗氧化、抗炎和抗凋亡能力的影响。以IPEC-J2细胞作为研究对象,经不同浓度[0(对照组)、5、10、20、40、80和100μmol/L]的AST处理24 h后,通过实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹(Western Blot)技术检测AST对IPEC-J2细胞的影响。结果显示:1)与对照组(未添加AST)相比,10~80μmol/L的AST极显著提升细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.01),细胞内总超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)的mRNA相对表达量分别在10~100μmol/L AST和40~100μmol/L AST处理后显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01)。2)核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的mRNA相对表达量随着AST浓度的增加整体呈现下降趋势,100μmol/L的AST与对照组的差异达到极显著水平(P<0.01);肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、髓样分化因子88(MyD88)和白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA相对表达量在AST浓度达到10μmol/L后显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01)。3)与对照组相比,20~100μmol/L的AST显著或极显著降低细胞中半胱天冬蛋白酶-9(Caspase-9)的mRNA相对表达量和Bcl-2相关X蛋白(Bax)/B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)基因比值(P<0.05或P<0.01);80μmol/L的AST极显著降低细胞中Bax的蛋白相对表达量和Bax/Bcl-2蛋白比值(P<0.01)。4)AST促进细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)的表达,且AST浓度为100μmol/L时Nrf2的mRNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,10~100μmol/L的AST显著或极显著上调Nrf2信号通路下游抗氧化基因血红素加氧酶-1(HO-1)的mRNA相对表达量(P<0.05或P<0.01),其他下游基因NADPH:醌氧化还原酶1(NQO1)(20、80和100μmol/L)、热应激蛋白70(HSP70)(20、80和100μmol/L)和超氧化物歧化酶2(SOD2)(20和80μmol/L)的mRNA相对表达量在不同浓度AST下被显著或极显著提升(P<0.05或P<0.01);与对照组相比,80μmol/L的AST显著提升了细胞中Nrf2和HO-1的蛋白相对表达量(P<0.05)。综上可知,AST(5~100μmol/L)可以激活IPEC-J2细胞中Nrf2信号通路,以80μmol/L AST对IPEC-J2细胞抗氧化、抗炎和抗凋亡能力的提升效果更为稳定,效果更好。 展开更多
关键词 虾青素 IPEC-J2细胞 抗氧化能力 抗炎能力 凋亡能力 Nrf2信号通路
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上调miR-34对口腔癌细胞增殖、凋亡能力及周期分布的影响 被引量:1
5
作者 王康浴 王裕洲 +2 位作者 陈海鹏 李国良 邓国磊 《河北医药》 CAS 2021年第23期3552-3555,共4页
目的探究上调miR-34对口腔癌细胞增殖、凋亡能力及周期分布的影响。方法选取口腔癌细胞,培养后分为空白组、上调miR-34组和下调miR-34组,检测3组细胞增殖、凋亡、侵袭迁移能力以及周期分布情况,Western blot法检测Bcl-2、Bax、caspase3... 目的探究上调miR-34对口腔癌细胞增殖、凋亡能力及周期分布的影响。方法选取口腔癌细胞,培养后分为空白组、上调miR-34组和下调miR-34组,检测3组细胞增殖、凋亡、侵袭迁移能力以及周期分布情况,Western blot法检测Bcl-2、Bax、caspase3、E-cadherin、N-cadherin相对表达量。结果在第24、48、72 h,上调miR-34组细胞增殖率均低于空白组,凋亡率均高于空白组,且下调miR-34组细胞增殖率均高于空白组、上调miR-34组,凋亡率均低于空白组、上调miR-34组,差异有统计学意义(P<0.05)。上调miR-34组处在G1、S、G2期的细胞比例均低于空白组,且下调miR-34组细胞比例均高于空白组、上调miR-34组,差异有统计学意义(P<0.05)。上调miR-34组细胞侵袭细胞数、迁移细胞数均低于空白组,且下调miR-34组细胞侵袭细胞数、迁移细胞数均高于空白组、上调miR-34组,差异有统计学意义(P<0.05)。上调miR-34组细胞Bcl-2、N-cadherin相对表达量低于空白组,Bax、caspase3、E-cadherin、相对表达量高于空白组,且下调miR-34组细胞Bcl-2、N-cadherin相对表达量高于空白组、上调miR-34组,Bax、caspase3、E-cadherin相对表达量均高于于空白组、上调miR-34组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过上调miR-34的表达可促进口腔癌细胞凋亡、抑制癌细胞侵袭和迁移能力,调控细胞周期分布,调节Bcl-2、Bax、caspase3、E-cadherin、N-cadherin相对表达量。 展开更多
关键词 口腔癌 细胞增殖 凋亡能力 周期分布
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小鼠骨髓间充质干细胞亚群在心肌梗死中抗凋亡能力的研究 被引量:1
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作者 贺继刚 沈振亚 +3 位作者 滕小梅 余云生 叶文学 丁英龙 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期556-556,共1页
骨髓间充质干细胞(BMSCs)修复损伤心肌效果报道不一致,可能是BMSCs为一多克隆的细胞群体。我们利用6种小鼠心肌干细胞(CSCs)亚群表面分化抗原对小鼠BMSCs(mBMSCs)进行分选,得到4组mBMSCs亚群,通过检测凋亡率、心脏彩超、力图... 骨髓间充质干细胞(BMSCs)修复损伤心肌效果报道不一致,可能是BMSCs为一多克隆的细胞群体。我们利用6种小鼠心肌干细胞(CSCs)亚群表面分化抗原对小鼠BMSCs(mBMSCs)进行分选,得到4组mBMSCs亚群,通过检测凋亡率、心脏彩超、力图寻找最佳抗凋亡亚群。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 凋亡能力 细胞亚群 心肌梗死 小鼠 表面分化抗原 BMSCS 心肌干细胞
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微小RNA-203a促进肾透明细胞癌细胞增殖、迁移和抗凋亡能力
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作者 胡光辉 刘欢 +6 位作者 赖鹏 郭锥锋 徐亮 刘敏 袁静 郑军华 许云飞 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期930-930,共1页
微小RNA(miRNA,miR)-203是近年发现的1个皮肤特异性miRNA,并且可以作为致癌或抑癌因子调控肿瘤的增殖、凋亡和迁移[1-2].我们检测肾透明细胞癌样本以及细胞株中miR-203a表达水平,探讨其对肾透明细胞癌细胞生物学行为的影响及调控机制.
关键词 肾透明细胞癌 癌细胞增殖 凋亡能力 迁移 细胞生物学行为 因子调控 MIRNA 特异性
原文传递
miRNA-299-3p对肺癌细胞系A549迁移、增殖、凋亡、多柔比星敏感性的影响 被引量:5
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作者 汪洋 汪群 张峰 《山东医药》 CAS 2019年第3期9-13,共5页
目的观察微小RNA-299-3p(miRNA-299-3p)对人肺癌细胞A549迁移、增殖、凋亡、多柔比星敏感性的影响。方法以A549细胞为研究对象,首先评价miRNA-299-3p对靶基因三磷酸腺苷结合盒E1(ABCE1)的调控效应;通过CCK-8染色、划痕实验、活力分析、T... 目的观察微小RNA-299-3p(miRNA-299-3p)对人肺癌细胞A549迁移、增殖、凋亡、多柔比星敏感性的影响。方法以A549细胞为研究对象,首先评价miRNA-299-3p对靶基因三磷酸腺苷结合盒E1(ABCE1)的调控效应;通过CCK-8染色、划痕实验、活力分析、TUNEL染色以及蛋白印迹方法系统分析miRNA-299-3p转染的A549细胞迁移、增殖、凋亡以及对多柔比星敏感性的影响。结果 miRNA-299-3p对肺癌细胞ABCE1具有显著抑制效应。经miRNA-299-3p转染的A549细胞增殖活性、迁移等生物学特征并未受到明显影响。然而,miRNA-299-3p显著增加了A549细胞对多柔比星的敏感性,与对照组相比,同样剂量的多柔比星药物导致A549细胞活性显著下降,凋亡水平显著升高。结论 miR-299-3p靶向抑制ABCE1表达,其过表达并不能显著抑制A549细胞的增殖,但miR-299-3p联合多柔比星促进了A549细胞对多柔比星的敏感性,显著促进了A549细胞的凋亡。 展开更多
关键词 微小RNA-299-3p 肺肿瘤 肺癌 细胞增殖能力 细胞凋亡能力 细胞迁移能力 化疗敏感性
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miR-194对人非小细胞肺癌细胞系A549增殖、凋亡的影响及其机制 被引量:4
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作者 王纯斌 袁琳 +3 位作者 王梅娟 沈福军 黎超 赵明宏 《山东医药》 CAS 2019年第15期10-14,共5页
目的 观察微小RNA-194(miR-194)对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法 取A549细胞和人正常肺上皮细胞16HBE,采用qRT-PCR法检测两种细胞miR-194。常规培养A549细胞,经脂质体分别转染miR-194抑制物、miR... 目的 观察微小RNA-194(miR-194)对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法 取A549细胞和人正常肺上皮细胞16HBE,采用qRT-PCR法检测两种细胞miR-194。常规培养A549细胞,经脂质体分别转染miR-194抑制物、miR-194模拟物(mimics)、对照48h(分别计为A、B、C组),采用qRT-PCR验证转染效果,MTS法检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞凋亡能力,Western blotting法检测细胞JAK2、pSTAT3、活化的Caspase-3蛋白。结果 A549、16HBE细胞中miR-194相对表达量分别为1.00±0.10、8.17±0.14,两者比较,P<0.05。A、B、C组miR-194相对表达量分别为0.31±0.11、8.35±0.31、1.00±0.10,A、B组分别与C组比较,P均<0.05。A组转染24、48、72h的OD值分别为0.494±0.069、0.843±0.084、1.111±0.109,B组分别为0.355±0.026、0.510±0.049、0.706±0.087,C组分别为0.427±0.022、0.664±0.068、0.906±0.060,A、B组分别与C组比较,P均<0.05。A、B、C组细胞克隆数目分别为(232.12±10.82)、(43.67±10.97)、(127.33±6.43)个,A、B组分别与C组比较,P均<0.05。与C组比较,A组细胞凋亡现象及数目明显减少,B组细胞凋亡现象及数目明显增多;A、B、C组细胞凋亡率分别为4.58%±1.01%、21.45%±1.78%、10.23%±1.65%,A、B组分别与C组比较,P均<0.05。A组JAK2、pSTAT3、活化的Caspase-3蛋白相对表达量分别为5.97±0.24、4.52±0.18、0.11±0.04,B组分别为0.34±0.03、0.21±0.02、7.21±0.79,C组分别为1.00±0.10、1.00±0.10、1.00±0.10,A、B组分别与C组比较,P均<0.05。结论 miR-194能抑制A549细胞的增殖、克隆形成能力,并诱导细胞凋亡,其机制可能与调控JAK2/STAT3信号通路并促进活化的Caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 微小RNA-194 非小细胞肺癌 细胞增殖能力 细胞克隆形成能力 细胞凋亡能力 JAK2/STAT3信号通路 活化的Caspase-3蛋白
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SAL与EGCG联合应用对人胃癌细胞株SGC-7901增殖、凋亡的影响及其机制
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作者 米志宽 隋丽欣 赵菊梅 《山东医药》 CAS 2019年第15期20-23,共4页
目的 观察盐霉素(SAL)联合表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人胃癌细胞株SGC-7901增殖、凋亡能力的影响,并探讨其机制。方法 取对数生长期SGC-7901细胞并分组,联合组分别加入5、10、20、40mg/L的EGCG及2μmol/L的SAL,SAL组加入1、2、4... 目的 观察盐霉素(SAL)联合表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人胃癌细胞株SGC-7901增殖、凋亡能力的影响,并探讨其机制。方法 取对数生长期SGC-7901细胞并分组,联合组分别加入5、10、20、40mg/L的EGCG及2μmol/L的SAL,SAL组加入1、2、4、8μmol/L的SAL,EGCG组加入5、10、20、40mg/L的EGCG,对照组无药物、只加培养液,比较各组药物作用24、48、72h后细胞增殖抑制率。取对数生长期SGC-7901细胞并分组,联合组加入2μmol/L的SAL和10mg/L的EGCG,SAL组加入2μmol/L的SAL,EGCG组加入10mg/L的EGCG,对照组无药物、仅加培养基,比较各组药物作用48h后荧光染色情况及bax、bcl-2mRNA表达情况。结果 SAL、EGCG单药均能抑制SGC-7901细胞增殖,联合用药效果更显著(P<0.05);对照组呈均匀绿色荧光,SAL组和EGCG组出现红色荧光,联合组红色荧光更明显;与对照组比较,联合组baxmRNA相对表达量降低,bcl-2mRNA相对表达量增加(P均<0.05)。结论 SAL、EGCG均能抑制SGC-7901细胞增殖,并诱导凋亡,两者联合应用效果更佳,机制可能与两者可降低bax表达及升高bcl-2表达有关。 展开更多
关键词 盐霉素 表没食子儿茶素没食子酸酯 胃癌 细胞增殖能力 细胞凋亡能力 BAX蛋白 BCL-2蛋白
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PCa组织Mfn2 mRNA表达及转染Mfn2过表达质粒的人PCa细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡观察 被引量:1
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作者 张丽君 李嘉豪 +3 位作者 谢先娇 彭进城 魏灿 方玲 《山东医药》 CAS 2023年第12期6-11,共6页
目的观察前列腺癌(PCa)组织Mfn2 mRNA表达及转染Mfn2过表达质粒的人PCa细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡情况。方法体外培养人PCa细胞株(PC3细胞和DU145细胞),分别转染Mfn2过表达质粒、空白载体质粒及不转染质粒,PC3细胞分别记为A、B、C组,... 目的观察前列腺癌(PCa)组织Mfn2 mRNA表达及转染Mfn2过表达质粒的人PCa细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡情况。方法体外培养人PCa细胞株(PC3细胞和DU145细胞),分别转染Mfn2过表达质粒、空白载体质粒及不转染质粒,PC3细胞分别记为A、B、C组,DU145细胞分别记为D、E、F组。CCK-8实验检测各组细胞OD值,细胞集落形成实验测算各组细胞集落数目,以OD值和细胞集落数目表示细胞增殖能力。细胞划痕实验测算各组细胞迁移率,以细胞迁移率表示细胞迁移能力。Transwell实验测算各组细胞侵袭数目,以细胞侵袭数目数表示细胞侵袭能力。流式细胞术测算各组细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、caspase-3及PI3K/AKT通路相关蛋白(p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT)。结果PCa、癌旁组织Mfn2 mRNA相对表达量分别为0.36±0.32、0.72±0.35,两者比较,P<0.05。与同组24 h比较,A、B、C组48和72 h的OD值增加(P均<0.05);与同组48 h比较,A、B、C组72 h的OD值增加(P均<0.05);与B、C组比较,A组24、48、72 h的OD值和细胞集落数目减少(P均<0.05)。与同组24 h比较,D、E、F组48和72 h的OD值增加(P均<0.05);与同组48 h比较,D、E、F组72 h的OD值增加(P均<0.05);与E、F组比较,D组24、48、72 h的OD值和细胞集落数目减少(P均<0.05)。与B、C组比较,A组细胞迁移率及细胞侵袭数目减少(P均<0.05);与E、F组比较,D组细胞迁移率及细胞侵袭数目减少(P均<0.05)。与B、C组比较,A组细胞凋亡率及Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3/caspase-3表达增加(P均<0.05);与E、F组比较,D组细胞凋亡率及Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3/caspase-3表达增加(P均<0.05);与B、C组比较,A组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达降低(P均<0.05);与E、F组比较,D组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达降低(P均<0.05)。结论PCa组织Mfn2 mRNA的表达低于癌旁组织,转染Mfn2过表达质粒可抑制PCa细胞株增殖、迁移和侵袭,并诱导凋亡,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 线粒体融合蛋白2 前列腺癌 细胞增殖能力 细胞迁移能力 细胞侵袭能力 细胞凋亡能力 PI3K/AKT信号通路
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ESCC组织SNHG17表达及转染si-SNHG17质粒的人食管鳞癌细胞株增殖、凋亡、放射敏感性观察
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作者 易琼 刘璨语 +5 位作者 倪峰 邰国梅 朱琪伟 杨百霞 崔娟娟 王向前 《山东医药》 CAS 2023年第12期16-21,共6页
目的观察食管鳞癌(ESCC)组织小核仁RNA宿主基因17(SNHG17)表达情况及转染si-SNHG17质粒的人ESCC细胞株ECA109增殖、凋亡、放射敏感性。方法取ESCC肿瘤组织与癌旁组织标本各89例份;另取ECA109细胞,并随机分为对照组(Control组,空白培养... 目的观察食管鳞癌(ESCC)组织小核仁RNA宿主基因17(SNHG17)表达情况及转染si-SNHG17质粒的人ESCC细胞株ECA109增殖、凋亡、放射敏感性。方法取ESCC肿瘤组织与癌旁组织标本各89例份;另取ECA109细胞,并随机分为对照组(Control组,空白培养基处理)、si NC组(转染si NC质粒)、si-SNHG17组(转染si-SNHG17质粒)、si-SNHG17+inhibitor NC组(si-SNHG17与inhibitor NC共转染)、si-SNHG17+miR-375 inhibitor组(si-SNHG17与miR-375 inhibitor共转染);采用RT-qPCR法检测ESCC组织、癌旁组织和各组细胞SNHG17、miR-375、USP14 mRNA,CCK-8法检测各组细胞增殖能力(OD值),流式细胞术及Western blot法检测各组细胞凋亡能力[凋亡率及凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Caspase3、USP14蛋白)],克隆形成实验检测各组细胞放射敏感性。双荧光素酶报告基因实验分别验证SNHG17、miR-375及miR-375、USP14的靶向性关系。结果与癌旁组织比较,肿瘤组织中SN⁃HG17、USP14 mRNA表达升高,miR-375表达降低(P均<0.05)。与Control组、si-NC组比较,si-SNHG17组SNHG17表达、OD值、Bcl-2及USP14表达降低,miR-375表达、细胞凋亡率、放射敏感性、Bax及Caspase3蛋白表达升高(P均<0.05)。与si-SNHG17组、si-SNHG17+inhibitor NC组比较,si-SNHG17+miR-375 inhibitor组OD值、Bcl-2及USP14表达升高(P均<0.05),miR-375表达、细胞凋亡率、放射敏感性、Bax及Caspase3蛋白表达降低(P均<0.05)。SN⁃HG17靶向负调控miR-375表达,miR-375靶向负调控USP14表达。结论ESCC组织中SNHG17表达较癌旁组织升高;转染si-SNHG17质粒可抑制ECA109细胞增殖,促进细胞凋亡,增强细胞的放射敏感性,机制可能是上调miR-375来抑制USP14蛋白的表达。 展开更多
关键词 长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因17 食管鳞癌 细胞增殖能力 细胞凋亡能力 细胞放射敏感性 微小RNA-375 USP14蛋白
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抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达及其意义 被引量:31
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作者 朱红霞 王益华 +5 位作者 周翠琦 张果 白瑾峰 全兰平 刘芝华 徐宁志 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期22-24,共3页
目的 检测抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达情况 ,并初步探讨survivin表达与食管癌的关系。方法  2 7例新鲜的食管癌组织提取RNA ,利用半定量RT PCR方法 ,检测食管癌中survivin的mRNA表达水平 ,与其相配对的正常组织进行比较分析... 目的 检测抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达情况 ,并初步探讨survivin表达与食管癌的关系。方法  2 7例新鲜的食管癌组织提取RNA ,利用半定量RT PCR方法 ,检测食管癌中survivin的mRNA表达水平 ,与其相配对的正常组织进行比较分析。通过在食管癌细胞系中转染survivin的显性负突变体 (surT34A) ,观察食管癌细胞在软琼脂中的集落形成能力 ,并利用流式细胞仪分析食管癌细胞对抗凋亡能力。结果  2 7例食管癌组织中 ,有 18例survivin的表达高于配对的正常组织 ,食管癌组织中survivin的表达水平 (2 .0 8± 1.32 )明显高于正常对照组织 (1.2 2± 1.0 9)。在食管癌细胞系中也检测到survivin的表达。转染surT34A的EC970 6细胞在软琼脂中形成的集落数目明显少于对照细胞。survivin过表达可以使得EC970 6细胞在撤血清后凋亡减少 ,而surT34A则使EC970 6细胞凋亡增多。结论 survivin异常高表达与食管癌具有密切相关性。SurT34A可以抑制食管癌细胞的软琼脂集落形成能力 ,并使其对抗凋亡能力减弱 ,部分抑制食管癌细胞的恶性表型。 展开更多
关键词 食管癌细胞 表达 基因 食管癌组织 正常组织 集落形成 凋亡能力 琼脂 突变体 转染
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藏红花素对冻融牛精子获能参数、抗氧化及抗凋亡的影响 被引量:3
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作者 李作臣 陈璇 +3 位作者 汪秋月 高绘杰 张国梁 金一 《东北农业科学》 北大核心 2019年第5期48-52,共5页
本研究的主要目的是评估藏红花素(crocin)对冻融牛精子获能参数、抗氧化及抗凋亡的影响。试验分对照组和藏红花素处理组(浓度分别为0.5、1、1.5和2 mmol/L),样本冻融处理后分别检测了获能参数、抗氧化相关基因及抗凋亡相关基因mRNA的表... 本研究的主要目的是评估藏红花素(crocin)对冻融牛精子获能参数、抗氧化及抗凋亡的影响。试验分对照组和藏红花素处理组(浓度分别为0.5、1、1.5和2 mmol/L),样本冻融处理后分别检测了获能参数、抗氧化相关基因及抗凋亡相关基因mRNA的表达。结果显示:1)0.5 mmol/L处理组冻融牛精子质量较佳,与对照组无显著差异而与其他处理组相比差异显著;(2)0.5 mmol/L处理组冻融牛精子获能处理后蛋白磷酸化水平显著高于其他处组(P<0.05);3)0.5 mmol/L处理组冻融牛精子抗氧化相关基因CAT与GPX基因mRNA的表达量显著高于其它组(P<0.05);4)0.5 mmol/L处理组冻融牛精子凋亡相关基因Caspase-3,TNF-α基因mRNA表达量显著低于其他组(P<0.05)。结论:牛精子冻融前藏红花素处理显著改善冻融牛精子获能参数、抗氧化及抗凋亡能力,添加量0.5 mmol/L藏红花素效果最佳。 展开更多
关键词 牛精子 冷冻保存 藏红花素 磷酸化 抗氧化性 凋亡能力
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促红细胞生成素的心脏保护作用 被引量:3
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作者 陈晓敏 孙仁华 《中西医结合心脑血管病杂志》 2007年第11期1115-1117,共3页
关键词 促红细胞生成素 心脏保护作用 保护作用机制 心血管系统 凋亡能力 血管生成 心肌保护 EPO
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Notch及其配体在血液系统中的作用 被引量:1
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作者 吴颖亚 王季石 《国外医学(输血及血液学分册)》 2005年第5期409-412,共4页
Notch是一组普遍存在于造血干/祖细胞、胚胎肝细胞、外周血淋巴细胞等多种细胞表面的跨膜蛋白。Notch在其配体的作用下可直接作为基因转录调节因子,对造血细胞的增殖、分化与抗凋亡能力起重要调节作用,研究证实Notch及其配体的正常表... Notch是一组普遍存在于造血干/祖细胞、胚胎肝细胞、外周血淋巴细胞等多种细胞表面的跨膜蛋白。Notch在其配体的作用下可直接作为基因转录调节因子,对造血细胞的增殖、分化与抗凋亡能力起重要调节作用,研究证实Notch及其配体的正常表达是机体维持正常造血功能的重要条件,并在部分血液系统恶性疾病包括白血病及淋巴瘤的发生和发展中起重要作用。 展开更多
关键词 NOTCH NOTCH配体 造血系统 血液系统恶性疾病 配体 基因转录调节因子 造血干/祖细胞 外周血淋巴细胞 胚胎肝细胞 凋亡能力
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Expression of galectin-3 correlates with apoptosis in pituitary adenoma cells 被引量:6
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作者 Chui-Xue HUANC Yong-Hong HOU Yun-Sheng LIU 《Neuroscience Bulletin》 SCIE CAS CSCD 2008年第1期34-38,共5页
Objective To investigate the expressions of Galectin-3 (Gal-3), Bcl-2 and Bax in human pituitary adenomas, and to explore the interrelation among them. Methods RT-PCR and immunohistochemistry were applied to detect ... Objective To investigate the expressions of Galectin-3 (Gal-3), Bcl-2 and Bax in human pituitary adenomas, and to explore the interrelation among them. Methods RT-PCR and immunohistochemistry were applied to detect the mRNA and protein expressions of Gal-3, Bcl-2 and Bax in surgically excised human pituitary adenoma tissues, including invasive and non-invasive pituitary adenomas, and the correlation analysis was performed. Results The Gal-3 and Bcl-2 expressions in the invasive pituitary group were significantly higher than those in the non-invasive group, and the expression of Bax had no significant difference between the two groups. Pearson's correlation analyses showed that the Gal-3 expression was posi- tively correlated with Bcl-2, but was not correlated with Bax, which was inversely correlated with expression of Bcl-2. Conclusion Gal-3 may function through a cell death inhibition pathway involving Bcl-2 to enhance cell proliferation, which result in the invasive growth of pituitary adenoma. These results indicate that Gal-3 has an important role in pituitary tumor cell proliferation and may serves as a possible therapeutic target in treatment of pituitary tumors. 展开更多
关键词 pituitary neoplasma GALECTIN-3 APOPTOSIS INVASIVENESS
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Autophagy Enhances the Aggressiveness of Human Colorectal Cancer Cells and Their Ability to Adapt to Apoptotic Stimulus 被引量:10
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作者 Hai-yang Zheng Xiao-yang Zhang +1 位作者 Xing-fen Wang Bao-cun Sun 《Clinical oncology and cancer researeh》 CAS CSCD 2012年第2期105-110,共6页
Objective To investigate LC3B-Ⅱand active caspase-3 expression in human colorectal cancer to elucidate the role of autophagy and to explore the relationship of autophagy with apoptosis in human colorectal cancer. Met... Objective To investigate LC3B-Ⅱand active caspase-3 expression in human colorectal cancer to elucidate the role of autophagy and to explore the relationship of autophagy with apoptosis in human colorectal cancer. Methods LC3B expression was detected by immunohistochemistry in 53 human colorectal cancer tissues and 20 normal colon tissues.The protein levels of LC3B-Ⅱand active caspase-3 were also determined by Western blot analysis in 23 human colorectal cancer tissues and 10 normal colon tissues. Results LC3B was expressed both in cancer cells and normal epithelial cells.LC3B expression in the peripheral area of cancer tissues was correlated with several clinicopathological factors,including tumor differentiation(P=0.002),growth pattern of the tumor margin (P=0.028),pN(P=0.002),pStage(P=0.032),as well as vessel and nerve plexus invasion(P=0.002).The protein level of LC3B-Ⅱin cancer tissue was significantly higher than in normal tissue(P=0.038),but the expression of active forms of procaspase-3 in cancer tissue was lower(P=0.041).There was a statistically significant positive correlation between the expression levels of LC3B-Ⅱand the active forms of procaspase-3(r=0.537,P=0.008). Conclusions Autophagy has a prosurvival role in human colorectal cancer.Autophagy enhances the aggressiveness of colorectal cancer cells and their ability to adapt to apoptotic stimulus. 展开更多
关键词 AUTOPHAGY apoptosis colorectal neoplasms LC3B caspase-3
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弥漫性大B细胞淋巴瘤中转录因子Twist、ZEBl和Slug的生物学作用和预后价值
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作者 刘勇 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期502-502,共1页
上皮间质转化( epithelial-mesenchymal transition, EMT)在胚胎发育过程中具有十分重要的地位,在调控正常人体组织和肿瘤组织的细胞可塑性(cellularplasticity)方面也起到了关键作用。发生EMT的细胞可以失去上皮细胞的某些特性,... 上皮间质转化( epithelial-mesenchymal transition, EMT)在胚胎发育过程中具有十分重要的地位,在调控正常人体组织和肿瘤组织的细胞可塑性(cellularplasticity)方面也起到了关键作用。发生EMT的细胞可以失去上皮细胞的某些特性,如细胞问的黏附性、细胞极性、表达E—cadherin等表型,获得间质细胞的特征,如细胞具备运动能力、侵袭能力、抗凋亡能力等。EMT过程是一个非常复杂的分子过程,多种信号都能够触发EMT过程,如生长因子、肿瘤细胞与间质细胞间的相互作用以及缺氧等,各种能触发EMT过程的信号和转录因子构成了一个信息网络,其中Twist、ZEBl和Slug是直接或间接抑制E-cadherin表达和调节细胞抗凋亡及运动的3种重要转录因子。EMT与上皮性肿瘤的相关性研究非常多,对于肿瘤浸润、转移以及对药物治疗的抗性等都有作用,但在淋巴造血肿瘤中研究很少。 展开更多
关键词 弥漫性大B细胞淋巴瘤 转录因子 E-CADHERIN表达 生物学作用 预后价值 上皮间质转化 凋亡能力 胚胎发育过程
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Survivin及Survivin-3B基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达及意义
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作者 潘慧星 瞿平 +1 位作者 侯建全 何军 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期75-75,共1页
Survivin是凋亡抑制蛋白家族中结构最简单、抗凋亡能力最强的蛋白分子。Survivin基因参与了膀胱移行细胞癌(TCC)的发生发展,与TCC的恶性程度、临床病理分级密切相关。而Sruivin-3B作为Survivin的异构体之一,对凋亡抑制起着重要的作... Survivin是凋亡抑制蛋白家族中结构最简单、抗凋亡能力最强的蛋白分子。Survivin基因参与了膀胱移行细胞癌(TCC)的发生发展,与TCC的恶性程度、临床病理分级密切相关。而Sruivin-3B作为Survivin的异构体之一,对凋亡抑制起着重要的作用。本研究旨在观察正常膀胱黏膜和膀胱癌组织中Survivin及Survivin-3B基因的表达。 展开更多
关键词 SURVIVIN基因 膀胱移行细胞癌 膀胱癌组织 B基因 抑制蛋白家族 凋亡能力 蛋白分子 恶性程度
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