麦角胺联合奥沙利铂诱导骨肉瘤细胞增殖和凋亡行为变化

目的探讨麦角胺与奥沙利铂联合应用对骨肉瘤细胞的影响。方法通过使用麦角胺和奥沙利铂分别或联合作用于骨肉瘤细胞,分为空白对照组、麦角胺组、奥沙利铂组和联合用药组。采用细胞增殖实验检测不同处理对骨肉瘤细胞增殖情况的影响;通过克隆形成检测不同处理对骨肉瘤细胞增殖能力的影响;通过细胞凋亡实验检测不同处理对骨肉瘤细胞凋亡行为的影响;Transwell细胞侵袭实验检测不同处理对骨肉瘤细胞侵袭行为的影响;裸鼠成瘤实验检测不同处理对骨肉瘤细胞侵袭行为的影响;Western blot检测PCNA蛋白水平。结果与空白对照组相比,麦角胺、奥沙利铂或联合用药均可抑制骨肉瘤细胞的生长[(1.54±0.23)vs(1.28±0.19)vs(0.78±0.12)vs(0.34±0.08),P<0.01];与空白对照组相比,麦角胺和奥沙利铂处理组中的骨肉瘤细胞集落明显减少,麦角胺和奥沙利铂联合应用时,细胞集落数明显少于单用麦角胺和奥沙利铂[(146.7±17.9)vs(41.2±6.6)vs(38.4±7.1)vs(12.6±4.3),P<0.05];与空白对照组相比,麦角胺和奥沙利铂处理组中的骨肉瘤凋亡细胞数目明显减少,麦角胺和奥沙利铂联合应用时,细胞凋亡数目明显多于单用麦角胺和奥沙利铂[(0.80±0.10)%vs(8.31±0.12)%vs(11.62±1.39)%vs(18.32±3.16)%,P<0.05];与空白对照组相比,麦角胺和奥沙利铂处理组中的骨肉瘤侵袭细胞数目明显减少,麦角胺和奥沙利铂联合应用时,细胞侵袭数目明显少于单用麦角胺和奥沙利铂[(121.3±11.3)vs(68.1±7.6)vs(64.2±7.1)vs(24.6±2.6),P<0.05];与空白对照组相比,麦角胺组裸鼠移植瘤的体积和肿瘤均明显缩小[体积(3.16±0.31)cm^3 vs(0.75±0.13)cm^3,P<0.05;重量(3.08±0.24)g vs(0.69±0.13)g,P<0.05],与空白对照组相比,麦角胺组、奥沙利铂组和联合用药组PCNA蛋白的水平均明显降低[(8.14±0.46)vs(6.32±0.27)vs(3.18±0.19)vs(1.99±0.19),P<0.05]。结论麦角胺可显著促进骨肉瘤细胞的凋亡行为,进而抑制其增殖与侵袭,与药物奥沙利铂联合使用效果更佳。

长链非编码RNA FILNC1靶向调控c-Myc表达对肾细胞癌生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA FILNC1靶向c-Myc的表达调控肾细胞癌的生物学行为。方法q PCR检测FILNC1在肾细胞癌组织和不同肾细胞癌细胞株中的表达情况;双荧光素酶报告基因检测FILNC1与c-Myc之间的相互作用;Western blot实验检测FILNC1对c-Myc蛋白的调控作用;MTT细胞增殖实验检测FILNC1和c-Myc对肾细胞癌细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测FILNC1和c-Myc对肾细胞癌细胞凋亡行为的影响;裸鼠成瘤实验检测FILNC1对肾细胞癌裸鼠移植瘤的影响。结果与其他肾细胞癌细胞株相比,A498细胞中FILNC1的表达水平明显较高;双荧光素酶实验证实FILNC1可直接调控c-Myc的表达,抑制FILNC1和c-Myc的表达可以减弱肾细胞癌细胞的增殖能力,促进细胞的凋亡;抑制FILNC1的表达后肾细胞癌细胞在裸鼠体内异种移植能力受到一定的抑制。结论 FILNC1可以靶向调节c-Myc的表达影响肾细胞癌细胞的增殖与凋亡。

基于网络药理学和斑马鱼模型的金盏菊缓解阿尔茨海默病症状及作用机制

目的本实验基于网络药理学和体内实验验证,拟探讨金盏菊改善阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)的效果和作用机制。方法利用TCMSP、UniProt、DISGENET等数据库收集并筛选金盏菊活性成分及靶点、AD靶点等信息,构建金盏菊活性成分-靶点-AD网络和蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,采用Metascape数据库对潜在作用靶点进行基因本体论(gene ontology,GO)富集分析。基于斑马鱼AD模型,通过行为学实验探究金盏菊缓解AD样症状效果,利用脑部凋亡检测、qRT-PCR验证其作用机制。结果网络药理学结果显示,CASP3(caspase-3)、VEGFA、TNF是金盏菊抗AD的关键靶点。体内实验证实了金盏菊抗AD活性,并揭示其作用机制与抗凋亡相关。结论本研究揭示了金盏菊抗AD的多成分、多靶点作用特点,对其改善效果和作用途径进行了验证,为AD防治和金盏菊活性开发提供新思路。

葛根素下调基质金属蛋白酶-16表达影响乳腺癌细胞的生物学行为

目的:探讨葛根素通过下调基质金属蛋白酶-16(matrix metalloproteinase-16,MMP-16)表达抑制MCF-7乳腺癌细胞的增殖并促进细胞凋亡行为的调控及其机制。方法:qPCR检测不同浓度的葛根素对乳腺癌细胞的活性影响情况;分析葛根素对乳腺癌细胞增殖行为的影响情况;流式细胞术实验检测葛根素对乳腺癌细胞周期的影响;Western blotting实验检测葛根素对乳腺癌细胞中基质金属蛋白酶-16表达情况的影响。结果 :1μmol·L-1的葛根素对乳腺癌细胞的活力的抑制作用最佳;随着时间的进展,葛根素对乳腺癌细胞的增殖能力的直接抑制作用,可以在一定程度上干扰乳腺癌细胞的生长进程;葛根素对乳腺癌细胞的凋亡行为有一定的促进作用;合适浓度葛根素对乳腺癌细胞中MMP-16蛋白有直接的干扰作用。结论:葛根素通过下调基质金属蛋白酶-16表达抑制MCF-7乳腺癌细胞的增殖并促进细胞凋亡行为。