凋亡诱导因子2在乳腺癌中的表达及其相关作用

目的 利用生物信息学方法分析凋亡诱导因子2(apoptosis-inducing factor 2,AIFM2)在乳腺癌患者肿瘤组织中的表达及作用机制。方法 检索GEPIA、Kaplan-Meier Plotter、UALCAN数据库中AIFM2的研究信息,分析该基因在乳腺癌中的表达。利用Kaplan-Meier方法分析AIFM2的表达与乳腺癌患者生存及临床病理因素间的关系。同时应用LinkedOmic数据库筛选与AIFM2共同表达的基因,并对靶标基因进行基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,并通过肿瘤免疫评估资源(tumor immune estimate resource,TIMER)数据库探究AIFM2表达与肿瘤组织中免疫细胞浸润的相关性。结果 GEPIA数据库分析发现AIFM2基因在乳腺癌组织中的表达显著低于癌旁组织(P<0.05);Kaplan-Meier Plotter数据库生存分析显示AIFM2基因高表达患者组的无复发生存期、总生存期、远处无转移生存期均显著高于低表达患者组(P<0.05);UALCAN数据库分析显示乳腺癌中AIFM2基因在不同人种、分子分型、组织类型表达水平不同(P<0.05);在不同年龄、性别、分期、TP53突变、围闭经期状态和淋巴结转移中表达水平无差异(P>0.05);LinkedOmic数据库对AIFM2的共表达基因进行GO和KEGG富集分析发现AIFM2可能参与乳腺癌免疫反应的调节;TIMER数据库分析显示乳腺癌中AIFM2的表达水平与CD4^(+)T细胞、中性粒细胞、树突状细胞的浸润正相关(P<0.05);在乳腺癌中低水平的浸润性CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、中性粒细胞和树突状细胞与较差的存活率显著相关(P<0.05)。结论 在乳腺癌中AIFM2的表达与肿瘤组织中免疫细胞浸润有关。AIFM2基因可能成为潜在的乳腺癌免疫治疗靶点。

抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体2嵌合抗体表达载体的构建、表达及其抗肿瘤活性分析

目的:构建抗人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体2(死亡受体5,DR5)的人-鼠嵌合抗体表达载体,获得稳定表达该嵌合抗体的细胞株,并分析嵌合抗体的抗肿瘤活性。方法:采用DNA重组技术,扩增抗人DR5的鼠源单克隆抗体(mAb)AD5-10的重链(HC)、轻链(LC)可变区基因片段,并将其分别插入含有人IgG重链、轻链恒定区基因的真核表达载体RpCI-neo,以重、轻链表达质粒共转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),筛选稳定表达抗人DR5嵌合抗体(hmAD5-10)的重组细胞。采用Western blot和间接ELISA检测嵌合抗体的表达量及其与抗原DR5的结合活性。采用MTS比色法检测嵌合抗体的生物学活性。并对重组细胞株进行无血清培养驯化。结果:获得了2株稳定表达嵌合抗体的重组细胞株CHO-A5和CHO-B11,抗体的表达水平分别为(0.36±0.11)mg/L和(0.16±0.01)mg/L,嵌合抗体与DR5有较好的结合活性,对体外培养的人T淋巴细胞白血病细胞SVT35有显著的杀伤作用。结论:在真核细胞中表达了具有生物学活性的抗DR5的人-鼠嵌合抗体,为其应用于肿瘤治疗研究奠定了基础。

心肌梗死介入治疗后sTRAIL-R2表达与颈动脉斑块细胞凋亡及炎症反应的相关性

目的探究心肌梗死患者介入治疗后可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体2(sTRAIL-R2)表达与颈动脉斑块细胞凋亡及炎症反应的相关性。方法选择2021年1月至2022年5月该院收治的心肌梗死行介入治疗后患者102例作为研究对象,对其行颈动脉内膜切除术获取颈动脉斑块片段,根据sTRAIL-R2表达水平分为sTRAIL-R2高表达组和sTRAIL-R2低表达组。检测患者斑块组织Bax、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-8、Caspase-3活性,CD45、CD68表达水平及白细胞介素(IL)-6、IL-10、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和IL-1β水平,检测患者斑块组织细胞凋亡相关蛋白表达并分析sTRAIL-R2表达水平与患者斑块组织细胞凋亡、炎症反应的相关性。结果sTRAIL-R2高表达组患者斑块组织Caspase-8、Caspase-3活性,Bax、Caspase-3蛋白表达水平,CD45、CD68阳性细胞检出数,IL-6、IL-10、CRP、TNF-α、IL-1β水平均高于sTRAIL-R2低表达组,B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达水平低于sTRAIL-R2低表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。sTRAIL-R2表达水平与Caspase-8、Caspase-3活性,CD45、CD68、IL-6、IL-10、CRP、TNF-α、IL-1β水平与Bax、Caspase-3蛋白表达水平均呈正相关,与Bcl-2蛋白表达水平呈负相关(P<0.05)。结论sTRAIL-R2高表达可引起颈动脉粥样硬化斑块组织Caspase-8、Caspase-3活性升高,细胞凋亡相关蛋白表达水平上调,并引起斑块炎症反应加剧,可能导致易损斑块出现。

铁死亡抑制蛋白1在人类疾病中的作用机制研究进展

铁死亡抑制蛋白1(FSP1)是新近被证实的铁死亡抑制因子,与乳腺癌、卵巢癌、肺癌、肝细胞癌、黑色素瘤、淋巴瘤、白血病、铜耐受、重症急性胰腺炎、糖尿病等疾病的发生发展密切相关。有研究发现,FSP1基于其氨基酸系列C末端片段、核易位、过表达等因素诱导非caspase依赖性的细胞凋亡,并可通过FSP1-CoQ_(10)-NAD(P)H途径、平行于经典的谷胱甘肽(GSH)-GPX4途径使细胞免于铁死亡,在细胞生命活动中发挥"双刃剑"的作用。该文综述目前FSP1在人类疾病中作用机制的研究进展,以期为疾病防治提供新的靶标。

铁死亡抑制蛋白1:心肌再灌注损伤的潜在治疗靶点

铁死亡抑制蛋白1(ferroptosis suppressor protein 1,FSP1)是新近发现的铁死亡抑制因子,又是一种具有烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADH)氧化还原酶特性的黄素蛋白,具有参与活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成及促进线粒体电子传递等功能。研究表明FSP1与乳腺癌、类风湿性关节炎、重症胰腺炎、帕金森综合征等人类疾病相关,根据FSP1的功能特性,推测FSP1是未来心肌缺血再灌注损伤的潜在治疗靶点,本文对FSP1的功能特性及与心肌再灌注损伤的相关性进行总结,为未来疾病的治疗提供新的思路。

矽肺病患者肺泡巨噬细胞死亡受体表达及意义

目的探讨矽肺病患者肺泡巨噬细胞(AM)死亡受体(DR)的表达水平及其与肺纤维化程度的关系。方法以61例进行肺灌洗的汉族男性观察对象及矽肺病患者为观察组,以13例肺部X射线表现完全正常的汉族男性为对照组,分离、纯化及培养各研究对象的AM,检测3种DR[凋亡蛋白-1(Fas)、肿瘤坏死因子受体-1(TNFR1)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体-2]的表达水平,采用酶联免疫吸附试验检测AM培养上清中的可溶性DR(sDR)水平,采用免疫印迹法检测AM裂解液中3种膜结合型DR(mDR)水平,分析DR表达水平与粉尘接触各因素的关系。结果矽肺病患者膜结合型Fas(mFas)及膜结合型TNFR1(mTNFR1)的相对水平均高于对照组及观察对象(P<0.05),且随着肺部病变的加重而升高;矽肺病患者可溶性Fas(sFas)及可溶性TNFR1(sTNFR1)水平均低于观察对象(P<0.05),且sFas随着肺部病变的加重而下降。结论矽尘诱导的mFas和mTNFR1表达上调、sFas表达下调在矽肺病发病及进展中起重要作用,DR信号通路活化可能是矽肺病发病的重要机制之一。