Stefin蛋白对人工感染豆状囊尾蚴家兔的免疫保护作用

检测重组蛋白Cpstefin免疫家兔的抗体消长水平并验证其对豆状囊尾蚴感染的免疫保护效果。将本实验室保存的转化重组质粒pGEX-4T-Cpstefin的BL21(DE3)菌种活化,采用IPTG诱导表达后收集菌体进行SDS-PAGE分析鉴定后,运用GST琼脂糖树脂纯化Stefin蛋白,检测重组蛋白浓度。将测定好浓度的重组蛋白分别与弗氏佐剂、206佐剂、氢氧化铝佐剂按1∶1体积比充分乳化后免疫家兔。首次免疫300μg/只,加强免疫200μg/只,每次免疫间隔7 d,共免疫3次,并于第2次加强免疫1周后检测家兔外周血液抗体水平。免疫第30天每只家兔经口感染2000个豆状带绦虫虫卵,攻虫后第58天将家兔安乐死,计数囊荷数并计算各免疫组的减囊率。攻虫后每7 d耳缘静脉采血,检测血清抗体水平。结果显示,对各组家兔注射重组蛋白抗原后,免疫组家兔抗体水平开始升高,经口感染虫卵后,免疫组抗体水平有所下降,但D_(492 nm)值仍保持在2.50以上。剖检家兔计算减囊率,弗氏佐剂组、206佐剂组、氢氧化铝佐剂组减囊率分别为76.70%、66.02%和54.37%。结果表明,豆状囊尾蚴Cpstefin重组蛋白对实验感染豆状囊尾蚴家兔具有免疫保护作用。