近红外光谱双模型法快速判别雷公藤去皮减毒工艺的水平

目的:利用近红外光谱法和化学计量学分析软件,建立快速判别雷公藤真伪的一致性模型和雷公藤去皮减毒工艺水平的相关系数模型。方法:收集雷公藤切片和打粉样本的近红外漫反射光谱,运用OPUS软件分别建立其一致性模型和相关系数模型,并用非雷公藤样本及去皮减毒不完全样本进行验证。结果:基于近红外光谱法建立了快速判别雷公藤样本的近红外光谱双模型:可以快速、准确地判断被测样本是否为雷公藤;可以判断雷公藤样本的去皮减毒工艺水平。结论:该方法建立的近红外光谱双模型法易于操作、快速有效,可作为判断雷公藤去皮减毒工艺水平的快速筛查方法。

补骨脂的质量特征解析及其在减毒工艺中的应用

补骨脂Psoraleae Fructus为临床常用中药,是补益类中成药或方剂中的重要组成药味。近年来,补骨脂的肝毒性对其临床用药安全构成威胁,阻碍了含补骨脂方剂的中药新药开发,限制了补骨脂及其中成药的临床应用。通过对补骨脂的化学成分及药理活性,果皮和种子中的化学成分分布特征,在生长、贮藏、加工炮制过程中补骨脂香豆素类成分转化特征,香豆素类成分体内代谢转化特征及潜在的肝毒性成分等质量特征及其在补骨脂减毒工艺中的应用分析,为补骨脂及含补骨脂中成药的提取工艺、质量标准研究提供参考。

白芍药汁炙黄药子的炮制减毒工艺及其机制研究

该研究首次探究白芍药汁炙黄药子的炮制减毒工艺,并进一步探索其减毒机制。采用3因素3水平正交试验法制备白芍药汁炙黄药子炮制品9个,以高效液相测定黄药子炮制前后主要肝毒性成分黄独素B含量下降为依据进行减毒工艺的初步筛选,在此基础上,选取黄药子生品及代表性的炮制品以2 g·kg^(-1)(相当于临床等效剂量)灌胃给予小鼠21 d,末次给药24 h后,取血清和肝组织,结合反映肝功能的血清生化指标及肝脏组织病理进一步筛选验证工艺,然后借助试剂盒法检测肝组织脂质过氧化及抗氧化指标,蛋白免疫印迹法检测小鼠肝脏醌氧化还原酶(NADPH quinone oxidoreductase 1,NQO1)和谷氨酸半胱氨酸连接酶(glutamate-cysteine ligase,GCLM)蛋白表达进一步探究炮制减毒机制。结果表明白芍药汁炙黄药子各炮制品均能不同程度降低黄独素B的含量并改善黄药子诱导的肝损伤,其中A_(2)B_(2)C_(3)炮制工艺能使黄药子生品诱导的过高的谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)水平分别降低50.2%和42.4%(P<0.01,P<0.01),白芍药汁炙黄药子炮制品能不同程度逆转黄药子生品诱导的小鼠肝脏NQO1和GCLM的蛋白表达水平的降低(P<0.05或P<0.01),并能不同程度逆转小鼠肝脏丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平的升高以及谷胱甘肽(glutathione,GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX)、谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)水平的降低(P<0.05或P<0.01)。综上,该研究表明白芍药汁炙黄药子的最佳炮制减毒工艺为A_(2)B_(2)C_(3)组合,即“10%的白芍药汁闷润黄药子饮片,在130℃炮制11 min”,并且减毒机制涉及增强肝脏NQO1和GCLM抗氧化蛋白表达及相关抗氧化酶水平。

从黄独素B含量差异分析评价绿豆药汁制黄药子的炮制减毒工艺

目的通过毒性成分黄独素B含量差异分析初评绿豆药汁制黄药子的炮制减毒作用及其工艺。方法以绿豆质量分数(A)、闷润时间(B)、炮制温度(C)、炮制时间(D)为因素,采用L9(34)正交试验设计制备绿豆药汁制黄药子各炮制品,以C_(18)反相色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)、流动相乙腈-水(28∶72)、进样量10μL、流速1.0 mL·min^(-1)、柱温为30℃、检测波长210 nm为色谱条件,通过高效液相色谱法对黄药子生品及其正交试验设计下的各炮制品中黄独素B含量的检测分析,初评绿豆药汁制黄药子的炮制减毒作用及其工艺。结果黄药子生品中毒性成分黄独素B含量为1.813 mg·g^(-1),正交试验设计下绿豆药汁制黄药子各炮制品中毒性成分黄独素B的含量在1.228~1.629 mg·g^(-1),较黄药子生品中显著下降10.18%~32.26%(P<0.01),其中尤以A3B1C3D2工艺下的绿豆药汁制黄药子炮制下降32.26%为最优。结论从毒性成分黄独素B含量差异层面表明,绿豆药汁制黄药子具有炮制减毒作用,A3B1C3D2是其最佳炮制减毒工艺。

正交试验优选甘草制款冬花的炮制减毒工艺

目的:优选甘草制款冬花的炮制减毒工艺,为款冬花的炮制生产工艺提供参考。方法:以总生物碱含量为指标,甘草水煎煮次数、烘制温度及甘草用量(甘草质量/款冬花质量)为考察因素,采用正交试验对甘草制款冬花的减毒工艺进行优选,考察款冬花甘草制品中有效成分含量的变化。结果:款冬花甘草制最佳减毒工艺条件为甘草用量10%,水煎煮数3次,烘制温度90℃;甘草制款冬花中总生物碱、款冬酮及醇浸出物质量分数分别为0.080 3 mg·g-1,0.161%,26.31%。结论:与生品相比,款冬花甘草制品中总生物碱含量显著减少,款冬酮和醇浸出物含量增加。优选的款冬花甘草制减毒工艺稳定可行,提示甘草汁制款冬花有一定的合理性,具有实际应用意义。

金钱草煎汤炒炙雷公藤的炮制减毒工艺研究

该文主要优选金钱草煎汤炙雷公藤的炮制减毒工艺。以金钱草质量分数、闷润时间、炒炙时间、炒炙温度,按照4因素3水平正交试验设计表制备金钱草煎汤炙雷公藤炮制品共9个,HPLC测定炮制前后雷公藤中主成分雷公藤甲素(triptolide)的质量分数分别为4.27,3.92,3.57,2.75,2.42,2.66,3.51,1.87,1.75,2.03μg·g^(-1)。在此基础上,将以上各炮制品分别口服给予小鼠28 d,末次给药后12 h禁食不禁水,24 h后摘眼球取血清和肝组织,依据试剂盒方法检测血清生化指标以及肝组织脂质过氧化和抗氧化相关指标。雷公藤生品口服给予28 d后,诱导了小鼠的血清肝功指标谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)以及肝脂质过氧化产物(MDA)的水平分别显著升高了91%(P<0.01),46%(P<0.05),73%(P<0.01)和99%(P<0.01),肝抗氧化指标超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽-S转移酶(GST)的水平均显著降低(P<0.01);而各炮制品给药后,以上指标的异常均被显著逆转(P<0.01或P<0.05),其中尤以在因素水平为A_(3)B_(2)C_(1)D_(3)的工艺条件下对雷公藤的炮制减毒作用最佳,能使雷公藤引起的过高的AST,ALT,ALP,MDA水平分别降低49%(P<0.01),32%(P<0.01),42%(P<0.01),17%(P<0.05)。因此,金钱草煎汤炙雷公藤炮制减毒的最佳工艺条件为A3B2C1D3,即"金钱草质量分数15%,闷润时间1 h,炒炙温度160℃,炒炙时间9 min"。

北细辛饮片炮制工艺与药材质量相关性研究

为规范北细辛饮片的炮制工艺,考察饮片的减毒工艺,本研究以药材润洗时间、浸泡时间、干燥方式(阴干和烘干)、干燥温度、干燥时间为考察因素,以马兜铃酸I、细辛脂素、浸出物、含水量和挥发油为指标,确定北细辛饮片的炮制工艺参数。结果表明,北细辛药材经过5 min润洗、24.6℃阴干24 h或5 min润洗、25.0～35.0℃8 h烘干,即可得到符合要求的北细辛饮片;将北细辛药材的润洗时间增加至48 h,24.6℃阴干48 h,可作为北细辛饮片的减毒工艺。本试验研究的炮制工艺在实际生产中更具实用性,同时,通过调整炮制参数也可降低饮片中马兜铃酸I的含量,实现减毒的作用。

基于NF-κB/COX-2信号通路探讨金钱草煎汁炙法炮制降低雷公藤肾毒的机制

目的基于降低肾毒性并采用正交试验设计法优选金钱草煎汁炙法炮制降低雷公藤肾毒性的工艺,并初步探索其减毒机制。方法按照L9(34)正交试验表制备金钱草煎汁炙雷公藤炮制品共9个,通过动物实验肾功能血清生化指标、筛选金钱草煎汁炙雷公藤的最佳减毒工艺,并借助毒性靶器官肾的炎症相关指标的分析比较以及蛋白免疫印迹法进一步探讨其减毒作用机制。结果雷公藤生品口服给予28 d后,诱导了小鼠的血清肾功指标血尿素氮(BUN),肌酐(Cr)的水平分别显著升高了187.0%(P<0.01)和62.9%(P<0.05),肾脏促炎性细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平均显著升高(P<0.01),Western blot分析显示雷公藤给药诱导小鼠肾组织核因子-κB(NF-κB)磷酸化蛋白和环氧合酶-2(COX-2)表达水平分别显著升高了38.0%和72.7%(P<0.05)。经各炮制品给药后,对雷公藤生品引起的以上指标的异常均有不同程度地逆转作用(P<0.01或P<0.05)。其中最佳工艺A3B1C3D2组能使雷公藤引起的过高的BUN,Cr,TNF-α,IL-1β水平分别降低60.1%(P<0.01),28.4%(P<0.05),40.6%(P<0.01),37.5%(P<0.01);NF-κB磷酸化蛋白和COX-2表达水平分别显著降低了31.5%(P<0.05)和56.5%(P<0.01)。结论金钱草煎汁炙雷公藤炮制降低了雷公藤的肾毒性,其中以A3B1C3D2工艺(金钱草用量15%,闷润时间0.5h,炮制温度130℃,炮制时间15min)条件下的减毒作用为佳,其减毒机制涉及抑制雷公藤诱导的炎症反应。