凝乳酶的研究进展

传统干酪制作使用的凝乳酶来源于小牛皱胃,目前小牛皱胃酶的供应量仅能满足世界干酪产量所需凝乳酶的20%~30%。小牛皱胃酶的供需矛盾和价格高昂等因素,使得寻求其替代物成为乳品领域科学研究的热点之一。本文首先介绍了小牛皱胃酶的研究现状,其次从动物、植物、基因重组以及微生物来源,综述了不同凝乳酶之间酶性质差异以及凝乳酶在干酪应用中的研究,旨在为凝乳酶的研究提供一定的理论参考,为寻找凝乳酶替代物提供思路。

Paenibacillus spp.BD3526发酵小麦麸皮生产凝乳酶

对Paenibacillus spp.BD3526凝乳酶的发酵条件和凝乳性能进行了研究,探讨了不同培养基、发酵时间、碳源、氮源和装液量对凝乳酶活力和活菌数的影响,并与商业化的小牛皱胃酶、重组凝乳酶、Rhizomucor miehei来源凝乳酶进行凝乳性能比较。实验结果表明:发酵时间、碳源、氮源和装液量对BD3526凝乳酶活力(milkclotting activity,MCA)和蛋白水解活力(proteolytic activity,PA)均有不同程度的影响。选用小麦麸皮培养基进行发酵至24 h时,MCA达到最大至3 279.76±67.11 SU/m L,凝乳性能强,PA值在整个发酵期间变化不大;添加碳源或氮源会不同程度地降低MCA值;装液量为30 m L时,发酵上清液中菌体浓度最高、MCA达到6 000 SU/m L。与商业化的凝乳酶相比,BD3256凝乳酶在凝乳过程中未使凝乳块产生过度水解,也无乳清析出现象,具有应用到干酪生产中的潜力。

Bacillus licheniformis产凝乳酶培养基的优化

以Bacillus licheniformis为研究对象,通过单因素试验结合正交设计对其产凝乳酶培养基成分进行了优化,得到培养基成分最优组合为麸皮汁浓度16%,葡糖糖浓度为7%,酪蛋白添加量为5%,氮源添加量为5%,优化后凝乳酶活力可达134.72SU/mL,比原来提高39.93%。

原核表达重组牛凝乳酶原及重组牛凝乳酶酶学特性

摘要凝乳酶能够专一性裂解κ-酪蛋白，是制造干酪的关键酶。运用大肠杆菌表达系统对牛凝乳酶原进行了原核表达和初步纯化，活化重组凝乳酶原及测定凝乳活性，对重组凝乳酶的酶学特性进行分析。结果表明i大肠杆菌表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的66．3％，每升培养液可纯化约200mg的重组凝乳酶原，活化后的凝乳酶活力可达600000SU／g。经测定凝乳酶最适作用温度为57～62℃，并在pH2～7、低于40℃的温度范围内稳定。金属离子中Al3＋，Fe3＋和Cu2＋能显著增强酶活；胃蛋白酶抑制剂pepstatinA对酶有明显的抑制作用。

类芽孢杆菌发酵液提取凝乳酶方法研究

对类芽孢杆菌BD3526产凝乳酶的发酵工艺条件优化进行研究,考察了发酵时间、摇床转速和接种量对发酵上清液中凝乳酶活力、多糖含量以及黏度的影响,同时比较分析了不同饱和度的硫酸铵对凝乳酶的提取效果。结果发现:当接种量为体积分数0.8%,摇床转速为160 r/min,发酵时间为72 h时,发酵上清液中多糖含量和黏度均降低到最低值,分别为1.33 mg/m L和8 m Pa·s,而凝乳酶活力未显著降低。选用饱和度60%的硫酸铵对凝乳酶进行提取,可有效地降低沉淀物中多糖含量,减少对后期分离纯化的影响,保证了较高的凝乳酶回收率。

Q303根霉种曲中高活性凝乳酶特性及新型乳制品的研究

通过Q303根霉三级种、3866根霉三级种、冷干Q303根霉三级种、Q303根霉四级种及其对应产品所酿醪糟浸出液与奶粉发生凝乳反应的各种因素试验发现,高活性凝乳酶活力除了与温度、pH值、添加量等因素有关外,还与制成曲的干燥工艺有关,同时利用酿醪糟浸出液的凝乳特性开发新型风味乳制品,可为凝乳酶生产菌种的选育提供资源及制备方法。