乳腺增生组织蛋白质组的凝胶内差异显示电泳分析

目的：建立具有高分辨率和稳定性的乳腺增生组织蛋白质组的双向电泳图谱,并对其进行差异蛋白质组分析。方法：取乳腺增生病患者增生部位及正常部位乳腺组织,匀浆提取乳腺组织总蛋白,分别用Cy3或Cy5标记,每一对Cy3和Cy5标记样品都与一个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱经DeCyder软件进行分析。结果：在乳腺增生病增生的组织中,有12个蛋白质表达水平显著增加,另外3个蛋白质表达水平显著下降。结论：利用DIGE技术可以作胶内对比分析,也可以根据内标消除胶与胶之间的差异,提高统计的可信度；分析所得的15个差异蛋白质可能与乳腺增生疾病的发生与发展有关。

两种蝮蛇毒的蛋白质组凝胶内差异显示电泳分析

目的:建立具有高分辨率和稳定性的江浙蝮蛇毒与白眉蝮蛇毒蛋白质组的双向电泳图谱,并对其进行差异蛋白质组分析。方法:取江浙蝮蛇毒与白眉蝮蛇毒,分别用Cy3和Cy5标记,将所有的实验样品等量混合而组成内标,用Cy2标记,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱经DeCyder软件分析。结果:江浙蝮蛇毒与白眉蝮蛇毒共有457个蛋白质表达水平相似;较白眉蝮蛇毒,江浙蝮蛇毒有97个蛋白质表达水平显著较好,另外119个蛋白质表达水平显著较低。结论:江浙蝮蛇毒与白眉蝮蛇毒所含蛋白质组具有较大差异,应用时应加以区别。

乳腺纤维瘤蛋白质组的凝胶内差异显示电泳分析

目的:建立具有高分辨率和稳定性的乳腺纤维瘤组织蛋白质组的双向电泳图谱,并对其进行差异蛋白质组分析。方法:取乳腺纤维瘤病患者病变部位及正常乳腺组织,匀浆提取乳腺组织总蛋白,分别用Cy3或Cy5标记,每一对Cy3和Cy5标记样品都与一个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱经DeCyder软件分析。结果:在乳腺纤维瘤病的病变组织中,有37个蛋白质表达水平显著增加,另外8个蛋白质表达水平显著下降。结论:分析所得的45个差异蛋白质可能与乳腺纤维瘤疾病的发生与发展有关。

乳腺纤维瘤组织差异蛋白质组的研究

目的:应用凝胶内差异显示电泳和质谱方法研究乳腺正常组织及纤维瘤组织蛋白质组的变化,探讨乳腺纤维瘤的发病机理。方法:提取乳腺正常组织及纤维瘤组织总蛋白,分别用Cy3或Cy5标记,与一个Cy2标记的内标等量混合后,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱经De Cyder 6.5软件进行分析,筛选表达量差异超过两倍的蛋白质进行质谱鉴定。结果:15个蛋白质在乳腺正常组织及纤维瘤组织中有显著差异。其中,T细胞受体、钙磷脂结合蛋白A2、a-B crystallin、肌球蛋白轻链\T盒转录因子3、CDC16蛋白、血红素α链、RAB14、烯醇酶1表达量增加,Cu,Zn-超氧化物歧化酶、肽基脯氨酸异构酶、转甲状腺素蛋白、转甲状腺素蛋白突变体、阻抑素表达降低。结论:这15个蛋白质可能与乳腺纤维瘤的发生发展相关,可以作为乳腺纤维瘤早期检测和治疗药物筛选的候选指标。

肾上腺切除的肾阳虚大鼠肝组织蛋白质双向电泳图谱的建立与分析

目的:建立具有高分辨率和稳定性的大鼠肝组织蛋白质组研究的双向电泳图谱,并对其进行差异蛋白质组分析。方法:正常大鼠和肾上腺切除造成的肾阳虚模型大鼠,肝组织匀浆后提取总蛋白,用Cy3或Cy5标记,每一个Cy3标记样品和一个Cy5标记样品与一个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同波长单色光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱用DeCyder软件进行分析。结果:在肾阳虚大鼠肝组织,有8个蛋白质表达水平显著增加,9个蛋白质表达水平显著下降。结论:分析所得的17个差异蛋白质可能与肾阳虚疾病有关。

中医不同证型乳腺增生患者血清蛋白质组的研究

目的:应用凝胶内差异显示电泳和质谱技术研究不同证型乳腺增生病患者血清蛋白质组。方法:收集正常人及不同证型乳腺增生病患者血清,去除高丰度蛋白质后分别用Cy3或Cy5标记,每一对Cy3和Cy5标记样品都与一个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱经DeCyder6.5软件进行分析,筛选表达量有显著差异的蛋白质进行质谱鉴定。结果:与正常人相比,在乳腺增生患者血清中抗凝血酶lii、富含亮氨酸的α-2糖蛋白、HCCR结合蛋白2、结合珠蛋白2和转甲状腺蛋白及其变异体表达量增加。而SP40,40、Ras association and pleckstrin homology domains 1 iso-form3表达量下降。在不同证型乳腺增生患者血清中,抗凝血酶lii和SP40,40在肝郁气滞型表达量最高,痰瘀互结型次之,而冲任失调型表达量少;HCCRBP2在痰瘀互结型中表达量最高,在肝郁气滞型中表达量最低;转甲状腺素蛋白变异体在肝郁气滞型、冲任失调型和痰瘀互结型中表达依次降低。结论:这些蛋白质可能与乳腺增生病不同证型相关,可以作为乳腺增生病临床中医辨证论治的候选客观指标。

特发性高草酸尿大鼠肝脏蛋白质组的电泳分析

目的:建立稳定的特发性高草酸尿大鼠肝脏蛋白质组的双向电泳图谱,探讨其差异蛋白质组与特发性高草酸尿的关系。方法:取特发性高草酸尿大鼠及正常对照大鼠的肝组织300 mg,匀浆提取肝组织总蛋白,分别用Cy3或Cy5标记,每一对Cy3和Cy5标记样品均与一个Cy2标记的内标等量混合,采用凝胶内差异显示电泳(DIGE)技术进行电泳分离,经过不同激光下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。获得的图谱经DeCyderTMv6.5软件进行分析。结果:在特发性高草酸尿大鼠肝组织中共筛选出21个差异表达蛋白质点,有11个蛋白质表达水平显著增加,另外10个蛋白质表达水平显著下降。结论:利用DIGE技术可以作胶内对比分析,并可根据内标消除胶与胶之间的差异,从而提高统计可信度。分析出的21个差异蛋白质可能与特发性高草酸尿的发生有密切关系。

不同中医证型乳腺增生组织蛋白质组的研究

目的:应用凝胶内差异显示电泳技术和质谱技术研究不同中医证型乳腺增生组织蛋白质组。方法:提取不同证型乳腺增生组织总蛋白,分别用Cy3或Cy5标记,每对Cy3和Cy5标记样品都与1个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱经DeCyder 6.5软件进行分析,筛选表达量有显著差异的蛋白质进行质谱鉴定。结果:12个蛋白质在不同乳腺增生组织中有显著差异。其中,α-B crystallin,Cyclophilin A,Cypa在冲任失调型中表达量最高,肝郁气滞型次之,在痰瘀互结型中表达量最低。转甲状腺素蛋白变体,Pkci底物类似物、血红蛋白、脱氧血红蛋白和血红蛋白α链在肝郁气滞型中表达量最高,冲任失调型次之,在痰瘀互结型中表达量最低。而Cu,Zn-超氧(化)物歧化酶和转甲状腺素蛋白在肝郁气滞型、痰瘀互结型和冲任失调3型乳腺增生组织中表达依次降低。结论:这12个蛋白质可能与乳腺增生病不同证型相关,可以作为乳腺增生病临床中医辨证论治的候选客观指标。