凝胶电泳分离-液相色谱-质谱法分析林蛙油及其伪品中的特异性蛋白

本研究应用凝胶电泳分离、蛋白酶酶解、纳升液相色谱分离、串联质谱检测、数据库检索等技术,建立了林蛙油及伪品青蛙输卵管、牛蛙卵巢、牛蛙输卵管和明太鱼输卵管中特异性蛋白的鉴定方法。根据定性肽段数量、肽段的响应高低,蛋白在电泳图谱中条带位置的特异性等因素综合判断,筛选出林蛙油及其相关伪品的特异性蛋白,通过对特异性蛋白的分析测定,判断样品的真伪。采用该方法对市场上的4种林蛙油产品进行检测,通过分析特异性蛋白,发现所检测的样品均为林蛙油伪品。研究结果表明,利用凝胶电泳分离液相色谱质谱法构建的特异性蛋白识别技术可以有效检测林蛙油产品的真伪。

肝郁证辨证与相关蛋白关系初步研究

运用血清蛋白质组技术,辨病与辨证相结合,以不同疾病组肝郁证病人和正常人的血清为样本,通过二维凝胶电泳分离蛋白质组分制备蛋白质图谱,分析比较正常组与肝郁证组血清蛋白质图谱,发现差异蛋白群。建立重复稳定的血清蛋白质技术,以期为进一步生物质谱技术及生物信息学技术鉴定与肝郁证相关的蛋白质;从整体上探讨肝郁证特有蛋白质的表达,研究揭示肝郁证候的重要相关蛋白质特性奠定基础。

氨甲酰化重组人促红细胞生成素的制备方法及鉴定

氨甲酰化促红细胞生成素(carbamylated erythropoietin,CEPO)具有组织保护作用,又不具有促红细胞生成作用。本研究以促红细胞生成素为材料,用氰酸钾使之甲基化,获得CEPO,并通过SDS-聚丙烯胺凝胶电泳胶(sodium dodecly sulfate polyacrylamiide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴定,证实促红素已被氨甲酰化为氨甲酰基促红素,并且纯度较高。

Isolation of Lysozyme from Chicken Egg White Using Polyacrylamide-based Cation-exchange Cryogel

An effective cation-exchange chromatographic method for lysozyme isolation from chicken egg white is presented, using supermacroporous cryogel grafted with sulfo functional groups. The chromatographic processes were carried out by one-step and sequential elution, respectively. Sodium phosphate buffer （pH 7.8） containing different concentrations of NaC1 is used as elution agent. The corresponding breakthrough characteristics and elution behaviors in the cryogel bed were investigated and analyzed. Purity of lysozyme in the elution effluent was assayed by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis （SDS-PAGE）. The maximum purity of the obtained lysozyme was about 96%, and the cryogel is demonstrated as a potential separation medium for purification of high-purit lysozyme from chicken egg white.

聚焦高考题中的“电泳图谱”

DNA电泳是基因工程中最基本的技术。近年来基于DNA电泳图谱分析与比较,结合高中所学的基因诊断、DNA指纹技术以及基因克隆等相关内容的遗传学试题较为常见。以遗传学基本知识为背景,以DNA电泳图谱为情境,强调情境与立意相结合,体现高考能力考核目标和要求,很好地考查学生获取与处理表达信息能力和应用分析能力。一、电泳图谱概述1.原理电泳是利用带电分子或离子所带电荷或分子量不同,在电场中移动距离(或速度)

结核分枝杆菌强毒株和弱毒株的胞外蛋白比较分析

目的 通过结核分枝杆菌 (M .TB)强毒株H37Rv和弱毒株H37Ra胞外蛋白表达的比较 ,寻找差异蛋白并为下一步研究M .TB的毒力因子提供思路。方法 M .TBH37Rv和H37Ra菌株分别在苏通液体培养基培养 3周后提取胞外蛋白并定量 ,第一向电泳是用pH3～ 10线性IPG预制胶条进行等电聚焦 ,第二向电泳是用SDS-PAGE凝胶再分离蛋白。银染PAGE凝胶、干燥 ,用ImageScanner扫描凝胶 ,ImageMaster 2DElite 3 10 (图像分析软件 )分析 2D图像。结果 H37Rv和H37Ra胞外蛋白的斑点大部分在酸性区域 (pI小于 7 0 )。在极碱性区域 (pI大于 9 0 ) ,两者胞外蛋白的斑点数极少。在小分子区域可明显发现H37Rv有 3个蛋白斑点在H37Ra中缺失。结论 二维凝胶电泳技术是目前有效分离蛋白质的重要途径之一。