凝胶渗透色谱-光散射联用表征聚合物摩尔质量的实验教学改革

凝胶渗透色谱-光散射(gel permeation chromatography-light scatting,GPC-LS)联用是目前最常用的表征聚合物摩尔质量的方法之一,具有灵敏度高、结果准确等特点,在科学研究与生产实践中得到了广泛应用。“凝胶渗透色谱-光散射联用表征聚合物摩尔质量”是《高分子物理实验》课程中一个重要的教学内容。然而,目前的GPC-LS实验教学内容简单,缺乏深度。本文在该实验项目原有内容的基础上进行扩充,重新设计出多套实验项目:(1)选取商品化的聚苯乙烯为实验样品,利用GPC-LS对其摩尔质量、摩尔质量分布以及回转半径等分子结构参数进行表征;(2)选取两种分子结构参数接近的聚丙烯腈样品,借助质量微分分布曲线揭示这两种样品在摩尔质量分布中的细微差别;(3)选取一系列不同摩尔质量的聚乙二醇为实验样品,通过比较其色谱图分析摩尔质量的高低对色谱峰的影响;(4)选取3种不同的聚合物(聚丙烯腈、聚甲基丙烯酸甲酯、聚β-环糊精)样品,借助构象图对其分子链的构象进行分析。此外,本文对实验教学方法进行了改革,将被动学习转变为主动学习,提高了学生的自主学习能力。通过本实验项目的教学改革探索,使学生能更加全面地理解凝胶渗透色谱-光散射联用的原理及应用,开拓了学生的知识视野,激发了学生的学习热情,提升了实验教学效果。

凝胶色谱-蒸发光散射检测法测定紫杉醇脂肪乳注射液中泊洛沙姆188的含量

目的：建立凝胶色谱-蒸发光散射检测法（GPC-ELSD）测定紫杉醇脂肪乳注射液中泊洛沙姆188的含量。方法：采用UltrahydrogelTM（7.8 mm×300 mm,250）水性凝胶柱,以乙腈-水（20∶80）为流动相,流速1.0 mL·min^-1,蒸发光散射器的漂移管温度为50℃,载气流速为1.9 L·min^-1,进样量20μL。结果：泊洛沙姆188浓度在0.4～1.2 mg·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.9998）;定量限为0.8μg;泊洛沙姆188的平均回收率（n=9）为101.6%,RSD为0.65%;脂肪乳中的其他成分对检测没有干扰。结论：该检测方法经方法学验证,适用于紫杉醇脂肪乳注射液中泊洛沙姆188的含量测定。

凝胶色谱-蒸发光散射检测法检测中药注射剂中吐温80的含量

目的:运用凝胶色谱-蒸发光散射检测法(GPC-ELSD)建立一种中药注射剂中吐温80检测的通用方法。方法:采用TSK gel G2000SWXL(8.7 mm×30.0 cm)色谱柱,柱温30℃;以0.02 mol.L-1醋酸铵溶液-乙腈(90∶10)为流动相,流速0.6mL.min-1,进样量20μL;采用Alltech ELSD2000ES检测器,漂移管温度110℃,氮气流速2.3 L.min-1。结果:吐温80浓度在0.5～3.1 mg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9961);吐温80的回收率范围在93.8%～99.2%之间(n=5),RSD范围在0.8%～2.8%之间(n=5);检出限为1.27μg。用该方法检测了19种78批中药注射剂,吐温80含量在0～20 mg.mL-1。结论:该检测方法灵敏、简便,专属性强,重复性好,能够满足吐温80的含量测定。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定N-乙酰氨基葡萄糖中的葡萄糖和氨基葡萄糖的含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定发酵工艺来源的N-乙酰氨基葡萄糖中的葡萄糖和氨基葡萄糖的含量。方法采用Asahipak NH_(2)P-50 4E(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水(80∶20)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为30℃;使用蒸发光散射检测器,载气为空气,气体压力为350 kPa,漂移管温度为80℃,增益为5。结果N-乙酰氨基葡萄糖与葡萄糖和氨基葡萄糖之间分离度良好,葡萄糖在76.12~304.50µg·mL^(-1)、氨基葡萄糖在124.68~498.71µg·mL^(-1)、N-乙酰氨基葡萄糖在150.15~600.60µg·mL^(-1)与峰面积线性关系良好,R^(2)均大于0.9990。结论本方法准确、简便,可用于发酵工艺来源的N-乙酰氨基葡萄糖中葡萄糖和氨基葡萄糖的检测。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定芪黄胶囊中黄芪甲苷的含量

目的:研究芪黄胶囊中黄芪甲苷含量测定的前处理方法,并建立以高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定芪黄胶囊中黄芪甲苷含量的方法。方法:采用溶剂提取结合中性氧化铝进行样品前处理,用HPLC法,以蒸发光散射检测器测定黄芪甲苷含量。色谱柱为Kromasil C18,流动相为乙腈-水(30∶70),流速为0.8ml/min;ELSD参数气体流速为2.0ml/min,漂移管温度为90℃;进样量为10μl。结果:黄芪甲苷进样量在0.8μg^8μg范围内呈现良好的线性关系(r=0.9 998);平均回收率为99.2%(RSD=1.2%)。结论:本试验中前处理方法能有效除去芪黄胶囊复方中杂质对黄芪甲苷的干扰,所建立的含量测定方法操作简便、快速、准确、适用范围广。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定玉屏风胶囊中黄芪甲苷的含量

建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定玉屏风胶囊中黄芪甲苷的含量。采用Phenomenex C18(4.6mm×250mmi.d.,5μm)色谱柱,柱温为35℃,以乙腈-水(35:65)为流动相,以蒸发光散射检测器进行检测。以峰面积的常用对数(Y)对进样量的常用对数(X)进行线性回归,回归方程为Y=1.6709X+14.2699(r=0.9998),线性范围为1～19μg。加标回收率为86.7%～96.2%,测定结果的RSD为0.22%(n=7)。方法准确、可靠、重复性好,可有效控制玉屏风胶囊的质量。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定静心胶囊中黄芪甲苷的含量

目的：制定静心胶囊中黄芪甲苷的含量测定方法。方法：用高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC—ELSD），Hypersil C18色谱柱，流动相为甲醇-水（80：20），流速为0．8mL·min^-1；蒸发光散射检测器参数：漂移管温度为40℃，气压为3．5bar。结果：线性范围为0．7944～6．3552μg，回归方程Y=7．1546＋1．5638X，r=0．9996，回收率为98．35%。RSD为1．26%。结论：该方法灵敏、可靠、准确、重现性好，可作为静心胶囊的质量控制方法。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定脑络通胶囊中黄芪甲苷含量

目的采用高效液相色谱-蒸发光散射检测（ELSD—HPLC）法测定脑络通胶囊中黄芪甲苷的含量。方法采用HypersilODS2色谱柱（150mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-水（30：70），流速为1．0mL／min，柱温为25℃；蒸发光散射检测器条件，漂移管温度50cc。结果黄芪甲苷质量浓度在0．0667～0．4668g／L（r=0．9999）范围内与峰面积呈良好线性关系，平均加样回收率为100．70％（n=9），RSD=1．28％。结论该方法操作简便、准确、稳定、灵敏度高，可作为该制剂的质量控制方法。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定藜芦中的介藜芦碱和藜芦胺

建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测（HPLC-ELSD）测定藜芦中介藜芦碱、藜芦胺含量的方法,并对4种藜芦属药材样品进行了测定。采用的色谱柱为Kromasil C18柱（250mm×4.6mm,5μm）,以乙腈和0.1%三氟乙酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,洗脱程序为：0-5min,20%乙腈;5-30min,20%乙腈-40%乙腈,30-40min,40%乙腈-20%乙腈;40-45min,20%乙腈;流速为0.8mL/min;柱温为35℃;采用ELSD检测,漂移管温度为98℃,载气流速2.2L/min。介藜芦碱和藜芦胺的线性范围分别为42.05-980mg/L和43.77-1 020mg/L;平均回收率分别为99.2%和101.4%,相对标准偏差分别为1.7%和2.1%（n=6）;信噪比为3时,测得介藜芦碱和藜芦胺最低检测限分别为18.37mg/kg和21.50mg/kg。该方法快速简便、灵敏度和分离度好,适用于藜芦药材中活性生物碱的测定。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定柴胡药材中柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的含量

目的 制定柴胡药材中柴胡皂苷a、d的含量测定方法。方法 用高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD），Alltima C18色谱柱，流动相甲醇-水（80：20），速度0．8ml·min^-1；蒸发光散射检测器参数：漂移管温度40℃，气压3.5bar。结果柴胡皂苷a和柴胡皂苷d分别在1．908-19．08μg（r=0．9996）和1．804-18．04μg（r=0．9992）范围内线性关系良好，平均回收率分别为98．35％（RSD=1．26％）和97．64％（RSD=1．58％）。结论 该方法简便、灵敏、可靠、准确、重现性好，可作为柴胡药材的质量控制方法。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定心脑补益口服液中黄芪甲苷含量

目的探讨心脑补益口服液中黄芪甲苷含量测定的方法。方法采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法,色谱柱为Shimadzu C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(32:68),流速1.0 mL/min。结果黄芪甲苷进样量在1.78～8.90μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0.999 8,n=5);平均回收率为100.46%,RSD=1.28%(n=6)。结论所用方法快速简便、准确可靠,能有效控制心脑补益口服液的质量。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定中药及制剂中齐墩果酸和熊果酸的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定中药饮片及中成药制剂中齐墩果酸和熊果酸的含量。方法:采用Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,柱温40℃;甲醇-水-冰醋酸(260:40:0.15)为流动相,流速0.6 mL·min-1;蒸发光散射检测器检测,漂移管温度85℃,气体流速2.60 L·min-1。结果:齐墩果酸在0.562-2.81μg范围内(r=0.9998),熊果酸在0.380-1.90μg范围内(r=0.9996)线性关系良好。药材(木瓜)中齐墩果酸和熊果酸的回收率分别为98.2%和99.8%,RSD(n=5)分别为3.2%和3.4%。中成药制剂(知柏地黄丸)中齐墩果酸和熊果酸的回收率分别为100.0%和100.1%,RSD(n=5)分别为2.1%和2.9%。结论:方法简便、准确,重现性好。

不同炮制方法对厚朴中厚朴酚含量影响的高效液相色谱-蒸发光散射检测法研究

目的探讨不同炮制方法对厚朴中厚朴酚含量的影响。方法采用HPLC-ELSD法测定不同厚朴炮制品中厚朴酚的含量。结果不同炮制方法均能影响厚朴中厚朴酚的溶出度,姜制厚朴中厚朴酚的含量最高,厚朴生品的厚朴酚含量最低。结论炮制方法对厚朴中厚朴酚的含量影响较大,HPLC-ELSD可以较好的应用于厚朴炮制的研究。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定鹤蟾片中贝母素甲和贝母素乙的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定鹤蟾片中贝母素甲和贝母素乙的含量。方法:采用 HiQsil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,柱温为25℃,以乙腈-甲醇-二乙胺(60:40:0.05)为流动相,流速为0.8 mL·min^(-1);蒸发光散射检测器检测,漂移管温度为80℃,气体流速为2.0 L·min^(-1)。结果:在选定的色谱条件下,以峰面积的常用对数(Y)对进样量的常用对数(X)进行线性回归,贝母甲素和贝母乙素的回归方程分别为 Y=1.557X+1.666和 Y=1.700X+1.571,线性范围分别为0.29～2.80μg(r=0.9996)和0.34～3.40μg(r=0.9999);加样回收率(n=5)分别为99.2%和99.4%,RSD 分别为2.7%和3.1%。结论:本法简便、准确,重复性好,可用于该制剂的质量控制分析。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定桑白皮中1-脱氧野尻霉素的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定桑白皮中1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojifimycin,简称 DNJ)含量。方法:采用氨丙基键合硅胶为填充剂的色谱柱,流动相为乙腈-水(78:22),流速:0.8 mL·min^(-1),ELSD 检测器的漂移管温度为50℃,载气流速2.0×10~5 Pa。结果:DNJ 在2.12～21.20μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9999;平均加样回收率为97.43%(n=6)。结论:该方法重现性好,灵敏度高,可有效控制桑自皮中 DNJ 的含量。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定脑脉康注射液中黄芪甲苷的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定脑脉康注射液中黄芪甲苷的含量。方法:采用Lichrospher—C18(5μm,150 mm×6.0 mm)色谱柱,以甲醇-水(8:2)为流动相;流速:1.0 mL·min-1;气化室温度:100℃;N2气体流速:2.27 L·min～1。结果:黄芪甲苷在40.8—163.3μg·mL-1范围内呈良好的线性关系,r=0.9997;平均加样回收率为97.24%,RSD为1.2%。结论:本法操作简便,易行,重复性好,灵敏度高,可有效控制脑脉康注射液制剂中黄芪甲苷的内在质量。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定肾康宁片中黄芪甲苷的含量

目的建立肾康宁片的定量质控方法。方法采用HPLC-ELSD法测定肾康宁片中黄芪甲苷的含量。结果黄芪甲苷进样量在1.036-7.77μg内呈良好的线性关系,平均回收率为98.6%,RSD=1.3%（n=11）。结论该方法简便,重复性好,可用于控制肾康宁片的质量。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定花芪通脉颗粒中黄芪甲苷的含量

目的建立测定花芪通脉颗粒中黄芪甲苷含量的方法。方法采用高效液相色谱-蒸发光散射检测（HPLC-ELSD）法，固定相：ZORBAX-C18（4．6mm×150mm，5μm）色谱柱；流动相：乙腈-水（35：65）；流速：0．8mL-min^-1；柱温：30℃；蒸发光散射检测器参数：漂移管温度为105℃，载气为氮气，气体流速为2．70mL·min^-1，压力为2BAR。结果黄芪甲苷在1．53-7．64μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9996），黄芪甲苷平均加样回收率为98．6％，RSD：1．17％（n：5）。结论该检测方法可靠、准确、重现性好，适用花芪通脉颗粒中黄芪甲苷的含量测定。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定健天颗粒中黄芪甲苷含量

目的建立测定健天颗粒中黄芪甲苷含量的高效液相色谱-蒸发光散射检测法。方法色谱柱采用Agilent Eclipse XDB-C18柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水-四氢呋喃(27:69:4),流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测器温度为40℃,氮气压力0.41 MPa。结果黄芪甲苷进样量在0.98～4.9μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0.9990),平均加样回收率为99.08%,RSD为1.11%(n=6)。结论所建立的方法准确、重复性好,可用于健天颗粒的质量控制。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定硫酸庆大霉素注射剂中有关物质

目的建立硫酸庆大霉素注射剂中有关物质的高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)方法。方法色谱柱采用耐酸Apollo C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以0.2mol/L三氟醋酸溶液-甲醇(94∶6)为流动相,蒸发光检测器的漂移管温度为110℃,载气流量为2.0L/min。结果硫酸庆大霉素与有关物质分离完全,可用外标法测定硫酸小诺霉素和硫酸西索米星的含量。结论所用方法准确、灵敏度高,可有效地控制药品质量。